流感嗜血桿菌

腸道桿菌(entericbacilli)※

一大群居住在人和動(dòng)物腸道中生物學(xué)性狀近似的Ｇ－桿菌,廣泛分布于水、土壤或腐物中。

※

分類(lèi)學(xué)上的地位:《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)

》(第９版)的第Ⅰ大類(lèi)的兼性厭氧Ｇ－桿菌?！?/p>

多數(shù)是腸道的正常菌群,少數(shù)為致病菌※

至少有30個(gè)菌屬，120多個(gè)菌種精選課件腸道桿菌共同特點(diǎn)形態(tài)結(jié)構(gòu)

G—中小桿菌，無(wú)芽孢，多數(shù)有周鞭毛（除志賀菌屬、克雷伯菌屬、鼠疫耶爾森菌和EIEC），無(wú)芽胞，少數(shù)菌屬細(xì)菌可形成莢膜。

及菌毛精選課件培養(yǎng)特性

需氧或兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基可生長(zhǎng)，菌落相似，形成灰白色中等大小S型菌落。生化反應(yīng)發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、或產(chǎn)酸產(chǎn)氣；乳糖發(fā)酵試驗(yàn)：非致病菌+，致病菌-（除外變形桿菌）。觸酶陽(yáng)性；氧化酶陰性；硝酸鹽還原為亞硝酸鹽。精選課件EMB（伊紅——美蘭培養(yǎng)基），乳糖、伊紅、美蘭選擇作用（弱選）大腸埃希菌（非致病菌）乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸伊紅結(jié)合美蘭形成紫黑色金屬光澤化合物有色的乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門(mén)菌等（致病菌）乳糖不發(fā)酵伊紅美蘭不能結(jié)合無(wú)色的乳糖不發(fā)酵菌落精選課件EMB平板上的E.coli精選課件SS培養(yǎng)基（沙門(mén)志賀培養(yǎng)基）乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌綠等抑制劑選擇抑制作用（強(qiáng)選）大腸埃希菌產(chǎn)酸桃紅色乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門(mén)菌無(wú)色乳糖不發(fā)酵菌落膽鹽、煌綠：抑制大腸埃希菌及G+菌，提高腸道致病菌檢出率乳糖發(fā)酵中性紅呈紅色乳糖不發(fā)酵精選課件微生物檢驗(yàn)

1.分離培養(yǎng)

精選課件2.鑒定

（1）初步鑒定：

①確定腸桿菌科的細(xì)菌，應(yīng)采用葡萄糖氧化-發(fā)酵試驗(yàn)及氧化酶試驗(yàn)與弧菌科和非發(fā)酵菌加以鑒別；②腸桿菌科細(xì)菌的分群，多采用苯丙氨酸脫氨酶和葡萄糖酸鹽試驗(yàn)，將腸桿菌科的細(xì)菌分為三個(gè)類(lèi)群；③選擇生化反應(yīng)進(jìn)行屬種鑒別。KIA和MIU將細(xì)菌初步定屬。

（2）最后鑒定：

根據(jù)生化反應(yīng)的結(jié)果初步定屬、種，再根據(jù)血清凝集反應(yīng)才能作出最后判斷。

精選課件甲基紅試驗(yàn)原理：細(xì)菌分解糖，產(chǎn)生丙酮酸，進(jìn)一步生成大量混合酸，使培養(yǎng)基pH維持在4.4以下，加入甲基紅后，使甲基紅呈現(xiàn)紅色反應(yīng)。此為甲基紅試驗(yàn)陽(yáng)性。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水試劑：甲基紅試劑結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色：+

培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：是腸道桿菌常用的生化反應(yīng)試驗(yàn)，主要用于區(qū)別大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌精選課件葡萄糖丙酮酸大量混合酸pH降至4.4以下甲基紅試劑培養(yǎng)基變紅甲基紅試驗(yàn)精選課件甲基紅試驗(yàn)精選課件V-P試驗(yàn)原理：細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸脫羧生成乙酰甲基甲醇，在堿性環(huán)境中乙酰甲基甲醇被氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白胨中的精氨酸所含的胍基結(jié)合，生成紅色化合物。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色：+

培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：是腸道桿菌常用的生化反應(yīng)試驗(yàn)，主要用于區(qū)別大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌精選課件葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰V-P試劑培養(yǎng)基變紅V－P試驗(yàn)脫酸精選課件葡萄糖發(fā)酵形成丙酮酸后的不同代謝途徑葡萄糖丙酮酸大量混合酸pH降至4.4以下甲基紅試劑培養(yǎng)基變紅乙酰甲基甲醇二乙酰V-P試劑培養(yǎng)基變紅脫酸精選課件靛基質(zhì)試驗(yàn)原理：細(xì)菌產(chǎn)生色氨酸酶，可分解蛋白胨中的色氨酸，生成靛基質(zhì)（吲哚），靛基質(zhì)與試劑對(duì)二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基質(zhì)。培養(yǎng)基：蛋白胨水試劑：靛基質(zhì)試劑（含對(duì)二甲基氨基苯甲醛）結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基出現(xiàn)紅色液面：+

