分子生物學(xué)-核酸雜交教學(xué)大綱

廣州醫(yī)科大學(xué)本科課程學(xué)習(xí)大綱課程名：分子生物學(xué)課程學(xué)時(shí)： .學(xué)分：開(kāi)課單位：生物化學(xué)教研室廣州醫(yī)科大學(xué)教務(wù)處編印二O一六年九月#一、課程簡(jiǎn)介分子生物學(xué)是從分子水平來(lái)研究生命現(xiàn)象的科學(xué)，其核心內(nèi)容是通過(guò)生物的物質(zhì)基礎(chǔ)—一核酸、蛋白質(zhì)、酶等生物大分子的結(jié)構(gòu)，功能及其相互作用等運(yùn)動(dòng)規(guī)律的研究來(lái)闡明生命現(xiàn)象的分子基礎(chǔ)，從而探索生命的奧秘。其基本理論和技術(shù)是生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)實(shí)踐及研究的共同語(yǔ)言與工具。通過(guò)本課程學(xué)習(xí)，旨在是學(xué)生掌握分子生物學(xué)基本理論與常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法，為后續(xù)課程的學(xué)習(xí)及今后的工作實(shí)踐和科學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。本課程需要有機(jī)化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)等作為先修課程。本課程共36學(xué)時(shí)，其中理論30學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)6學(xué)時(shí)。本課程適用臨床醫(yī)學(xué)、中西醫(yī)臨床醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)專業(yè)、檢驗(yàn)技術(shù)、醫(yī)學(xué)影像學(xué)、麻醉學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、食品質(zhì)量與安全等專業(yè)。本大綱是以國(guó)家級(jí)規(guī)劃教材《生物化學(xué)與分子生物學(xué)》第八版中第4篇為基礎(chǔ)，并配以我校生化教研室自編的補(bǔ)充教材作為編寫(xiě)的藍(lán)本。Molecularbiologyisonesciencestudythelifephenomenaatmolecularlevel,itscorecontentisbythestudyofthebiologicalmaterialbasis,namelythestructure,functionandinteractionwitheachotherofnucleicacids,proteinsandotherbiologicalmacromolecules,toclarifythemolecularbasisofbiologicalphenomena,inordertoexplorethemysteriesoflife.Molecularbiologybasictheoryandtechnologyarethecommonlanguageandtoolstolifesciences,medicalpracticeandrelatedresearch.Thiscoursedescribesintheformoftopicsaboutthebasictheoriesandmethodsofsomecommontechnologyofmolecularbiology.Thiscourseisdesignedtoenablestudentstomasterthemolecularbiologybasictheoryandcommonlyusedexperimentaltechniques,tolaythefoundationforfuturelearningofmedicalcurriculum,scientificresearchandclinicalpractice.Thiscourserequiresorganicchemistry,cellbiology,biochemistry,genetics,etcasprerequisitecourses.Thiscoursecontainsatotalof36classes,including30classesoftheory(containingself-study3classes),6classesoflaboratory.Thiscourseissuitableforundergraduatemedicalexaminationtechnology.二、學(xué)時(shí)分配序號(hào)學(xué)習(xí)內(nèi)容學(xué)習(xí)形式學(xué)時(shí)核酸雜交、基因芯片專題講授技術(shù)的原理與應(yīng)用專題講授基因文庫(kù)、重組技術(shù)專題講授生物大分子相互作用研究技術(shù)，自然界的重組和基因轉(zhuǎn)移專題講授基因結(jié)構(gòu)與功能分析技術(shù)專題講授基因診斷專題講授基因治療專題講授組學(xué)與醫(yī)學(xué)專題講授總計(jì)序號(hào)教學(xué)內(nèi)容（實(shí)驗(yàn)）教學(xué)形式學(xué)時(shí)質(zhì)粒的提取與鑒定實(shí)驗(yàn)總計(jì)三、預(yù)期學(xué)習(xí)結(jié)果（一）知識(shí)第一章核酸雜交、基因芯片【掌握】核酸變性、復(fù)性和核酸雜交的基本概念；掌握值、核酸探針定義；掌握缺口平移和隨機(jī)引物法原理和過(guò)程。2.生物芯片、基因芯片、蛋白質(zhì)芯片的基本概念；基因芯片的基本原理、類型以及特點(diǎn)?！臼煜ぁ坑绊懼档囊蛩睾陀绊懽冃缘囊蛩?。2.核酸探針的種類和選擇探針的原則。3．非放射性探針的檢測(cè)原理和顯色系統(tǒng)。熟悉選擇固相雜交支持物的原則。印跡雜交的和 印跡雜交基本方法。5．基因芯片的制備以及應(yīng)用領(lǐng)域?！玖私狻?探針標(biāo)記的分類，放射性同位素探針的檢測(cè)；了解固相雜交類型及適應(yīng)范圍。.基因芯片信號(hào)檢測(cè)與信息分析。