《生物藥物分析與檢驗(yàn)》課程教學(xué)大綱

《生物藥物分析與檢驗(yàn)》課程教學(xué)大綱一、課程性質(zhì)本課程是生物工程專業(yè)本科學(xué)生的專業(yè)課，也是一門專業(yè)拓展課，在教學(xué)計(jì)劃中占有重要的地位，本課程主要學(xué)習(xí)藥物結(jié)構(gòu)與藥效的關(guān)系，藥物的理化性質(zhì)、鑒別方法、合成方法等，為后續(xù)課程如藥劑學(xué)、藥用分析化學(xué)等的學(xué)習(xí)打下基礎(chǔ)，是全面掌握藥學(xué)領(lǐng)域各學(xué)科知識(shí)的重要橋梁。本課程需先修無(wú)機(jī)化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)等課程。二、教學(xué)目的通過(guò)生物藥物分析與檢驗(yàn)課程的教學(xué)，使學(xué)生掌握生物藥物特有的一些分析思路和分析手段，能夠設(shè)計(jì)生物藥物的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格，培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考工作的能力。同時(shí)培養(yǎng)學(xué)生強(qiáng)烈的藥物質(zhì)量觀念以及生物藥物分析的基本知識(shí)和技能。學(xué)習(xí)本門課程后，要求學(xué)生不僅能夠熟練掌握普通生物藥物分析的方法、而且能夠獨(dú)立設(shè)計(jì)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、建立質(zhì)量分析方法及方法學(xué)評(píng)價(jià)。三、教材教參教材：《生物藥物分析》，何華，化學(xué)工業(yè)出版社（第一版），2001年。教參：《生物藥物分析》出版社，2000年；，曾經(jīng)澤，北京醫(yī)科大學(xué)中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合《生物藥物分析》，白秀峰，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，1999年。四、教學(xué)方式本課程以課堂講授為主、自學(xué)和討論為輔的方式組織教學(xué)，內(nèi)容采用多媒體輔助手段。五、教學(xué)內(nèi)容及時(shí)數(shù)根據(jù)生物工程專業(yè)人才培養(yǎng)方案，本課程時(shí)，其中講授18學(xué)時(shí)。具體如下：1.生物藥物分析學(xué)概述(1.5學(xué)共1學(xué)分，總的教學(xué)時(shí)數(shù)為18學(xué)時(shí)，其中講授1.5學(xué)時(shí))基本內(nèi)容：藥物分析的性質(zhì)、任務(wù)、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容、生物藥品的分類和科學(xué)管理、生物藥品分析檢驗(yàn)的基本程序和檢驗(yàn)內(nèi)容、藥物中的分析方法。代謝與藥物動(dòng)力學(xué)重難點(diǎn)：生物藥物分析的性質(zhì)、概念、應(yīng)用范圍、工作方法及有關(guān)內(nèi)容。點(diǎn)：藥物代謝與藥物動(dòng)力學(xué)中的分析方法。新知識(shí)點(diǎn)：藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容。2.生物藥物分析信息的獲?。ㄗ詫W(xué)）3.藥物分析方法的選擇、建立和認(rèn)證（1.5學(xué)時(shí)，其中講授1.5學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：分析質(zhì)量控制、標(biāo)準(zhǔn)、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等概念、質(zhì)量控制圖、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部的質(zhì)量控制、準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍等參數(shù)的概念、考察方法。重難點(diǎn)：質(zhì)量控制的概念和基本方法、分析方法驗(yàn)證的基本參數(shù)。點(diǎn)：質(zhì)量控制圖、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部的質(zhì)量控制。新知識(shí)點(diǎn)：準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍等參數(shù)的概念、考察方法。4．酶法分析（1.5學(xué)時(shí)，其中講授1.5學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：酶法分析的基本原理、酶循環(huán)放大法的基本理論和應(yīng)用類型、酶?jìng)鞲衅髦忻傅墓潭ɑ椒ê透髯缘奶攸c(diǎn)、了解酶試劑的動(dòng)力學(xué)原理、終點(diǎn)測(cè)定法、反應(yīng)速率法、酶法分析的檢測(cè)方法。重點(diǎn)：酶法分析的基本原理，酶法分析的具體種類及應(yīng)用范圍。難點(diǎn)：酶試劑的動(dòng)力學(xué)原理、終點(diǎn)測(cè)定法、反應(yīng)速率法。新知識(shí)點(diǎn)：酶法分析的基本原理、酶循環(huán)放大法的基本理論和應(yīng)用類型、酶?jìng)鞲衅髦忻傅墓潭ɑ椒ê透髯缘奶攸c(diǎn)。5．電泳法分析（1.5學(xué)時(shí)，其中講授1.5學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：影響遷移率的主要因素、紙電泳、瓊脂糖凝膠電泳、醋酸纖維素薄膜電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、等電聚焦電泳法的特點(diǎn)、高效毛細(xì)管電泳的基本原理。重點(diǎn)：電泳分析法的分離模式及其基本原理，影響電泳分析的基本因素。難點(diǎn)：高效毛細(xì)管電泳的基本原理。新知識(shí)點(diǎn)：電泳、瓊脂糖凝膠電泳、醋酸纖維素薄膜電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、等電聚焦電泳法的特點(diǎn)。

