秘魯番茄高效再生體系的研究

秘魯番茄高效再生體系的研究供應(yīng)中占有特別重要的位置。

隨著育種技術(shù)的不斷進(jìn)展,番茄品種不斷豐富,番茄產(chǎn)量不斷提高,但隨著設(shè)施番茄種植面積的不斷增加,番茄病害的發(fā)生也逐步加重,特殊是番茄病毒病常常呈暴發(fā)趨勢(shì)[1-3],對(duì)番茄生產(chǎn)造成了嚴(yán)峻危害,并且病害發(fā)生時(shí)往往以復(fù)合侵染的形式危害。

現(xiàn)有番茄品種的抗性已不能滿意現(xiàn)實(shí)的生產(chǎn)需求。

同時(shí),番茄屬于嚴(yán)格的自花授粉作物[4],經(jīng)過(guò)人類(lèi)長(zhǎng)期的馴化和選育,其栽培種的遺傳背景已經(jīng)變得越來(lái)越狹窄,僅依靠現(xiàn)有栽培種已很難滿意育種要求。

與栽培番茄資源匱乏相反,番茄屬野生種番茄及番茄近緣野生種類(lèi)番茄中卻擁有豐富的優(yōu)良遺傳性狀[5],能抗多種病蟲(chóng)害,有較高的抗旱性、耐鹽性和可溶性固形物含量等。

秘魯番茄是栽培番茄的一種近緣野生種,對(duì)番茄的多種病害均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗性或免疫性[6],在改良番茄抗性方面具有重要的利用價(jià)值,但秘魯番茄與栽培番茄的有性不親和障礙問(wèn)題迄今尚未得到很好解決[7]。

通過(guò)原生質(zhì)體融合等遠(yuǎn)緣體細(xì)胞雜交技術(shù),可以將野生番茄屬植物或者近緣種的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)入到番茄栽培種中,制造出具有多抗、高品質(zhì)的優(yōu)良性狀種質(zhì)資源,而建立秘魯番茄高效再生體系是利用體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)。

本試驗(yàn)以秘魯番茄的葉片和莖段作為外植體,通過(guò)添加不同濃度和配比的激素,建立其高效再生體系,為充分利用秘魯番茄的優(yōu)異性狀奠定基礎(chǔ)。

。

田間取秘魯番茄的腋芽,進(jìn)行表面消毒處理后接種于基本培育基獲得無(wú)菌苗。

,先用洗潔精清洗腋芽,除去表面塵土,自來(lái)水沖洗20~30,用濾紙吸干水分。

移入超凈工作臺(tái)后,先用75%乙醇浸泡15,%2浸泡8,無(wú)菌水沖洗5~6次,無(wú)菌濾紙吸干水分,接種于基本培育基。

1的小塊,~,將這2種外植體分別接種到添加不同濃度、、和、、、的培育基上進(jìn)行誘導(dǎo)培育。

、、和、、、的培育基上誘導(dǎo)不定芽的產(chǎn)生。

~2的不定芽分切下來(lái),分別轉(zhuǎn)入附加不同濃度、、和、、的生根壯苗培育基中,以基本培育基為對(duì)比,20后觀看統(tǒng)計(jì)生根率。

、根系發(fā)達(dá)的健壯幼苗煉苗移栽,每天漸漸打開(kāi)瓶蓋,3后完全打開(kāi)瓶蓋,置于通風(fēng)光明的常溫房間里保持3,每天早、中、晚各噴水1次,洗凈附著在根系的培育基,移植在草炭土+珍寶巖體積比1∶1栽培基質(zhì)上,淋水、罩上透亮?????塑料薄膜保持濕度,7后打開(kāi)保濕罩,20后統(tǒng)計(jì)成活率。

,接種5左右,葉片傷口邊緣間續(xù)膨大,葉片消失卷曲,莖段兩端快速膨大,漸漸形成愈傷組織圖1-。

由表1可見(jiàn),不同的激素濃度和配比對(duì)秘魯番茄愈傷組織誘導(dǎo)具有較大影響,以葉片作為外植體,當(dāng)濃度肯定時(shí),隨著濃度的漸漸提高,愈傷組織誘導(dǎo)率基本呈現(xiàn)先提高后降低的趨勢(shì);當(dāng)濃度肯定時(shí),隨著濃度的增加,愈傷組織誘導(dǎo)率總體也呈先提高后降低的趨勢(shì),但以葉片和莖段作外植體的誘導(dǎo)愈傷率有肯定差異,以葉片為外植體時(shí),%,最佳誘導(dǎo)愈傷培育基為++,%,愈傷組織結(jié)構(gòu)緊密,顏色濃綠,而以莖段為外植體時(shí),%,最佳誘導(dǎo)愈傷培育基為++,%,可見(jiàn)秘魯番茄以葉片作為外植體更易誘導(dǎo)愈傷組織。