培養(yǎng)基液面為黃色：－應(yīng)用：用于腸道桿菌的鑒定精選課件靛基質(zhì)試驗(yàn)原理色氨酸酶色氨酸

靛基質(zhì)（吲哚）

玫瑰靛基質(zhì)（玫瑰吲哚）對(duì)二甲基氨基苯甲醛精選課件靛基質(zhì)試驗(yàn)精選課件尿素酶試驗(yàn)原理：產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌，能水解尿素生成氨和CO2，氨使培養(yǎng)基呈堿性變色。培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基試劑：酚紅指示劑結(jié)果：培養(yǎng)基變紅：+

培養(yǎng)基不變色：-應(yīng)用：腸桿菌科屬間鑒定精選課件尿素酶試驗(yàn)原理尿素尿素酶氨+CO2培養(yǎng)基pH升高酚紅呈堿性變色精選課件枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)原理：某些細(xì)菌能力利用培養(yǎng)基中的枸櫞酸鹽作為唯一的碳源，也能利用其中的銨鹽作為唯一碳源，細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中分解枸櫞酸鹽產(chǎn)生碳酸鹽和分解銨鹽生成的氨，使培養(yǎng)基變堿，是指示劑呈堿性反應(yīng)。培養(yǎng)基：枸鹽酸鹽培養(yǎng)基試劑：溴麝香草酚藍(lán)（pH6.0以下呈黃色，pH7.6以上呈藍(lán)色）結(jié)果：培養(yǎng)基變藍(lán)：+

培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：腸桿菌科屬間鑒別精選課件枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)原理枸櫞酸鹽銨鹽碳酸鹽氨培養(yǎng)基pH下降溴麝香草酚藍(lán)呈堿性變色培養(yǎng)基變藍(lán)培養(yǎng)基精選課件埃希菌屬

埃希菌屬（Escherichia）有6個(gè)種，只有大腸埃希菌（E.coli）是臨床最常見(jiàn)、最重要的一個(gè)菌種。①大腸埃希菌是腸道中重要的正常菌群；②在宿主免疫力下降或細(xì)菌侵入腸外組織器官后即可成為機(jī)會(huì)致病菌，引起腸道外感染；③一些血清型的大腸埃希菌具有致病性，能導(dǎo)致人類(lèi)胃腸炎；④在環(huán)境衛(wèi)生和食品衛(wèi)生學(xué)中常被用作糞便污染的衛(wèi)生學(xué)檢測(cè)指標(biāo)。22精選課件生物學(xué)性狀中等大小的G-桿菌、無(wú)芽胞、有周鞭毛、菌毛營(yíng)養(yǎng)要求不高。腸道鑒別培養(yǎng)基形成有色菌落，SS平板上呈紅色大菌落發(fā)酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖和甘露醇產(chǎn)酸產(chǎn)氣，分解蔗糖因菌株而異，尿素酶試驗(yàn)陰性。

吲哚、甲基紅、V-P、枸櫞酸鹽試驗(yàn)（IMViC試驗(yàn)）為++--。

克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）：斜面和底層均產(chǎn)酸產(chǎn)氣，H2S（-）。

動(dòng)力-吲哚-尿素（MIU）培養(yǎng)基為++-。

23精選課件志賀菌（Shigella)

人類(lèi)細(xì)菌性痢疾的病原菌，俗稱(chēng)痢疾桿菌一、生物學(xué)性狀形態(tài)與染色：G–、短小桿菌、無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，無(wú)莢膜，有菌毛。培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求低，SS平板上呈無(wú)色半透明菌落生化反應(yīng)：葡萄糖+，乳糖-H2S-，動(dòng)力-

可與沙門(mén)菌、大腸埃希菌區(qū)別。24精選課件培養(yǎng)——SS平板有色菌落無(wú)色菌落25精選課件抗原構(gòu)造及分類(lèi)：

O抗原（分類(lèi)依據(jù)）：包括群和型特異性抗原

A群:痢疾志賀氏菌B群:福氏志賀氏菌

C群:鮑氏志賀氏菌D群:宋內(nèi)氏志賀氏菌

K抗原無(wú)分類(lèi)意義抵抗力：比其它腸道桿菌弱，糞便標(biāo)本立即送檢；易形成抗藥性。26精選課件沙門(mén)菌屬

是腸桿菌科中最復(fù)雜的菌屬，有2000種以上血清型對(duì)人類(lèi)有致病性腸熱癥——傷寒沙門(mén)菌，甲型副傷寒沙門(mén)菌、肖氏沙門(mén)菌、希氏沙門(mén)菌食物中毒——鼠傷寒沙門(mén)菌、豬霍亂沙門(mén)菌、腸炎沙門(mén)菌敗血癥——豬霍亂沙門(mén)菌最常見(jiàn)精選課件生物學(xué)性狀形態(tài)染色符合腸桿菌特點(diǎn)，多為周毛菌，有菌毛傷寒桿菌的周身鞭毛精選課件培養(yǎng)特性EMB、SS上呈無(wú)色透明乳糖不發(fā)酵菌落麥康凱培養(yǎng)基上的傷寒桿菌菌落精選課件