第二章 技術(shù)的原理與應(yīng)用【掌握】1掌.握聚合酶鏈反應(yīng)的原理。2.掌握聚合酶鏈反應(yīng)的基本過(guò)程。3掌.握參與聚合酶鏈反應(yīng)的五個(gè)基本要素?！臼煜ぁ渴煜?的類型。熟悉 的反應(yīng)過(guò)程及條件?！玖私狻苛私饧夹g(shù)的應(yīng)用范疇。第三章基因文庫(kù)、重組技術(shù)【掌握】掌握重組 技術(shù)的基本過(guò)程。2熟限制性核酸內(nèi)切酶的概念和特點(diǎn)，常用工具酶的作用。3熟常用克隆載體的種類及應(yīng)用。4熟目的基因的獲取方法。5熟外源基因與載體的連接。6重組 導(dǎo)入受體菌。7重組體的篩選a互補(bǔ)篩選?！臼煜ぁ烤酆厦浮⑵?、連接酶等常用的工具酶。2.真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染，克隆基因的表達(dá)?！玖私狻恐亟M 技術(shù)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系。2基.因的定點(diǎn)誘變和蛋白質(zhì)工程。第四章生物大分子相互作用研究技術(shù)，自然界的 重組和基因轉(zhuǎn)移【掌握】1重掌握酵母雙雜交技術(shù)的原理和流程；掌握染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)的原理和流程；2重同源重組的概念；位點(diǎn)特異性重組的概念；轉(zhuǎn)座子，轉(zhuǎn)座重組的概念?！臼煜ぁ?重標(biāo)簽蛋白沉淀技術(shù)的原理和流程。技術(shù)的原理和流程。3重原核細(xì)胞基因重組方式。【了解】1重蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù)的用途。蛋白質(zhì)相互作用分析技術(shù)的用途。第五章基因結(jié)構(gòu)與功能分析技術(shù)【掌握】i 測(cè)序技術(shù)的原理和方法。2．基因轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)及啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)分析技術(shù)。【熟悉】基因生物學(xué)功能鑒定技術(shù)?！玖私狻炕虮磉_(dá)產(chǎn)物分析技術(shù)。第六章基因診斷【掌握】1重等位基因特異寡核苷酸探針雜交法的原理。2重反向點(diǎn)雜交、限制性核酸內(nèi)切酶酶譜分析法的原理。3重限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析法的原理。4重單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析法的原理。指紋法遺傳標(biāo)志連鎖分析方法的原理?！臼煜ぁ?．基因診斷的概念和優(yōu)點(diǎn)。2重常用基因診斷方法的操作和特點(diǎn)。【了解】基因診斷的應(yīng)用。第七章基因治療【掌握】．基因治療、基因增補(bǔ)、基因失活、病毒載體的概念。.基因治療的基本策略。.基因增補(bǔ)策略中常用技術(shù)的原理。.基因失活策略中常用技術(shù)的原理。.逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的優(yōu)缺點(diǎn)?！臼煜ぁ浚蛑委煹幕境绦?。．腺病毒載體的優(yōu)缺點(diǎn)。【了解】.逆轉(zhuǎn)錄病毒載體和腺病毒載體的制備和擴(kuò)增。.基因治療的應(yīng)用及存在的問(wèn)題。第八章組學(xué)與醫(yī)學(xué)【掌握】1.基因組，基因組學(xué)，結(jié)構(gòu)基因組學(xué)。2.基因組的遺傳圖，物理圖，序列圖，轉(zhuǎn)錄圖。3.蛋白質(zhì)組，蛋白質(zhì)組學(xué)。4.表達(dá)蛋白質(zhì)組學(xué)，雙相電泳。5.轉(zhuǎn)錄組學(xué)。6.代謝組學(xué)。【熟悉】1.人類基因組計(jì)劃。2.基因組的特點(diǎn)。3.功能蛋白質(zhì)組學(xué)。4.轉(zhuǎn)錄組。5.代謝組。【了解】1.組學(xué)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系。2.組學(xué)與中醫(yī)藥的關(guān)系。（二）實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一質(zhì)粒的提取與鑒定【掌握】1從大腸桿菌提取質(zhì)粒 的原理和操作。2用于抽提質(zhì)粒 的主要試劑的作用。3.瓊脂糖凝膠電泳的原理和操作。【熟悉】質(zhì)粒凝膠電泳結(jié)果的判斷與分析?！緝?nèi)容】1．裂解大腸桿菌；2抽提、分離蛋白質(zhì)等生物雜質(zhì)；3 電泳樣品的制備；4．點(diǎn)樣、電泳；5．紫外激發(fā)熒光，顯示質(zhì)粒的電泳結(jié)果。（三）能力和素質(zhì)1.了解分子生物學(xué)研究所需要的重要技術(shù)的基本原理和操作流程；2.對(duì)醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)領(lǐng)域中的最新研究成果和目前的關(guān)注方向有大致的認(rèn)識(shí)；3.通過(guò)學(xué)習(xí)分子生物學(xué)新近的成果理論，以及分子生物學(xué)常用的研究技術(shù)，為學(xué)生未來(lái)從事生命科學(xué)領(lǐng)域的分子水平研究奠定相關(guān)知識(shí)與技能基礎(chǔ)；4.具有自主學(xué)習(xí)和終身學(xué)習(xí)的能力。四、評(píng)價(jià)與考核.形成性評(píng)價(jià)設(shè)計(jì)內(nèi)容反饋時(shí)間反饋方式備注實(shí)驗(yàn)一、質(zhì)粒的提取與鑒定實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)課內(nèi)現(xiàn)場(chǎng)抽查學(xué)生演示、教師當(dāng)場(chǎng)講評(píng)，總結(jié)性反饋質(zhì)粒的提