逆轉(zhuǎn)錄病毒載體PPT

1、關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄病毒載體第一張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月目前，多數(shù)研究集中在將外源基因 插人到基因組的某個(gè)位置， 以促進(jìn)或抑制某種特定基因的表 達(dá)， 這就要求有一種可以將外源基因引入機(jī)體細(xì)胞中的運(yùn)載 工具 ， 而逆轉(zhuǎn)錄病毒載體正是迎合了這種需要而產(chǎn)生的。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄病毒的特性設(shè)計(jì)出的一種病毒表達(dá)載體。第二張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月逆轉(zhuǎn)錄病毒是一種單鏈 R N A病毒， 它是能 夠在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下將 R N A轉(zhuǎn)變成 c D N A， 再在 D N A復(fù) 制、 轉(zhuǎn)錄、 翻譯等蛋白酶作用下擴(kuò)增的一類病毒。一般來說， 逆轉(zhuǎn)錄病毒 R N A基因組的核心部分都包

2、括三個(gè)開放的讀碼結(jié)構(gòu)： g a g一編碼病毒的核心蛋 白、 p o l 一編碼逆轉(zhuǎn)錄酶 、 e n v一 編碼病毒的被膜糖蛋白。第三張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月應(yīng)用機(jī)理 這種病毒表達(dá)載體是將 g a g 、 p o l 、 e n v 等三個(gè)基因的大部分或全部除去， 由于沒有 g a g 、 p o l 、 e n v三個(gè)基因的存在而不能夠產(chǎn)生有感染性的病毒顆粒， 因此， 人們又設(shè)計(jì)出了一種特殊的包裝細(xì)胞株。第四張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月這種包裝細(xì)胞株能夠表達(dá) 逆轉(zhuǎn)錄病毒的全部蛋白，逆轉(zhuǎn)錄病毒載體在整合入宿主基因組后， 可以與包裝細(xì)胞形成的病毒缺失蛋白重組成具有感

3、染能力的病毒顆粒。第五張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月將收集的病毒顆粒感染靶細(xì)胞就可以將目的基因整合到靶細(xì)胞染色體上， 基因活性得到表達(dá)。而目的基因可以通過細(xì)胞分裂傳給下一代子細(xì)胞。永久穩(wěn)定地表達(dá)目的蛋白。第六張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月應(yīng)用用于基因治療外源基因表達(dá) 第七張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月基因治療 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體無疑是在基因治療中傳遞目的基因最有效的運(yùn)載工具， 廣泛應(yīng)用于人類基因治療的研究中。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體， 攜帶所要表達(dá)的目的基因， 可以用于基因相關(guān)疾病的檢測及治療。第八張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月用于腺苷脫胺酶缺陷癥的治療1

4、 9 9 0年， W F r e n c h A n d e r s o n在美國實(shí)施的第一例基因治 療就是應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體治療腺苷脫氨酶缺陷癥( A D A) 。腺苷脫氨酶( A D A) 缺乏癥是一種嚴(yán)重的免疫缺陷癥， 腺苷脫氨酶的缺乏可使 T淋巴細(xì)胞因該酶缺乏后一些代謝產(chǎn)物的累積而死亡 ， 從而導(dǎo)致嚴(yán)重的聯(lián)合性免疫缺陷癥( S C I D) 。手術(shù) 取得了良好的效果， 術(shù)后并沒有發(fā)現(xiàn)患者的不良反應(yīng)。第九張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月用于癌癥的治療 目前， 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體在癌癥治療方面被廣泛的研究，傳統(tǒng)的化療方法雖然能夠抑制癌細(xì)胞的生長，延長患者的生命，但對患者的機(jī)體也有很大

