抗生素類藥物分析-β內(nèi)酰胺類抗生素（藥物分析課件）

二、鑒別反應（一）顯色反應1·羥肟酸鐵反應第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素2.茚三酮反應

α-氨基酸-氨基酸茚三酮

藍紫色3.雙縮脲反應似肽鍵（開環(huán)分解）-內(nèi)酰胺類堿性酒石酸銅紫4.與重氮苯磺酸反應橙黃色重氮苯磺酸--56OHHC（偶合）酚羥基頭孢哌酮1.K+、Na+的火焰反應（二）各種鹽的反應

焰色→鮮黃色

+醋酸氧鈾鋅→↓黃

Na+

焰色→紫色

+0.1%四苯硼鈉

→↓白

K+2.沉淀反應（青霉素鹽）遇酸→↓在過量HCl或有機溶劑中溶解白青霉素青霉素鈉

青霉素鉀

H+3.重氮化-偶合反應

重氮化-偶合反應芳伯氨基（四）色譜法1、TLC法2、HPLC法光譜法（三）1、UV法樣品、分解產(chǎn)物頭孢氨芐λmax=262nm2、IR法專屬性強，各國藥典廣泛采用第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素β-內(nèi)酰胺類抗生素6-氨基青霉烷酸（6-APA）；青霉素類；7-氨基頭孢菌烷酸（7-ACA）；頭孢菌素類；一、結(jié)構(gòu)及分類氫化噻嗪環(huán)氫化噻唑環(huán)青霉素（青霉素鉀、鈉）普魯卡因青霉素阿莫西林

（羥氨芐青霉素）氨芐西林

（氨芐青霉素）頭孢氨芐頭孢羥氨芐㈡理化性質(zhì)1、酸性與溶解性2、旋光性3、紫外吸收特性4、不穩(wěn)定性酸性一、結(jié)構(gòu)特點與性質(zhì)Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽

（一）羧基

易溶于水

與有機堿(普魯卡因)成鹽

普魯卡因青霉素（二）手性C

頭孢菌素類

C6C7青霉素類

C3C5C6

旋光性﹡﹡﹡﹡﹡（三）共軛體系

頭孢菌素類

母核有共軛體系

青霉素類

母核無明顯UV

多數(shù)有苯環(huán)取代基

UV（四）β–內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性

水溶液

不穩(wěn)定

干燥純凈

穩(wěn)定

不穩(wěn)定性因素四元環(huán)張力大

酰胺鍵易水解

含水量

純度

青霉素類

某些氧化劑酸、堿、青霉素酶（某些金屬離子）（溫度）降解失效（四）β–內(nèi)酰胺環(huán)

青霉素的降解產(chǎn)物青霉噻唑酸－青霉素酶青霉酸－強酸性環(huán)境青霉烯酸－弱酸性環(huán)境青霉醛－強酸性-加熱青霉胺－強酸性-加熱/青霉素酶-重金屬降解產(chǎn)物三、雜質(zhì)檢查藥物檢查項目檢查方法頭孢他啶高分子聚合物

HPLC法頭孢曲松鈉頭孢哌酮鈉頭孢呋辛酯有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體HPLC法頭孢氨芐有關(guān)物質(zhì)反相TLC法青霉素鉀（鈉）吸收度紫外分光光度法第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素

1.頭孢他啶聚合物的測定分子排阻色譜法

固定相：葡聚糖凝膠G-10

流動相A：3.5%硫酸銨的0.01mol/L磷酸鹽緩沖液

流動相B：0.01%十二烷基硫酸鈉

對照品溶液：頭孢他啶對照品100μg/ml

1）系統(tǒng)適用性試驗：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml藍色葡聚糖2000、流動相A測定；重復性用對照品溶液、流動相B測定。

N不低于900，拖尾因子0.75~1.5，峰面積的RSD應小于5.0%

2）測定方法

進樣供試液，用流動相A；進樣對照液，用流動相B。以外標法計算，含頭孢他啶聚合物以頭孢他啶計不得超過0.3%。2.青霉素鈉（鉀）的吸收度檢查：供試液：1.80mg/ml，

結(jié)果判斷：A280不得大于0.10（一）微生物法（二）理化測定法（三）高效液相色譜法原理：利用青霉素類抗生素在一定條件下在反相硅膠上的保留行為的不同而實現(xiàn)高效分離，并與標準品相對照，而對其進行定量的一種方