研究型組培室的設(shè)計規(guī)劃課件

一、實驗室設(shè)計在建設(shè)組培實驗室時,首先應選擇安靜、清潔、遠離污染，位于上風口的的場所；然后根據(jù)要求的實驗室的性質(zhì)、規(guī)模來設(shè)計，但實驗室設(shè)計的基本要求總是科學、高效、經(jīng)濟和實用；此外，組織培養(yǎng)實驗室必須能滿足三個需要：實驗準備、無菌操作、控制培養(yǎng)。同時，我們還要注意組織培養(yǎng)程序，避免某些環(huán)節(jié)倒排，引起日后工作混亂。。一、實驗室設(shè)計在建設(shè)組培實驗室時,首先應選擇安靜、清潔、遠離1準備室面積：20m2左右。用途：器皿洗滌、培養(yǎng)基配置、分裝、高壓滅菌，植物材料的預處理，重蒸餾水的制備以及進行生理、生化因素的分析，試管苗出瓶，清洗及整理工作。要求：明亮、通風。設(shè)備：工作臺，櫥柜，水池，儀器，藥品等?！景ㄏ礈焓?、滅菌室】準備室面積：20m2左右。2緩沖間面積：約3-5m2左右。用途：進入無菌室前需在緩沖室里換上經(jīng)過滅菌的工作服、拖鞋，戴上口罩。設(shè)備：1盞紫外燈，1個配電板，石英電力時控器等。緩沖間面積：約3-5m2左右。3無菌操作室面積：10-20m2。用途：材料的滅菌接種，無菌材料的繼代，叢生菌的增殖或切割，嫩枝扦插生根等，是關(guān)鍵的部分，關(guān)系到培養(yǎng)物的污染率、接種工作效率等重要指標。要求：干爽安靜、清潔明亮、墻壁光滑平整不易積染灰塵，地面平坦無縫便于清洗和滅菌。門窗要密閉，一般用移動門窗。設(shè)備：超凈工作臺、空調(diào)機，醫(yī)用小平車，操作臺、擱架等。無菌操作室面積：10-20m2。4培養(yǎng)室面積：視培養(yǎng)架多少及培養(yǎng)物數(shù)量而定。用途：將接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物材料進行培養(yǎng)的場所。設(shè)備：（1）培養(yǎng)架與燈光。培養(yǎng)架數(shù)目多少視生產(chǎn)規(guī)模而定，年產(chǎn)4萬--10萬苗需4--6個培養(yǎng)架；年產(chǎn)10萬--20萬苗約需8—10個培養(yǎng)架。每個培養(yǎng)架一般6層，總高度2m，每0.3m為一層,最下一層距離地面0.2m架寬以0.6m為好，架長以40W日光燈的長度來決定，即約1.26m。每層架子安裝2盞日光燈。（2）通風設(shè)備。在稍高處設(shè)置進風氣窗，在其對側(cè)近天花板處設(shè)置排風窗。（3）邊臺、空調(diào)機、加濕器（除濕器）、各類顯微鏡、溫濕度計。培養(yǎng)室面積：視培養(yǎng)架多少及培養(yǎng)物數(shù)量而定。5實驗室分布圖實驗室分布圖6二、設(shè)備添置目的：就是即好用，又夠用，還能節(jié)省成本，在器材、設(shè)施的選擇上，不要貪大求洋，應該在其是否實用上多下功夫。器材選購原則：應該根據(jù)植物組織培養(yǎng)不同階段的需要，選擇不同的器材、設(shè)施。只有從降低投入、提高工效、節(jié)約勞力等諸方面加以考慮，才能降低培養(yǎng)成本、提高效率。器材分類：通用器具、盛具、計量器械、滅菌器械、接種器械、培養(yǎng)器械等幾種類型。在使用這些容器、設(shè)備時，必須要了解它們的基本用途，并學會它們的基本用法。例如，不能給容量瓶加熱；必須用磨砂玻璃燈罩來熄滅正在燃燒的酒精燈；應該定期更換超凈工作如的無菌濾膜等等。詳細操作可參考具體設(shè)備、容器的使用說明。二、設(shè)備添置7【1】通用器械

