中藥以毒攻毒抗腫瘤作用的研究進(jìn)展

中藥以毒攻毒抗腫瘤作用的研究進(jìn)展

對(duì)于惡意疾病，中藥有“毒攻毒”的治療原則，即一些毒性較高的中醫(yī)藥對(duì)惡病具有顯著的治療作用。在保證用藥安全的前提下,可用適量有毒中藥來治療癌癥等病情較重的疾病。此類中藥可分為動(dòng)物藥、礦物藥及植物藥。近年來研究較多的動(dòng)物藥主要有全蝎、蛇毒、斑蝥、蟾蜍等;礦物藥主要有砒霜、雄黃等;植物藥主要有重樓、藤黃等。這些中藥普遍具有一定毒性,但可利用其毒性來治療惡性腫瘤?，F(xiàn)將近年來以毒攻毒中藥抗腫瘤作用的相關(guān)研究概況綜述如下。1動(dòng)物藥1.1調(diào)節(jié)和增強(qiáng)免疫功能放療全蝎是一種傳統(tǒng)的中藥,其藥性咸、辛、平,有毒,歸肝經(jīng);具有熄風(fēng)鎮(zhèn)痙、攻毒散結(jié)、通絡(luò)鎮(zhèn)痛的功效。蝎毒是一類具有多種生物活性的蛋白和多肽混合物。全蝎的抗腫瘤藥理作用主要依賴于蝎毒,其作用機(jī)制主要有3點(diǎn)。1.1.1細(xì)胞毒作用和抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)董偉華等研究了蝎毒多肽(APBMV)不同濃度處理4種腫瘤細(xì)胞——人早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株HL-60、人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721、人低分化鼻咽上皮癌細(xì)胞株CNE-2Z和人胃癌細(xì)胞株MGC-803,結(jié)果APBMV均顯示有顯著的細(xì)胞毒性和生長(zhǎng)抑制作用。盧娜等報(bào)道蝎毒組分Ⅲ(SVC-Ⅲ)能抑制人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株(AGZY-973)及人肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng),生長(zhǎng)抑制率分別為68.96%和64.36%。1.1.2誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡細(xì)胞凋亡的異常與腫瘤等許多疾病有密切的關(guān)系。越來越多的研究發(fā)現(xiàn),腫瘤不僅是增殖和分化異常的疾病,也是細(xì)胞凋亡異常的疾病。張?jiān)掠⒌劝l(fā)現(xiàn)在蝎毒多肽提取物(PESV)作用下,前列腺癌DU-145細(xì)胞出現(xiàn)顯著的細(xì)胞凋亡征象,凋亡指數(shù)(AI)明顯增高,增殖指數(shù)(PI)降低,AI/PI明顯增高(P<0.05)。PESV處理DU-145細(xì)胞可明顯提高凋亡相關(guān)基因bax表達(dá)水平,使bcl-2/bax比值明顯減小(P<0.05)。解霞等報(bào)道蝎毒(3.0μg·mL-1)聯(lián)合多柔比星(ADM)后增強(qiáng)了對(duì)人乳腺癌耐藥MCF-7細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用,凋亡率由(8.90±0.01)%上升為(12.60±0.21)%(P<0.01)。1.1.3調(diào)節(jié)及增強(qiáng)免疫功能放療和化療是治療惡性腫瘤的重要手段,但在治療腫瘤的同時(shí)也會(huì)損害患者免疫功能,引起嚴(yán)重的不良反應(yīng),因此提高機(jī)體免疫力也是防癌抗癌的重要途徑。董偉華等報(bào)道APBMV單獨(dú)給藥可明顯提高小鼠的NK細(xì)胞活性及小鼠白細(xì)胞數(shù),與氟尿嘧啶(5-Fu)組和對(duì)照組比較,均差異有顯著性(P<0.05)。APBMV單獨(dú)應(yīng)用時(shí)則使小鼠白細(xì)胞數(shù)顯著提高,超過對(duì)照組水平(P<0.05),與5-Fu組比較差異有顯著性(P<0.05)。