5、損害，因此，人們開始研究在分子水平上抑制或消滅癌細(xì)胞，逆轉(zhuǎn)錄病毒載體在此方面具有著巨大的應(yīng)用潛力。第十張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月劉穎斌 等人將對癌細(xì)胞具有抑制作用的ANGPTL4基因與逆轉(zhuǎn)錄病毒載體相連， 用脂質(zhì)體法將重組病毒粒子感染人肝癌細(xì)胞 Hep Gz 。結(jié)果顯示人肝癌細(xì)胞生長速度 明顯減緩， 重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體所介導(dǎo)的人ANGPTL4基因轉(zhuǎn)移很可能是一種有效的肝癌基因治療方式。 第十一張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月逆轉(zhuǎn)錄病毒載體在后天獲得性遺傳疾病如艾滋病及其基礎(chǔ)性研究川，神經(jīng)系統(tǒng)疾病, 等疾病的治療方面同樣有著巨大的應(yīng)用潛力， 因此受到人們的廣泛研究。第十

6、二張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月外源基因表達(dá)用于基因工程疫苗的研制 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體作為一種表達(dá)載體，可以整合到動(dòng)物細(xì)胞染色體上，不斷的表達(dá)其所攜帶的蛋白。應(yīng)用這一特性，將編碼主要致病基因的保護(hù)性抗原基因連接在載體上，使其 在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)蛋白， 刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，為制備動(dòng)物基因工程亞單位疫苗、 基因工程 D N A疫苗的研制開辟了一條新的路徑。第十三張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月RN A 干擾 簡單地說， RNA干擾是指一種分子生物學(xué)上由雙鏈 RNA 誘發(fā)的基因沉默現(xiàn)象。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體介導(dǎo)的 R N A i 技術(shù)可以長期穩(wěn)定表達(dá)siRNA ,從而實(shí)現(xiàn)基因的穩(wěn)定沉

7、默。第十四張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月問題 對環(huán)境條件要求高 在不適條件下，重組逆轉(zhuǎn)錄病毒會(huì)失去其感染能力，因此 ，保持逆轉(zhuǎn)錄病毒的存在最適條件是非常關(guān)鍵的。插入誘變 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體經(jīng)過包裝后產(chǎn)生的病毒插入到基因組中可引起基因突變。第十五張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月癌基因激活 由于逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的插入， 使原來存在于宿主染色體上的癌基因被激活 ， 而引起癌癥.引起機(jī)體免疫反應(yīng)而被清除轉(zhuǎn)錄病毒載體用于基因治療最終會(huì)用于體內(nèi)，由于機(jī)體內(nèi)復(fù)雜的免疫環(huán)境，有可能當(dāng)逆轉(zhuǎn)錄病毒進(jìn)入體內(nèi)，在沒有整合到染色體上時(shí)就被清除。第十六張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月錯(cuò)配率高 逆

8、轉(zhuǎn)錄病毒用于基因治療的另一個(gè)不利之處在于，其在逆 轉(zhuǎn)錄過程中有很高的錯(cuò)誤率，這種逆轉(zhuǎn)錄過程錯(cuò)誤率可導(dǎo)致在基因治療過程中宿主細(xì)胞程序性死亡或基因突變。第十七張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月應(yīng)用前景 目前，基因治療被越來越多應(yīng)用于疾病治療，而作為基因治療中不可或缺的 目的基因運(yùn)載工具，逆轉(zhuǎn)錄病毒載體以其能夠穩(wěn)定，永久地整合到宿主染色體上，并穩(wěn)定表達(dá)目的基因，日益受到更多的科研工作者的關(guān)注。第十八張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月但 由于目前我們所涉及的領(lǐng)域更多的還是體外研究 ， 當(dāng)逆轉(zhuǎn)錄病毒載體用于體內(nèi)治療時(shí)就會(huì)更多地涉及到應(yīng)用安全問題、載體產(chǎn)物問題、基因在寄主細(xì)胞中的表達(dá)控制問題等。第十九張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 如何提高病毒的感染效力， 并持久穩(wěn)定地表達(dá)目的基因是今后研究逆轉(zhuǎn)錄病毒載體應(yīng)用的一個(gè)重要內(nèi)容。第二十張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月在疾病疫苗研究方面，應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的特性，用相應(yīng)疾病的抗原基因構(gòu)建表達(dá)載體，同時(shí)，可以對載體進(jìn)行改造，減少機(jī)體對表達(dá)蛋白的免疫作用， 提高目的基因的蛋白表達(dá)量。第二十一張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月