①燒杯：用來盛放、溶解化學藥劑等。常用的規(guī)格有50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml。②烘箱：用來烘干器械。③恒溫水浴鍋：用來溶解瓊脂等物質(zhì)。④玻璃攪拌棒：用來配制培養(yǎng)基。⑤洗耳球：用來輔助吸取、轉(zhuǎn)移少量液體。⑥冰箱：用來貯存化學藥劑、植物材料等。⑦牛角勺：用來轉(zhuǎn)移化學藥劑。⑧玻璃漏斗：用來過濾溶液。⑨剪刀：用來修剪外植體或剪切嫩莖。⑩器械架：在無菌操作期間用來放置滅菌的器【1】通用器械

①燒杯：用來盛放、溶解化學藥劑等。常用的8烘箱：2000元每臺烘箱：2000元每臺9恒溫水浴鍋單價在200至500元上下恒溫水浴鍋單價在200至500元上下10洗耳球、牛角勺洗耳球單價3到10元上下，牛角勺單價10到20元上下洗耳球、牛角勺洗耳球單價3到10元上下，牛角勺單價10到2011冰箱美的冰箱，1500元冰箱美的冰箱，1500元12器械架、燒杯、玻璃棒、剪刀、鑷子單價40元單價5到15元不等器械架、燒杯、玻璃棒、剪刀、鑷子單價40元單價5到15元不等13

①搪瓷淺盤：用來承載各種器械容器。②塑料盆：用于清洗培養(yǎng)容器。③鐵絲筐：用來盛放滅菌容器等物品。④純水水桶：用來存放去離子水或蒸餾水，常用的規(guī)格有10L、20L。⑤塑料桶：用來存放洗滌溶液、廢棄溶液。⑥各種規(guī)格的磨砂玻璃瓶：用來盛放培養(yǎng)母液，以及各種植物生長物質(zhì)。

各種盛具

①搪瓷淺盤：用來承載各種器械容器。14搪瓷盆、塑料盆、桶單價5-20元上下搪瓷盆、塑料盆、桶單價5-20元上15磨砂玻璃瓶、培養(yǎng)皿單價2-10元磨砂玻璃瓶、培養(yǎng)皿單價2-10元16純水水桶單價15元單價100元純水水桶單價15元單價100元17計量器械①量筒：用來量取一定體積的液體。常用的規(guī)格有25ml、50ml、100ml、500ml、1000ml。②容量瓶：用來配制標準溶液。常用的規(guī)格有50ml、100ml、500ml、1000ml。③大肚移液管：用來吸取定量溶液。常用的規(guī)格有1ml、5ml、10ml。④刻度移液管：用來吸取定量植物生長物質(zhì)溶液。常用的規(guī)格有1ml、5ml、10ml。⑤移液管架：用來放置、固定移液管。⑥酸度計：用來檢測培養(yǎng)基的pH。⑦藥物天平：用來稱取配制培養(yǎng)基的藥品。⑧分析天平：用來稱取少量有化學試劑，進行化學分析。計量器械①量筒：用來量取一定體積的液體。常用的規(guī)格有25ml18量筒、容量瓶價格2-15元量筒、容量瓶價格2-15元19大肚移液管、刻度移液管、移液管架價格5-15元大肚移液管、刻度移液管、移液管架價格5-15元20酸度計、藥物天平、分析天平價格：1500元價格：165元價格：1880元價格：320元價格：80元酸度計、藥物天平、分析天平價格：1500元價格：165元價格21滅菌器械①磨砂口玻璃瓶：用來對植物材料進行表面滅菌。