廣東省江門2006-2007年廣州管圓線蟲病流行病學(xué)調(diào)查

廣東省江門2006-2007年廣州管圓線蟲病流行病學(xué)調(diào)查

廣州紅絲蟲位于廣東?。ㄊ?、區(qū)）天然感染區(qū)和廣州紅絲蟲流行區(qū)的廣東、福建、浙江、廣東、海南、云南、湖南、江西、貴州、江西和重慶等?。ㄊ?、區(qū)）。自1984年廣東省報道我國大陸首例廣州管圓線蟲病后,近十余年發(fā)病人數(shù)迅速增多,分布范圍廣,浙江、福建、北京及廣東等省(市)還發(fā)生廣州管圓線蟲病的暴發(fā)試驗對象和方法1健康入院時問卷的基本特征廣東省江門市位于珠江三角洲西部,面積為9541km問卷調(diào)查、血清免疫學(xué)調(diào)查及外周血嗜酸粒細(xì)胞檢查對象為健康體檢者,他們分別來自江門市區(qū)、新會區(qū)、臺山縣、鶴山縣及開平市。2廣州管圓線蟲期幼蟲感染度檢測在江門市禮樂鎮(zhèn)、棠下鎮(zhèn)、深呂村和五邑大學(xué)竹林、菜地、花圃、池塘和水渠等處,采集褐云瑪瑙螺695只及福壽螺720只。去殼取其軟組織,參照文獻(xiàn)[7]的消化法檢測廣州管圓線蟲Ⅲ期幼蟲感染率及感染度。在江門市新會區(qū)三江鎮(zhèn)和雙水鎮(zhèn),以及江門市棠下鎮(zhèn)和深呂村的房舍周圍、田間、雞舍、豬圈旁等多個點放置鼠夾或鼠籠等,捕獲褐家鼠、板齒鼠和黃胸鼠共229只。參照文獻(xiàn)[8]的水淹法將其處死,剖開胸腹腔,取心、肺組織,撕碎,檢測心、肺血管廣州管圓線蟲成蟲的感染率及感染度。3問卷、血清免疫分析與嗜酸性粒細(xì)胞檢測3.1鄂氏縣的性別、年齡分布在江門市中心醫(yī)院對健康體檢300人進(jìn)行廣州管圓線蟲的相關(guān)問卷調(diào)查,其中江門市區(qū)102人、江門新會區(qū)76人、臺山縣65人、鶴山縣51人、開平市6人。男性135人,女性165人。年齡1~88歲。其中≤20歲16人(占5.3%),21~50歲189人(占63.0%),51~70歲71人(占23.7%),≥70歲24人(占8.0%)。問卷調(diào)查內(nèi)容包括:與廣州管圓線蟲中間宿主的接觸史,食生或半生螺肉、蝸牛、蟹及青蛙等不良飲食習(xí)慣等。3.2血清免疫分析3.2.1采用/二氧化合物pelenderlus調(diào)查300份居民血清廣州管圓線蟲特異性IgG和IgM抗體陽性率。采集外周血10ml,計數(shù)嗜酸粒細(xì)胞。參照文獻(xiàn)[9]方法制備廣州管圓線蟲成蟲可溶性抗原(所用超聲破碎儀型號為UP200s,購自德國Dr.HielscherGmbH公司,核酸蛋白定量儀型號為BioPhotometerPlus,購自德國Eppendorf公司)。于4℃781×g離心10min,分離血清,ELISA檢測廣州管圓線蟲特異性IgG和IgM抗體。用包被緩沖液將上述廣州管圓線蟲成蟲抗原稀釋為20μg/ml,以100μl/孔包被酶標(biāo)板(96孔聚苯乙烯酶標(biāo)板購自廣州合達(dá)生物科技有限公司),4℃過夜,甩去孔內(nèi)抗原溶液,洗滌3次,1%脫脂奶粉37℃封閉2h。洗滌,分別加入1∶20稀釋的待測血清,混勻,37℃孵育30min,洗滌5次。加1∶4000稀釋的辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的羊抗人IgM抗體(購自武漢博士德生物工程有限公司)100μl/孔,37℃孵育30min,洗滌5次。加底物3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)顯色10min,用2mol/LHELISA檢測陽性標(biāo)準(zhǔn):樣品A3.2.2igm檢測方法的特異性試驗上述方法同時檢測健康人血清30份、并殖吸蟲病患者血清8份、弓形蟲病患者血清8份、華支睪吸蟲病患者血清7份和豬囊尾蚴病患者血清7份。