楊志華等在研究APBMV對(duì)X線照射小鼠免疫功能的影響后發(fā)現(xiàn)加用APBMV的照射組(治療組),照射后外周血白細(xì)胞數(shù)下降不多,胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)維持正常水平,與照射對(duì)照組比較差異有極顯著性(P<0.01);與正常對(duì)照組比較,治療組和照射對(duì)照組經(jīng)射線照射后CD+44+、CD+88+亞群比例、CD+44+/CD+88+比值均有下降,但治療組效果更明顯,與照射對(duì)照組比較差異有極顯著性(P<0.01)。1.2《提要》中的蛇的部位自古以來,蛇和蛇毒都是被作為動(dòng)物毒中的重點(diǎn)來進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究,《本草綱目》中被列為中藥的蛇就有近十種,藥用部位包括蛇皮、蛇肉、蛇膽和蛇毒等。其中,蛇毒的治療作用有十幾種,抗腫瘤作用就是其中之一。其抗腫瘤作用表現(xiàn)在以下幾點(diǎn)。1.2.1體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)韋世秀研究廣西眼鏡蛇毒對(duì)人類小涎腺腺樣囊性癌(NACC)細(xì)胞在體外生長(zhǎng)的抑制作用,發(fā)現(xiàn)眼鏡蛇毒對(duì)NACC有明顯的抑制作用,與濃度和作用時(shí)間呈正相關(guān)。孫晉民等在研究蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)時(shí)發(fā)現(xiàn)NGF對(duì)4種人腫瘤細(xì)胞(人白血病細(xì)胞株K562、人胰癌細(xì)胞株JF305,人肺癌細(xì)胞株AGZY-83a和人胃癌細(xì)胞株MG-80)有細(xì)胞毒性和生長(zhǎng)抑制作用。吳國(guó)土等報(bào)道舟山眼鏡蛇毒細(xì)胞毒素-Ⅻ明顯抑制人肝癌Be1-7404細(xì)胞和人早幼粒白血病HL-60細(xì)胞的生長(zhǎng),其半數(shù)細(xì)胞抑制濃度(IC50)分別為(1.12±0.13)和(1.61±0.18)μg·mL-1。0.4,0.2和0.1mg·kg-1CTX-Ⅻ腹腔注射10d,對(duì)宮頸癌U14抑瘤率分別為30.50%(P<0.01),19.02%(P<0.05)和12.08%(P>0.05)。1.2.2細(xì)胞凋亡率劉成軍等研究中華眼鏡蛇毒對(duì)NACC細(xì)胞株的抑制作用,發(fā)現(xiàn)其作用于培養(yǎng)的NACC細(xì)胞48h后,腫瘤細(xì)胞凋亡率為52.4%,而對(duì)照組的細(xì)胞凋亡率僅為5.7%。顏汝平等還研究中華眼鏡蛇毒膜毒素(MT-12)對(duì)膀胱癌細(xì)胞的作用,發(fā)現(xiàn)對(duì)MT-12作用2,4,8,12,24和36h,細(xì)胞凋亡率分別為46.94%,51.2%,28.85%,20.43%,6.03%和5.19%,陰性對(duì)照組凋亡率為0.77%。1.2.3蛇毒及混合液對(duì)外周血t細(xì)胞比例的影響王潮臨等用灌胃法分別給大白鼠灌蝮蛇毒和眼鏡蛇毒,結(jié)果顯示這兩種蛇毒及它們的混合液均明顯提高外周血T淋巴細(xì)胞比例,明顯增強(qiáng)外周血中性粒細(xì)胞吞噬功能,提高脾臟抗體形成細(xì)胞的比例。除此之外,蛇毒還有抑制血管再生,影響血液高凝狀態(tài)等抑瘤活性。1.3對(duì)人乳腺癌細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)斑蝥(canthari)屬昆蟲綱,鞘翅目,芫菁科(Mylabris),為芫青科昆蟲南方大斑蝥或黃黑小斑蝥的干燥全蟲。據(jù)《神農(nóng)本草經(jīng)》記載,斑蝥可以治療癰疽、潰瘍等病癥。斑蝥中主要藥效成分是斑蝥素和去甲斑蝥素。其抗腫瘤的最顯著作用表現(xiàn)為誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。