②酒精燈：用來進行接種器材的表面滅菌。③細菌過濾器：用來過濾不能進行高溫滅菌的試劑溶液。④無菌濾紙：用來汲取器材、植物材料表面的水分。⑤無菌脫脂棉：用來進行器械、植物材料表面的滅菌處理。⑥真空泵：用來吸濾滅菌。⑦高壓滅菌鍋：對培養(yǎng)基、接種器材進行滅菌處理。⑧可調(diào)試電爐：用來加熱高壓滅菌鍋。⑨皮下注射器：用來對溶液進行過濾、除菌。⑩紫外線滅菌燈：用來對接種室、培養(yǎng)室、操作室等工作環(huán)境進行滅菌處理。滅菌器械①磨砂口玻璃瓶：用來對植物材料進行表面滅菌。22細菌過濾器價格5-10元細菌過濾器23無菌濾紙、無菌脫脂棉價格：5-15元價格：10-30元無菌濾紙、無菌脫脂棉價格：5-15元價格：10-30元24真空泵、高壓滅菌鍋價格：73元價格：27元價格：730元真空泵、高壓滅菌鍋價格：73元價格：27元價格：730元25紫外線滅菌燈、皮下注射器價格：90元價格：60元紫外線滅菌燈、皮下注射器價格：90元價格：60元26接種器械①超凈工作臺：用來過濾通過接種工作臺面的空氣，以便進行無菌操作。②小型噴霧器：裝載滅菌藥液，來給超凈工作臺等處噴霧滅菌。③鈍頭鑷子：在接種操作、繼代培養(yǎng)時移取植物材料。④尖頭鑷子：用來分離植物材料。⑤解剖刀：用來切割植物材料。⑥打孔器：用來切取大小一致的圓柱形植物材料。⑦雙目顯微鏡：在解剖較小的外植體時，用來觀測材料。⑧細菌濾膜：用來進行溶液的常溫除菌。⑨接種針：用來轉(zhuǎn)移細胞團、愈傷組織。接種器械①超凈工作臺：用來過濾通過接種工作臺面的空氣，以便進27超凈工作臺價格：4100元超凈工作臺價格：4100元28小型噴霧器、雙目顯微鏡單價：20元價格：1050元小型噴霧器、雙目顯微鏡單價：20元價格：1050元29鈍頭鑷子、尖頭鑷子、解剖刀價格：13塊價格：20-30元鈍頭鑷子、尖頭鑷子、解剖刀價格：13塊價格：20-30元30接種針價格：5、6元每只接種針價格：5、6元每只31培養(yǎng)器械①試管：用來作為外植體的培養(yǎng)容器。常用的規(guī)格有2cm×15cm、3cm×15cm。②培養(yǎng)皿：用來作為外植體的培養(yǎng)容器。常用的規(guī)格有直徑9cm、12cm。③錐形瓶：即三角燒瓶，主要作為培養(yǎng)器材，常用的規(guī)格有50ml、00ml。④顯微鏡：用來觀察植物材料。⑤成套載玻片：用來制作植物材料顯微制片。⑥鋁箔：用于培養(yǎng)容器封口。⑦橡皮筋：用來束緊培養(yǎng)容器的封口材料。⑧血球計數(shù)器：用來進行植物細胞計數(shù)。⑨空調(diào)：用來調(diào)節(jié)操作間、培養(yǎng)室的溫度。⑩搖床：用來進行細胞懸浮培養(yǎng)培養(yǎng)器械①試管：用來作為外植體的培養(yǎng)容器。常用的規(guī)格有2cm32試管、錐形瓶、成套載玻片價格：20元單價：0.5元價格：10元價格：25元試管、錐形瓶、成套載玻片價格：20元單價：0.5元價格：1033顯微鏡、血球計數(shù)器價格：180元每臺價格：130元顯微鏡、血球計數(shù)器價格：180元每34搖床價格：15000元價格：13000元搖床價格：15000元價格：13000元35鋁箔價格：2000元價格：10元鋁箔價格：2000元價格：10元36三、藥品添置在植物組織培養(yǎng)中，所使用的化學藥劑通常為化學試劑，根據(jù)它們的純度化學試劑可以分為優(yōu)級純（GR.）