,8左右愈傷組織上開(kāi)頭消失綠色芽點(diǎn)圖1-、1-,接種4周后統(tǒng)計(jì)愈傷組織分化率。

試驗(yàn)結(jié)果表明,不同濃度配比的、對(duì)愈傷組織的分化率具有較大影響,采納葉片和莖段作為外植體的愈傷組織分化率也有肯定差異。

愈傷組織分化的最佳培育基為++,以葉片為外植體時(shí),%,%;以莖段為外植體時(shí),%,%表2。

,分別轉(zhuǎn)入附加和的生根壯苗培育基中。

秘魯番茄不定芽生根相對(duì)較簡(jiǎn)單,%,但添加或者對(duì)生根率具有明顯的影響,特殊是添加后,生根率明顯提高,根系數(shù)量多且粗大,最佳生根培育基為+,%,表3,根系粗大,葉色濃綠,植株健壯,相宜移栽馴化圖1-、1-。

、根系發(fā)達(dá)的秘魯番茄試管苗進(jìn)行煉苗馴化,煉苗后移栽到草炭土∶珍寶巖體積比=1∶1的花盆中,移栽前應(yīng)對(duì)基質(zhì)進(jìn)行消毒。

移栽后留意保濕遮陰,開(kāi)頭時(shí)可罩上1層塑料薄膜,1周后除去薄膜。

通過(guò)以上措施,秘魯番茄試管苗的移栽成活率可達(dá)90%以上圖1-。

3結(jié)論與爭(zhēng)論一般栽培番茄組織培育中的外植體一般采納子葉、下胚軸、葉片、葉柄等,尤其以子葉作為外植體的居多[8-9]。

本試驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有秘魯番茄種子材料,只能取植株上的葉片和莖段作為外植體。

試驗(yàn)結(jié)果表明,采納秘魯番茄的葉片和莖段作為外植體均能建立其高效再生體系,但以葉片作為外植體更適合愈傷誘導(dǎo)和不定芽的分化。

激素在植物組織培育再生體系中占有重要作用,一般采納細(xì)胞生長(zhǎng)素和分裂素結(jié)合的方式誘導(dǎo)植株再生[10-11]。

本試驗(yàn)表明,以和的激素組合對(duì)建立秘魯番茄再生體系具有較好的作用,以葉片作為外植體時(shí),最佳的愈傷組織誘導(dǎo)培育基為++,%,愈傷組織結(jié)構(gòu)緊密,顏色濃綠;愈傷組織分化的最佳培育基為++,%,%。

番茄不定芽一般生根較簡(jiǎn)單[12],在不添加激素的培育基上也能生根,但所生的根系瘦長(zhǎng),生根數(shù)量也較少,移栽不易成活。

本試驗(yàn)也發(fā)覺(jué),在基本培育基上,秘魯番茄的生根率低,根系數(shù)量少,。

番茄組織培育中,最常用的誘導(dǎo)生根激素為和。

于明禮等發(fā)覺(jué),在添加的培育基上,栽培番茄不定芽誘導(dǎo)生根的效果最好[10];裴華麗等發(fā)覺(jué),在添加的培育基上,3個(gè)栽培番茄品種均達(dá)到了最佳生根效果[9]。

本試驗(yàn)比較了不同濃度的和對(duì)秘魯番茄不定芽誘導(dǎo)生根的影響,發(fā)覺(jué)添加后的秘魯番茄的生根效果要好于添加后的生根效果。

本討論所建立的秘魯番茄再生體系為番茄體細(xì)胞雜交創(chuàng)新種質(zhì)資源供應(yīng)了肯定的理論依據(jù)和技術(shù)支持。

:[1]——番茄黃化曲葉病毒病[].中國(guó)蔬菜,202321:1-4.[2]宋晰,師迎春,張世晨,[].植物病理學(xué)報(bào),2023,432:113-119.[3]劉永光,魏家鵬,喬寧,[].中國(guó)蔬菜,20235:67-69.[4][].,1986190:39-47.[5],:[].,1997,2775329:1063-1066.[6],,,-4,2172,-,-[].,2023,1096:1215-1223.[7]吳定華,[].園藝學(xué)報(bào),1992,191:41-46.[8]-,,,[].-,2023,385:501-507.[9]裴華麗,李美芹,劉永光,[].北方園藝,