何太平等在研究斑蝥素時(shí)發(fā)現(xiàn)它對(duì)高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞HO-8910PM的IC50為47.99μmol·L-1,且使S期的細(xì)胞減少,有明顯的凋亡峰出現(xiàn),熒光雙染可見典型的凋亡形態(tài)學(xué)特征。黃學(xué)強(qiáng)等發(fā)現(xiàn)10~40mg·L-1劑量的去甲斑蝥素作用人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株6T-CEM細(xì)胞24h及10mg·L-1劑量的去甲斑蝥素作用6T-CEM細(xì)胞>18h后即出現(xiàn)典型的細(xì)胞凋亡特征。一定劑量范圍內(nèi)的去甲斑蝥素可在直接殺傷作用較小的情況下明顯誘導(dǎo)6T-CEM細(xì)胞凋亡,不會(huì)因細(xì)胞壞死而引起炎癥反應(yīng)。戎熠等用10mg·L-1去甲斑蝥素處理體外培養(yǎng)的人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7,12h后細(xì)胞出現(xiàn)變形、脫落,且隨著藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng),凋亡細(xì)胞百分比逐漸增加?？赡芘c細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)、線粒體膜電位以及鈣離子濃度有關(guān)。2礦藥2.1毒攻毒藥的應(yīng)用化學(xué)名三氧化二砷(As2O3)。味辛酸,性熱,有毒,入脾肺肝經(jīng),是我國(guó)傳統(tǒng)以毒攻毒藥物。近年來,不少學(xué)者將目光投向了As2O3對(duì)轉(zhuǎn)移性黑色素瘤、轉(zhuǎn)移性骨癌等。其抗癌作用主要有以下幾個(gè)方面。2.1.1干擾細(xì)胞正常代謝As2O3所含的砷離子能與體內(nèi)酶蛋白分子結(jié)構(gòu)中的巰基和羥基結(jié)合,使酶失去活性,從而干擾細(xì)胞的正常代謝,影響DNA的合成與修復(fù),導(dǎo)致細(xì)胞死亡,表現(xiàn)出一定的細(xì)胞毒作用。沈忠英等用較高濃度的As2O3處理結(jié)腸癌細(xì)胞,電鏡觀察除見凋亡細(xì)胞外,也可見壞死細(xì)胞。張勇等報(bào)道As2O3局部注射治療肝癌,治療后組織學(xué)檢查見癌細(xì)胞壞死的改變。2.1.2as2o3對(duì)k562-n、vcr的誘導(dǎo)凋亡作用許曉巍等研究As2O3對(duì)裸鼠高成瘤性慢性粒細(xì)胞白血病(CML)急變細(xì)胞系K562-n及其表達(dá)mdr-1的多藥耐藥細(xì)胞系K562-n/VCR的誘導(dǎo)凋亡作用。發(fā)現(xiàn)As2O3對(duì)表達(dá)mdr-1的CML急變期細(xì)胞系K562-n/VCR具有抑制生長(zhǎng)及較明顯的誘導(dǎo)凋亡作用。徐萬(wàn)海等研究As2O3對(duì)膀胱癌BIU-87細(xì)胞凋亡的影響,發(fā)現(xiàn)隨著As2O3濃度的增加,BIU-87細(xì)胞的增殖率明顯降低,10μmol·L-1時(shí),凋亡率最高。2.2雄黃作誘導(dǎo)光胞體細(xì)胞凋亡和骨髓瘤細(xì)胞凋亡其主要成分是二硫化二砷(As2S2),可解毒殺蟲,燥濕祛痰,截瘧,現(xiàn)代臨床常用它來治療癌癥。近來有關(guān)其誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡的文獻(xiàn)較多,可認(rèn)為誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡是其抗癌的主要作用。