2019高考生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)

--#-（6）運用凝膠色譜法對血紅蛋白進(jìn)行分離純化1．凝膠色譜法：（1）依據(jù)：蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小（2）原理：分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動快；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程長，流動慢。⑶凝膠材料：多孔性，多糖類化合物，如葡聚糖、瓊脂糖。2．緩沖溶液（1）組成：由弱酸和相應(yīng)的強堿弱酸鹽組成（如H2CO3—NaHCO3，NaH2PO4/Na2HPO4等），調(diào)節(jié)酸和鹽的用量，可配制不同pH的緩沖液。（2）作用：抵制外界酸、堿對溶液pH的干擾而保持pH穩(wěn)定。3．電泳法：（1）原理：不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同,在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運動方向和運動速度不同。（2）分離方法：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。（3）聚丙烯酰胺凝膠電泳：在加入帶負(fù)電荷多的SDS,形成“蛋白質(zhì)一SDS復(fù)合物”，使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小。二、實驗步驟1．樣品處理紅細(xì)胞的洗滌洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白,采集的血樣要及時采用低速短時間離心分離紅細(xì)胞，然后用膠頭吸管吸出上層透明的黃色血漿,將下層暗紅色的紅細(xì)胞液體倒入燒杯,再加入五倍體積的生理鹽水,緩慢攪拌lOmin,低速短時間離心，如此重復(fù)洗滌三次，直至上清液中沒有黃色,表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。血紅蛋白的釋放在蒸餾水和甲苯作用下，紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。粗分離分離血紅蛋白溶液將攪拌好的混合溶液離心后，試管中的溶液分為4星。第一層為無色透明的甲苯層,第2層為白色薄層固體，是脂溶性物質(zhì)的沉淀層,第3層是紅色透明液體，這是血紅蛋白的水溶液,第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用濾紙過濾，除去之溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置片刻后，分出下層的紅色透明液體。透析透析可以去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)純化：凝膠色譜法分離4?純度鑒定SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（選做）三、注意事項如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確的話，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出.專題五植物有效成分的提取課題一植物芳香油的提取天然香料的來源：植物、動物，真菌芳香油的性質(zhì)：揮發(fā)性強;難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑;成分復(fù)雜，以萜類化合物及衍生物為主。芳香油的提取方法：蒸餾、壓榨、萃取等。⑴水蒸氣蒸餾法：原理：水蒸汽可將揮發(fā)性較強的芳香油攜帶出來形成油水混合物，冷卻后水油分層。方法：水中蒸餾：水上蒸餾：水汽蒸餾。不足：有些原料不適宜于水中蒸餾，如柑橘、檸檬等易焦糊，有效成分容易水解。⑵壓榨法（通過機(jī)械壓縮力將液相物從液固兩相混合物中分離出來的一種簡單操作）：如柑橘、檸檬等易焦糊的材料不足：分離困難，出油率低⑶萃取法：原理：芳香油易溶于有機(jī)溶劑，溶劑揮發(fā)后得到芳香油。如石油醚、酒精、乙醚等。不足：有機(jī)溶劑中的雜質(zhì)影響芳香油的品質(zhì)。玫瑰精油的提取實驗步驟：鮮玫瑰花和清水（比例為1：4）一水蒸氣蒸餾一油水混合物一分離油層一除水一玫瑰油注意事項：①蒸餾時間不能過短，溫度不能過高。②加入氯化鈉：分離油層，無水硫酸鈉：吸收油層中的水分橘皮精油的提取實驗步驟：①石灰水浸泡：防止壓榨時滑脫，提高出油率，降低壓榨液黏稠度漂洗：浸泡好的橘皮用流水徹底漂洗干凈，瀝干。壓榨：將橘皮粉碎，加入小蘇打和硫酸鈉（促進(jìn)油和水的分離）后,用壓榨機(jī)壓榨過濾：用布袋過濾,濾液再高速離心處理，分離出上層橘皮油。靜置處理：（除去果蠟和水分）靜置5?7d，分離出上層澄清橘皮油。再次過濾：將下層橘皮油用濾紙過濾，濾液與上層橘皮油合并，得到橘皮精油。課題二胡蘿卜素的提取胡蘿卜素性質(zhì)：橘黃色結(jié)晶，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。依據(jù)碳碳雙鍵的數(shù)目劃分為a、B、Y三類。其中最主要的組成成分為B-胡蘿卜素。作用：①治療夜盲癥、幼兒生長發(fā)育不良、干皮癥等疾??；②常用于食品色素；③使癌變細(xì)胞恢復(fù)成正常細(xì)胞。3?提取B—胡蘿卜素的方法主要有三種：①從植物中提?、趶拇竺娣e養(yǎng)殖的巖藻中獲得③利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)4?實驗步驟①粉碎:使原料與有機(jī)溶劑充分接觸，增大溶解度。②干燥:脫水溫度太高，干燥時間太長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解。③萃?、苓^濾：除去萃取液中的不溶物⑤濃縮：蒸發(fā)出有機(jī)溶劑5?萃取劑的選擇：具有較高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶。如石油醚6?、影響萃取的因素主要因素：萃取劑的性質(zhì)和使用量一般來說，原料顆粒小，萃取溫度高，時間長，需要提取的物質(zhì)就能夠充分溶解，萃取效果就好。7、胡蘿卜素提取裝置的設(shè)計：萃取過程應(yīng)該避免明火加熱，采用水浴加熱,這是因為有機(jī)溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