人參花生藥學及炮制配伍研究（可編輯）

學校代號10199學號20082703055Theresearchofpharmacognosy,processingandcompatibilityoftheginsengflower王淑敏教授論文提交日期2011年5月分類號密級UDC編號Theresearchofpharmacognosy,processingandcompatibilityoftheginsengflower敏教授(長春中醫(yī)藥大學)論文提交日期：2011年5月論文答辯日期：2011年6月論文作者簽名指導教師簽名留并向中國科學技術信息研究所送交論文的復印件和電子版，允許被查閱和借中文摘要1英文摘要2文獻綜述51.2揮發(fā)油類51.4蛋白類61.5黃酮類61.6生物堿類61.8綠原酸61.9其他類成分63.1人參花蘋果汁保健飲料的研制73.2人參花藍莓汁保健飲料的研制73.3人參花蕾在碳酸飲料中的應用73.4人參花菊花復合清涼飲料的研制73.5人參花可樂保健飲料的研制74人參花的抗氧化作用研究85人參花的炮制研究86人參花的藥理作用研究86.1安全性的研究86.2抗氧化作用的研究86.3抗腫瘤作用的研究86.4抗休克作用的研究96.5抗疲勞作用的研究93小結466.6抗衰老作用的研究97發(fā)展前景9第一章人參花的生藥學研究112.1人參花的顯微鑒定132.2人參花中總皂苷的薄層鑒定142.3人參花花蕾、花托、花柄中皂苷的研究152.5人參花中水分的含量測定232.6人參花中灰分的含量測定232.7人參花中多糖的含量測定242.8人參花中蛋白質的含量測定262.9人參花中黃酮的含量測定272.10人參花揮發(fā)油的含量測定282.11人參花提取物總抗氧化作用的研究292.12人參花提取物對DPPH自由基清除作用的研究312.13高效液相色譜法分析人參花提取物對DPPH清除作用的研究342.14人參花提取物對超氧陰離子02-自由基清除作用的研究392.15不同溶劑提取人參花皂苷的含量測定432.16人參花提取物對急性胃潰瘍的作用研究44第二章人參花的炮制研究482實驗部分482.1人參花的前處理--人參花的高溫高壓轉化482.2炮制后人參花總皂苷的薄層鑒定492.3炮制人參花總皂苷含量測定502.4RRLC分析炮制后人參花中皂苷成分的變化512.5炮制后人參花中人參皂苷的RRLC-Q-TOF分析572.6炮制后人參花中黃酮的含量測定602.7轉化前后人參花中多糖的含量測定612.8轉化后人參花中蛋白質的含量測定633小結64第三章人參花的配伍研究662實驗部分662.1配伍前人參與人參花中皂苷的含量測定662.2配伍后人參與人參花中皂苷的含量測定682.3人參、人參花與黃芪、麥冬配伍前后皂苷的含量測定結果683人參、人參花與黃芪、麥冬配伍后藥理作用研究703.1小鼠游泳實驗和耐缺氧實驗703.2小鼠耐高溫及耐寒實驗713.3實驗結果724小結與討論73目的：本文"人參花生藥學及炮制配伍研究"主要對人參花生藥學、炮制前后人參皂苷含量的變化以及其它化學成分含量的變化含量變化及其配伍后藥ABSTRACTPurposeThesubjectofStudyonpharmacognosyprocesscompositioncontentbeforeandaftertheprocessing,compatibility.MethodweuseUltravioletspectrophotometrytodetermineinbud,handleandreceptacleofginseng.TodeterminetheginsenosidebeforeandafterginsengflowercompatibilityofmedicineswithHighandtotalantioxidabilityaneffectofginsengflowereluateinacutegastriculcer.Result:ThecontentofbasiccomponentofginsengflowerhasabigchangebeforeandafterprocantioxidabilitybutantioxiprophylaxisandtreatmenttheacuOphiopogonisdosen'timprovetheimmunityofthelittlemouseinswimmingandbear-anoxiaexperiment,butitimprovedtheimmunityofthemouseinthermostabilityandcold-resistantexperimenttoacertaindegree.Conclusion:Thepurposeofthisexperimentisstudyonpharmacognosy,processing,compatibilityandestablishofasimple,easymethodofcompositionanalysisofginsengflower,laythefoundationfordeeperstudyoftheginsengflowers.Keyword:ginsengflower,processing,chemicals,antioxidant,pharmacologyRRLCRapidResolutionLiquidChromatography高分離度快速液相色譜TimeofFlightMass高分離度快速液相色譜-串聯(lián)四極桿飛行時間質譜UVUltraviolet紫外可見分光光RSDRlativeStandardDeviation相對標準偏差花中的總皂苷含量比人參中總皂苷含量高許多倍，并對"人參的藥用價值最高部人參皂苷是人參生理活性主要物質的基礎，也是總量的37.06%,其次是硬脂酸約為17.77%[7]。人參花揮發(fā)油的化學成分主要有白質提純的研究。