3.2.3出現(xiàn)5倍包板量的抗原廣州管圓線蟲病患者陽性血清,經(jīng)1∶20稀釋后與5倍包板量的抗原混合,置37℃30min。ELISA檢測并比較其反應(yīng)前、后吸光度(A3.2.42-基乙醇處理試驗廣州管圓線蟲病患者陽性血清,經(jīng)1∶20稀釋后與等量的0.2mol/L2-巰基乙醇混合,于37℃作用1h,進(jìn)行ELISA檢測。3.2.5重復(fù)實驗分別取上述廣州管圓線蟲IgM抗體陽性和陰性血清各10份,檢測3次(每次檢測間隔3d)。3.3igg抗體陽性與igm抗體陽性小鼠嗜酸注射液對健康體檢者300人用全自動血細(xì)胞分析儀(型號為LH750,購自美國Beckmancoulter公司)檢測嗜酸粒細(xì)胞,統(tǒng)計IgG抗體陽性或IgG及IgM抗體均為陽性者嗜酸粒細(xì)胞數(shù)。4算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù),計算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。問卷調(diào)查結(jié)果用EpiData3.0統(tǒng)計軟件處理,將結(jié)果導(dǎo)入MicrosoftExcel系統(tǒng)進(jìn)行分析。結(jié)果1感染情況及感染度檢查褐云瑪瑙螺695只、福壽螺720只,廣州管圓線蟲Ⅲ期幼蟲感染率分別為45.0%和1.8%;平均感染度分別為(53.74±147.30)條/只和(5.23±8.51)條/只。螺感染幼蟲的分布范圍分別為1~1025條/只和1~29條/只。2只褐家鼠感染廣州管圓線蟲成蟲的感染情況檢查褐家鼠、板齒鼠和黃胸鼠共229只。10只褐家鼠感染廣州管圓線蟲成蟲,感染率為4.4%。平均感染度為(2.00±1.70)條/只,蟲數(shù)分布范圍1~6條/只。3.1問卷IgM特異性試驗結(jié)果均為陰性。特異性阻斷試驗其阻斷率為76.9%。2-巰基乙醇處理試驗ELISA檢測結(jié)果均轉(zhuǎn)陰,A3.3提議的柱狀位異常人群廣州管圓線蟲感染情況與以往的調(diào)查結(jié)果廣州管圓線蟲病屬于食源性寄生蟲病,人類的感染雖受當(dāng)?shù)刂虚g宿主螺類、終宿主鼠類感染水平的影響,但起決定作用的是人的飲食習(xí)慣和生活方式。問卷調(diào)查結(jié)果顯示,江門市有少數(shù)人曾食生或半生螺肉或蝸牛、蟹、青蛙等,有部分人從事福壽螺的加工和銷售工作,或以該螺肉作為動物飼料。超過半數(shù)的受訪者家中廚具生熟食物不分,面臨較高的被感染風(fēng)險。目前我國關(guān)于人群廣州管圓線蟲感染調(diào)查資料較少。賀聯(lián)印等IgM抗體陽性能反映近期感染,具有早期診斷價值此次調(diào)查,被調(diào)查人群的居住地點與螺和鼠的調(diào)查地點不完全一致,主要是采集人血標(biāo)本較困難?？紤]到江門市地理范圍有限,自然條件和人們飲食習(xí)慣相似,螺、鼠和人的感染情況不致于有較大的差異,故本調(diào)查結(jié)果基本能反映當(dāng)?shù)厮拗鞯母腥厩闆r,且相互間存在一定的關(guān)聯(lián)性?？傊?廣東省江門市具備廣州管圓線蟲病流行要素。當(dāng)?shù)刂虚g宿主褐云瑪瑙螺、福壽螺和終宿主鼠類分布廣、感染率高,并在居民生活環(huán)境周圍經(jīng)常出沒,該地區(qū)是廣州管圓線蟲的良好自然疫源地。居民一旦生食這些螺類,或在生活中與其接觸,則有可能造成感染,應(yīng)引起重視。共調(diào)查300人,其中11.3%有食生或半生魚、蝦史,83.7%否認(rèn),5.0%不能確定。此外,有5.3%被調(diào)查者在勞動中直接或間接接觸過褐云瑪瑙螺、福壽