、分析純（AR.）、化學純（CP.）等規(guī)格。在研究型的組織培養(yǎng)中，我們一般可以采用分析純或優(yōu)極純的藥劑。以MS培養(yǎng)基為例，其使用的常用化學藥劑如下：三、藥品添置在植物組織培養(yǎng)中，所使用的化學藥劑通常為化學試劑37(1)硝酸銨：亦稱硝銨。化學式為NH4NO3，式量為80.048，其純品為無色透明菱形結(jié)晶，比重1.73，易溶于水，并吸收大量的熱，在空氣中容易潮解。水溶液呈中性反應。由于硝酸銨是一種易燃、易爆物，因此在使用中應該貯存在陰冷之處。已經(jīng)結(jié)塊的硝酸銨切忌敲打、撞擊，可用水進行溶解。(2)硝酸鉀：亦稱火硝?；瘜W式為KNO3，式量為101.104，其純品為無色透明的棱柱結(jié)晶，比重2.10，易溶于水，幾乎不溶于無水乙醇。(3)氯化鈣：亦稱無水氯化鈣?；瘜W式為CaCl2，式量為110.99，其純品為白色結(jié)晶，比重2.15，在空氣中具強吸濕性，易溶于水同時放出大量的熱。(4)硫酸鎂：亦稱瀉鹽?；瘜W式為MgSO4?7H2O，式量為246.50，其純品為透明菱形結(jié)晶，比重1.68，具苦味，易溶于水，不溶于乙醇，在空氣中稍風化。(5)磷酸二氫鉀：亦稱磷酸鉀復合肥。化學式為KH2PO4，式量為136.09，其純品為正方形無色結(jié)晶，比重2.33，有較強的酸味，易溶于水，不溶于乙醇。溶液呈微酸性反應。磷酸二氫鉀在96℃時會溶化成透明的液體，這樣就會轉(zhuǎn)化為偏磷酸鉀，因此在使用時注意不要使它經(jīng)受高溫環(huán)境。研究型組培室的設(shè)計規(guī)劃課件38(6)碘化鉀：化學式為KI，式量為166.02，其純品為透明的小塊結(jié)晶，比重3.115，在干燥的空氣中穩(wěn)定，易溶于水，其水溶液在遇光后因析出游離碘而逐漸變黃。(7)硼酸：亦稱正硼酸?；瘜W式為H3BO3，式量為61.84，其純品為六角形白色鱗片狀結(jié)晶，具珠光，比重1.46，溶于水，易溶于乙醇，當加熱至107℃時會失去部分的水，而轉(zhuǎn)變?yōu)槠鹚?。水溶液呈酸性反應?8)硫酸錳：化學式為MnSO4?5H2O，式量為241.07，其純品為紅色結(jié)晶，比重2.1，具金屬味，易溶于水，不溶于乙醇。在制備過程中，如果溶液在-4~6℃間結(jié)晶時，可制成七水硫酸錳（MnSO4?7H2O）；在20~40℃間時，可獲得四水硫酸錳（MnSO4?7H2O）；在280℃時加熱，帶有結(jié)晶水的硫酸錳直至恒重，則可獲得無水硫酸錳（MnSO4）。(9)硫酸鋅：亦稱鋅礬?；瘜W式為ZnSO4?7H2O，式量為287.55，其純品為無色菱形結(jié)晶，比重1.96，在干燥的空氣中會風化，易溶于水，當39℃時溶于所含結(jié)晶水，并轉(zhuǎn)變?yōu)閆nSO4?6H2O。(10)鉬酸鈉：化學式為Na2MoO4，式量為241.98，其純品為無色結(jié)晶，溶于水。(6)碘化鉀：化學式為KI，式量為166.02，其純品為透明39(11)硫酸銅：亦稱膽礬?