經(jīng)測定發(fā)現(xiàn)，人參中含有18%蛋白質苷0.26%~0.43%[22]。1.7脂肪酸等，其中亞油酸在不飽和脂肪酸中含量最高，而飽和脂肪酸中棕櫚酸含量最高通過對人參花中綠原酸的含量測定，人參花中含有綠原酸量應不少于2人參花茶提高免疫力、美容養(yǎng)顏等保健作用，被世界上許多權威機構認定為"免疫保健的3.1人參花蘋果汁保健飲料的研制任保國等人[25]對人參花蘋果汁保健飲料的研制中，利用人參花豐富的陳長武等人[26]對人參花藍莓汁保健飲料的研制中，利用去苦技術對人孫鴻雁等人[27]對人參花蕾在碳酸飲料中的應用研究中，經(jīng)過對人參花林和興[28]對人參花菊花復合清涼飲料的研制中，采用人參花浸提液中3.5人參花可樂保健飲料的研制分發(fā)揮了人參花的保健作用，調節(jié)改善身體亞健康狀態(tài)和增進人體保持健康狀4人參花的抗氧化作用研究究，其結果表明人參花對羥基自由基具有一定的清除能力，有很好的開發(fā)價值5人參花的炮制研究熟后用金屬針橫向刺入，浸入濃糖汁曬干后形成的糖參以及人參置蒸籠內100℃蒸制2~3小時后曬干而形成紅參[31]。經(jīng)藥理作用研究發(fā)現(xiàn)，人參的不同炮制品6.1安全性的研究物90天喂養(yǎng)后血生化指標沒有發(fā)生異常，人參花蕾提取物通過降低丙二醛MDA6.3抗腫瘤作用的研究王本祥等人[36]對人參莖葉和人參花皂苷抗腫瘤作用的研究中，其結果邢德君等人[39]在研究人參花蕾皂苷對失血性休克犬心、肝、肺組織超氧化物歧化酶SOD及5種金屬元素含量影響的實驗中，采用犬復制失血性休克的6.5抗疲勞作用的研究林楠等人[40]在人參花提取物抗疲勞作用的6.6抗衰老作用的研究參皂苷Rg1促智信號轉導途徑研究，進一步從分子基礎方面解釋了Rg1促智作用使G-Rg1可能通過cAMP-PKA-CREB信號通路發(fā)揮其促智作用。經(jīng)過國內外學者的研究發(fā)現(xiàn)，人參最高部分的藥用價值是人參花蕾而不實驗研究花序中央的小花蕾疏掉1/3~1/2,同時將花莖上的散生花及不留種的花全部疏掉，瘍發(fā)生率的增高[50-52]。因此預防胃潰瘍的發(fā)生或者降低胃潰瘍的發(fā)生率具有很重要的意義。有文獻報道，紅參70%甲醇提取物對幽門結扎性和5-羥色胺性胃潰瘍發(fā)生均有抑制作用[126]。本實驗以人參花不同提取液對無水乙醇所致小鼠系2008年7月花期采摘后，經(jīng)長春中醫(yī)藥大學王淑敏教授鑒定為人參花。高效液相色譜儀(Agilent1200);METTLETOLEDO型電子天平(瑞勒-托立多公司);DZF-6050型真空干燥箱(上海精宏實驗設備有限公司);見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司);顯微鏡(上海天省儀器有限公司);DHG-9070A型電熱恒溫鼓風干燥箱(上海-恒科學儀器有限公司);旋轉薄膜蒸發(fā)儀(EYELA-OSB-2100);高速中藥粉碎機(浙江省永康市溪岸五金藥具廠);MilliQ超純水器(美國Millipore公司)±20g,健康昆明小鼠，雌雄各半，體重18±5g,由吉林大學基礎醫(yī)學院動物實驗2.1人參花的顯微鑒定2.1.1人參花粉末臨時裝片的制備[53~54]2.1.2人參花的顯微鏡觀察鑒別圖1-2花粉粒圖1-3木栓細胞圖圖1-4草酸鈣簇晶圖1-5導管圖1-6樹脂道2.2.1樣品溶液的制備[55~63]分別稱取人參花、生曬參、120℃蒸制人參、100℃蒸制人參各0.9g,粉丁醇萃取4次(每次30mL),回收正丁醇至干，用少量甲醇溶解，定容至5mL容量瓶2.2.3人參花薄層鑒別結果如圖1-7圖1-7人參花薄層鑒別圖1-生曬參2-人參花3-西洋參花4-人參蜂花粉5-紅參(120℃)6-紅參通過人參花薄層圖可以看出，人參花除了具有含有與生曬參相同的紫色2.3.1供試品溶液制備[64~67]人參花、人參花花蕾、人參花花托、人參花花柄樣品制備樣品于60℃干燥1h,碾碎，過60目篩，準確稱取四分樣品1.5g,分別按1:15固液人參樣品制備將人參粉碎，過60目篩，準確稱取人參粉末1.5g,分別按1:15固液比加對照品溶液制備醇制成每毫升溶液中分別含11.8mg、16.0mg、24.0mg、7.00mg、3.5mg、3.6mg2.3.2色譜條件乙腈B-水A;梯度洗脫(0min,20%B;0~15min,20%~35%B;15min~17min,35%B);流2.3.3RRLC色譜結果對照品色譜圖如圖1-8圖1-8對照品RRLC色譜圖供試品色譜圖如圖1-9圖1-9樣品RRLC色譜圖a人參根b人參花c人參花花蕾d人參花花托e人參花花柄1.Re2.Rf3.Rb14.Rc5.Rb26.Rdr0.99902.3.4方法學考察人參皂苷Rc、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rd的回歸方程如表1-1。表1-16種人參皂苷標準曲線人參皂苷Rb2人參皂苷RdY262.19X+22.39Y255.45X+16.775Y304.51X-47.276r0.9990r0.9999r0.9990r0.9999精密度實驗0.27%~2.46%、2.86%~4.取上述已測知含量的樣品各6份，每份0.5g,精密稱定，分別按相當于藥材中人參皂苷Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd100%的量加入混合對照品溶液，按"供試品溶液制備"方法進行處理并測定，求得回收率平均值為98.5%~100.08%、98.9%~99.6%、98.3%~99.2%、98.5%~100.03%、98.3%~99.8%、98.9%~99.8%。測得人參皂苷Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd的RSD為3.86%~4.98%、4.28%~4.86%、2.3