EMB培養(yǎng)基，上為E.coli，下為傷寒桿菌精選課件生化反應(yīng)乳糖（-），葡萄糖（+），多數(shù)H2S+，動(dòng)力+，尿素（-）抗原結(jié)構(gòu)O抗原——特異性低、穩(wěn)定、分群（組）H抗原——特異性高，不穩(wěn)定，分型Vi抗原（毒力抗原）——不穩(wěn)定，可阻止“O”凝集精選課件流感嗜血桿菌精選課件名稱(chēng)由來(lái)→于1892年由費(fèi)佛博士在流行性感冒的瘟疫中發(fā)現(xiàn)?！`認(rèn)為它是1889年流感大流行的原因?！敝?933年，發(fā)現(xiàn)流行性感冒的病毒性病原后，才消除了這種誤解。精選課件與流感的關(guān)系是流感時(shí)繼發(fā)感染的常見(jiàn)細(xì)菌精選課件嗜血桿菌屬（Haemophilus）根據(jù)《Bergy’s鑒定細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》第九版（1994）記載，嗜血桿菌屬列為群5中的亞群3，其中和臨床有關(guān)的有9個(gè)種即：流感嗜血桿菌（H.influenzae）副流感嗜血桿菌（H.parainfluenzae）溶血嗜血桿菌（H.haemolyticus）副溶血嗜血桿菌（H.parahemolyticus）杜克嗜血桿菌（H.ducreyi）埃及嗜血桿菌（H.aegyptius）嗜沫嗜血桿菌（H.aphrophilus）副嗜沫嗜血桿菌（H.paraphrophilus）遲緩嗜血桿菌（H.segnis）代表菌：流感嗜血桿菌（H.influenzae）

精選課件1.

初次分離為G—短小桿菌；2.陳舊培養(yǎng)基或恢復(fù)其病灶中，具有多形性（球桿、長(zhǎng)桿或絲狀）;3.無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，不能運(yùn)動(dòng);4.毒力株（粘液型菌株）在營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上，6～8h有明顯莢膜，在陳舊培養(yǎng)物中莢膜消失。

流感嗜血桿菌（H.influenzae）精選課件精選課件需養(yǎng)菌。培養(yǎng)較難。培養(yǎng)基中需加入血液，以提供X因子和V因子（巧克力色培養(yǎng)基）

X因子——血紅素

V因子——輔酶Ⅰ或輔酶Ⅱ

5%～10%CO2培養(yǎng)特性精選課件巧克力色平板上培養(yǎng)：經(jīng)35℃，18～24h培養(yǎng)形成微小（0.5～0.8mm）無(wú)色透明，不溶血，呈露滴樣小菌落。48h后形成灰白色較大的菌落。

培養(yǎng)特性精選課件當(dāng)流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在同一血平板上培養(yǎng)時(shí)，由于金黃色葡萄球菌能合成較多的V因子，并彌散到培養(yǎng)基里，可促進(jìn)流感嗜血桿菌生長(zhǎng)，故在金黃色葡萄球菌菌落周?chē)漭^大，而離金黃葡萄球菌越遠(yuǎn)者則流感嗜血桿菌的菌落越小。衛(wèi)星現(xiàn)象（satellitephenomenon）：精選課件精選課件取流感嗜血桿菌分別接種于兔血肉湯和10%兔血清肉湯，35℃孵育18～24h，觀(guān)察生長(zhǎng)情況。因流感嗜血桿菌生長(zhǎng)需要X因子和V因子，故只能在兔血肉湯中生長(zhǎng)。也可在MH瓊脂平板上密劃細(xì)菌，再貼上含X因子和V因子的紙片，結(jié)果有三種可能：a.僅需X因子，如杜克嗜血桿菌和嗜沫嗜血桿菌；b.僅需V因子,如副流感嗜血桿菌和副嗜沫嗜血桿菌；c.同時(shí)需要X因子和V因子，如流感嗜血桿菌和溶血嗜血桿菌。X因子、V因子需要試驗(yàn)：精選課件生化反應(yīng)：

◆對(duì)糖發(fā)酵不穩(wěn)定。一般分解葡萄糖只產(chǎn)酸，不分解乳糖或甘露醇，對(duì)麥芽糖、蔗糖或糊精的發(fā)酵不穩(wěn)定。

◆還原硝酸鹽。有莢膜菌株產(chǎn)生吲哚。典型菌株不溶血。產(chǎn)生自溶酶，可被膽汁溶解。流感嗜血桿菌精選課件致病性◆致病物質(zhì)為內(nèi)毒素、莢膜、菌毛和酶類(lèi)?！敉ㄟ^(guò)呼吸道感染，引起原發(fā)性或繼發(fā)性感染?！粼l(fā)性感染多由b型莢膜強(qiáng)毒株引起，為急性化膿感染，如腦膜炎、鼻咽炎、咽喉會(huì)厭炎、化膿性關(guān)節(jié)炎、心包炎及敗血癥等?！衾^發(fā)