；瘜W式為CuSO4?5H2O，式量為249.71，其純品為深藍色結(jié)晶，比重2.29，具強烈的金屬味，易溶于水，在干燥的空氣中容易風化，而變成白色粉末，即無水硫酸銅。水溶液呈弱酸性反應。(12)氯化鈷：亦稱氯化亞鈷?；瘜W式為CoCl2?6H2O，式量為372.26，其純品為紅色單斜結(jié)晶，比重1.84，在[室溫下穩(wěn)定，極易溶于水，可溶于乙醇。在45~52℃時加熱，會逐漸變?yōu)镃oCl2?4H2O。(13)乙二胺四乙酸二鈉：化學式為Na2EDTA?2H2O，式量為372.26，其純品為白色結(jié)晶狀粉末，無味、無毒、可溶于水，容易和金屬離子形成絡(luò)合物。(14)硫酸亞鐵：亦稱黑礬、鐵礬?；瘜W式為FeSO4?7H2O，式量為278.02，其純品為淡綠色結(jié)晶，比重1.89，易溶于水，不溶于乙醇，在干燥空氣中風化而變?yōu)榘咨勰?15)甘氨酸：亦稱氨基醋酸、氨基乙酸?；瘜W式為C2H5NO2，式量為75.07。純品為白色結(jié)晶性粉末。味甜，能溶于水，微溶于醇，幾乎不溶于醚。233℃開始分解。密封閉光保存。(11)硫酸銅：亦稱膽礬。化學式為CuSO4?5H2O，式量40(16)肌醇：亦稱環(huán)已六醇。化學式為C6H12O6，式量為180.16。為構(gòu)建細胞壁的材料。它在離子平衡、磷脂代謝、碳水化合物合成等過程中起著重要的作用。（17）煙酸：亦稱維生素B5?；瘜W式為C6H5NO2，式量為123.11。純品為無色針狀結(jié)晶。無氣味，在空氣中穩(wěn)定，能溶于水、乙醇、不溶于醚、酯類溶劑。熔點236℃。密封閉光保存。(18)鹽酸吡哆醇：亦稱維生素B6、鹽酸吡哆素?；瘜W式為C8H12ClNO3，式量為205.64。純品為白色結(jié)晶。無氣味，在空氣中穩(wěn)定，能溶于水、乙醇，不溶于酸。205~212℃分解。密封閉光保存。(19)鹽酸硫胺素：亦稱維生素B1?；瘜W式為C12H17ClN4OS?HCl，式量為337.28。純品為白色結(jié)晶。在空氣中穩(wěn)定，能溶于水、乙醇，不溶于酸。密封閉光保存。(20)6-芐基腺嘌呤：縮寫為BA，亦稱6-BA、普魯馬林。是一種植物生長調(diào)節(jié)劑，化學式為C12H11N5，式量為225.26。純品為白色結(jié)晶，熔點235℃，難溶于水，易溶于丙酮、乙醇等有機溶劑，在酸性介質(zhì)中較為穩(wěn)定。其主要的生理作用為能夠促進蛋白質(zhì)的合成，誘導芽分化，延緩葉衰老，促進細胞分裂。(16)肌醇：亦稱環(huán)已六醇?；瘜W式為C6H12O6，式量為141(21)萘乙酸：縮寫為NAA，亦稱α-萘乙酸、生長素、1-萘乙酸。是一種植物生長調(diào)節(jié)劑，化學式為C12H10O2，式量為186.20。純品為白色針狀結(jié)晶，熔點133~135℃，沸點285℃（分解）。在冷水中微溶，在熱水中易溶，易溶于冰醋酸、丙酮、乙醚等有機溶劑中。在空氣潮解，見光會變色。它有α和β兩種類型，通常所說的萘乙酸指的是α型。其主要生理作用為能夠誘導根分化，防止器官脫落，誘導無籽果實，促使種子萌發(fā)等。(22)腺嘌呤：縮寫為AD，化學式為C5H5N5?3H2O，式量為189.13。純品為白色結(jié)晶性粉末。在空氣中穩(wěn)定，微溶于水。它是合成細胞分裂素的前體，主要的生理功能為促進細胞分裂。(23)赤霉酸：縮寫為CA3，亦稱