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實(shí)驗(yàn)二油鏡的使用和細(xì)菌形態(tài)的觀察
實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)習(xí)并掌握油浸系物鏡的使用方法
2.利用油鏡觀察細(xì)菌的形態(tài)和特殊構(gòu)造實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察二、實(shí)驗(yàn)原理
人眼觀察物體的能力是有限的。一般的情況下,人眼只能分辨相距0.1-0.2mm的兩個(gè)物體。也就是說(shuō),當(dāng)兩個(gè)物體相距不到0.1mm的時(shí)候,人眼就會(huì)把它們看成是一個(gè)物體了。這個(gè)極限便稱為人眼的分辨本領(lǐng)。實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察二、實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察
物鏡低倍鏡高倍鏡油鏡(OI)鏡頭和玻片間以香柏油代替空氣實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察
用香柏油取代空氣的作用:①增加視野照明度,改善觀察效果空氣n=1.0玻璃n=1.50香柏油n=1.52
當(dāng)光線從其它介質(zhì)射入空氣時(shí),折射角大于入射角
物鏡實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察
用香柏油取代空氣的作用:
顯微鏡分辨率示意圖
物鏡實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察0.5λ能分辨的最小距離(D)=————
nsinθ
物鏡實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察0.5λ能分辨的最小距離(D)=————
nsinθ數(shù)值孔徑(NA)n:玻片與物鏡間介質(zhì)的折射率θ:為物鏡鏡口角的半數(shù),它取決于物鏡的直徑和工作距離低倍鏡高倍鏡油鏡(OI)
物鏡實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察
用香柏油取代空氣的作用:
②提高顯微鏡的分辨率
物鏡實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察
肉眼分辨率一般只有0.2mm
光學(xué)顯微鏡分辨率0.2μm
電子顯微鏡可達(dá)0.2nm實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察顯微鏡、香柏油、鏡頭清潔液(二甲苯)、擦鏡紙等。變形桿菌、枯草桿菌、破傷風(fēng)梭菌、園褐固氮菌、肺炎球菌等固定裝片三、實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察四、實(shí)驗(yàn)步驟(一)觀察前的準(zhǔn)備將顯微鏡平穩(wěn)置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,鏡座距離實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊約4厘米,坐正,練習(xí)用雙眼觀察。(二)低倍鏡觀察染色裝片轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)器至視野中出現(xiàn)清楚的物象為止。移動(dòng)裝片,將合適的觀察部位移至視野中央。實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察四、實(shí)驗(yàn)步驟(三)高倍鏡觀察用細(xì)調(diào)節(jié)螺旋校正焦距使物像清晰為止,將最適宜觀察部位移至視野中心。實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察(四)油鏡觀察
1.在玻片的標(biāo)本的鏡檢部位(鏡頭的正下方)滴一滴香柏油,將油鏡轉(zhuǎn)至正下方,使油鏡浸在油中,鏡頭幾乎與玻片接觸,但不可壓及玻片,以免損壞玻片和鏡頭;
2.將聚光器升至最高并開(kāi)足光圈,用細(xì)調(diào)節(jié)螺旋調(diào)節(jié)至物像清晰為止;
3.如果鏡臺(tái)下降太快未找到物象,需從側(cè)面注視,小心緩慢上升鏡臺(tái),重新使鏡頭浸在油中,用粗調(diào)節(jié)螺旋將鏡臺(tái)下降(切忌反轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)器),當(dāng)視野中出現(xiàn)物象時(shí),再用細(xì)調(diào)節(jié)螺旋調(diào)節(jié)到物象清楚為止。實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察變形桿菌(示周生鞭毛)鞭毛實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察肺炎球菌莢膜菌體實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察破傷風(fēng)梭菌枯草芽孢桿菌芽孢蘇云金桿菌實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用和細(xì)胞形態(tài)的觀察(五)鏡檢完畢后的工作
1.上升鏡筒,取下載玻片;
2.用擦鏡紙拭去鏡頭上的香柏油,然后用擦鏡紙蘸少許鏡頭清潔液(或二甲苯)擦去鏡頭上殘留的油跡,最后再用干凈的擦鏡紙擦去殘留的清潔液;
3.將顯微鏡各部分還原,物鏡呈“八”字形降下,放入顯微鏡廚。四、實(shí)驗(yàn)步驟
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