黃望香等應(yīng)用形態(tài)學(xué)觀察檢測(cè)細(xì)胞凋亡,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)白血病細(xì)胞bcl-2的表達(dá)時(shí)發(fā)現(xiàn)雄黃可誘導(dǎo)白血病細(xì)胞發(fā)生典型的凋亡,同時(shí)雄黃可使白血病細(xì)胞bcl-2蛋白表達(dá)呈時(shí)間依賴性下降。陳思宇等用雄黃處理急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞同時(shí)出現(xiàn)凋亡和分化相關(guān)的形態(tài)改變,超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)凋亡小體,同時(shí)部分細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)分化顆粒。雄黃不僅能誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡,還能誘導(dǎo)其他癌細(xì)胞凋亡。王孟昌等用雄黃處理在體外培養(yǎng)的骨髓瘤細(xì)胞,以電子顯微鏡觀測(cè)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞凋亡。發(fā)現(xiàn)在l.0μmol·L-1濃度下,雄黃作用于體外培養(yǎng)的多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞24h后,其凋亡率14.1%~17.3%,主要以早、中期表現(xiàn)為主;在2.0μmol·L-1濃度下,作用24h后其凋亡率25.3%~31.7%,以晚期表現(xiàn)為主。3植物藥3.1圖書館抗病藥活性重樓為百合科重樓屬植物的干燥根莖,俗名七葉一枝花。本品味苦,性微寒,有小毒,歸肝經(jīng)?，F(xiàn)代藥理研究表明,重樓具有抗菌、抗病毒、止血、抗腫瘤及心血管作用等。其抗腫瘤的作用主要為細(xì)胞毒性和抑制腫瘤生長(zhǎng)。李延采用肉瘤S180小鼠模型觀察8種中草藥抗腫瘤作用,其中重樓提取物1.5g·mL-1(按照生藥量計(jì)算)的抑制率為33.5%。金煒東等研究重樓提取物對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞的毒性作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)各濃度重樓提取物對(duì)HepG2細(xì)胞均有一定的殺傷作用。3.2藤黃酸類化合物為藤黃(Gameoge)系藤黃科(Guttiferae)植物藤黃(GarclniahanburyiHk.f.)所分泌出的干燥樹脂。氣微,味辛辣,具有攻毒蝕瘡、破血散結(jié)等功效?，F(xiàn)代藥理和臨床研究發(fā)現(xiàn)藤黃具有抗癌作用,并多次實(shí)驗(yàn)證明其主要有效成分為藤黃酸。其主要抗癌作用為:細(xì)胞毒性,抑制腫瘤生長(zhǎng)。雷秋模等實(shí)驗(yàn)表明,藤黃對(duì)小鼠腹水型肝癌ECA、ARS、S180、S37、MA787、U14、ARA4、W256有抑制作用,抑制率為35.6%~80.0%。對(duì)體外培養(yǎng)的人癌細(xì)胞BEL-7402與Hela細(xì)胞株也有程度不同的殺傷作用;對(duì)SMMC-7721肝癌細(xì)胞株也有明顯的殺傷作用,這種殺傷作用與環(huán)磷酰胺相似,大于5-Fu。董成等以5μg·mL-1藤黃酸24h即可有效殺死肝癌細(xì)胞,其抗癌作用與藥物濃度及作用時(shí)間呈正相關(guān)。其他有毒植物類藥如烏頭、馬錢子、巴豆等均有文獻(xiàn)報(bào)道有抑制腫瘤的作用,但對(duì)人體的毒性及副作用較大,而有關(guān)其抗癌機(jī)制方面的文獻(xiàn)報(bào)告較少。4其他植物類藥物的作用研究在以毒攻毒類藥中,動(dòng)物及礦物類藥抗腫瘤作用較為明顯,研究得也比較深入,且大都有較好的抗腫瘤效果。而在植物類藥中,以藤黃抗腫瘤作用較為顯著,尤其是藤黃酸