6.免疫分析法（3學(xué)時(shí)，其中講授3學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：了解免疫分析法的起源、特點(diǎn)和應(yīng)用范圍、抗原的定義及抗原的合成?？乖庖咴院涂乖詢煞矫?，半抗原必須與載體蛋白結(jié)合后才能得到全抗原，不同的半抗原合成全抗原的方法及合成中的注意事項(xiàng)，抗體的定義及制備。抗體的制備包括多克隆抗血清和單克隆抗體的制備，抗體的效價(jià)定義，放射免疫法、熒光免疫法、克隆酶給予體免疫分析法和酶聯(lián)免疫分析法的基本原理和應(yīng)用。重點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析法。重點(diǎn)：免疫分析法的起源、原理和抗原抗體的制備過(guò)程。幾種具體的免疫分析方法的基本原理及應(yīng)用。難點(diǎn)：放射免疫法、熒光免疫法、克隆酶給予體免疫分析法和酶聯(lián)免疫分析法的基本原理。新知識(shí)點(diǎn)：免疫分析法的起源、特點(diǎn)和應(yīng)用范圍。7.高效液相色譜法（3學(xué)時(shí)，其中講授3學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：大分子的高效液相色譜分離模式分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、體積排阻色譜和親和色譜，可用于多種生物分子的分離分析，吸附色組成。（該色譜模式基本不用于大分子的分離鍵合相色譜分為正相和反相色譜。正相色譜的固定相載體上鍵合的是極性基團(tuán)，反相色譜的固定相載體上鍵合的是非極性基團(tuán)。它們?cè)谙疵摃r(shí)流動(dòng)相極性譜的分離機(jī)理及固定相和流動(dòng)相的分析）的大小和其洗脫能力的關(guān)系正好相反。大分子的反相色譜常用的流動(dòng)相。離子交換色譜的分離機(jī)理主要是依靠組分和固定相之間的靜電作用結(jié)合。離子交換色譜固定相上結(jié)合的基團(tuán)以及流動(dòng)相的選擇。離子交換色譜的影響因素。體積排阻色譜的分離機(jī)理：空間排斥理論。體積排阻色譜的固定相和流動(dòng)相的選擇以及影響因素。親和色譜的分離機(jī)理、固定相的選擇及影響因素。重點(diǎn)：高效液相色譜的分離模式及其基本原理，了解它們的固定相和流動(dòng)相及色譜行為的影響因素。難點(diǎn)：離子交換色譜的分離機(jī)理。新知識(shí)點(diǎn)：吸附色譜的分離機(jī)理及固定相和流動(dòng)相的組成。8.生物質(zhì)譜法（1.5學(xué)時(shí)，其中講授1.5學(xué)時(shí)）

基本內(nèi)容：用于大分子的生物質(zhì)譜有兩種：MALDI和ESI，MALDI質(zhì)譜的原理、具體實(shí)驗(yàn)技術(shù)和質(zhì)譜圖特征。ESI質(zhì)譜的原理、具體實(shí)驗(yàn)技術(shù)和質(zhì)譜圖特征。MALDI和ESI用于多肽和蛋白質(zhì)分析時(shí)的方法，重點(diǎn)肽圖和氨基酸序列分析。MALDI和ESI用于糖蛋白和寡糖的分析。MALDI和ESI用于核苷酸的分析。重點(diǎn)對(duì)核苷酸分子量的測(cè)定。重點(diǎn)：大分子生物質(zhì)譜法的原理、特征及其應(yīng)用。難點(diǎn)：ESI質(zhì)譜的原理。新知識(shí)點(diǎn)：肽圖和氨基酸序列分析。9.生物檢定法（1.5學(xué)時(shí)，其中講授1.5學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：生物檢定法的概念、進(jìn)展和應(yīng)用范圍。生物檢定法的兩種具體方法——直接測(cè)定法和平行線測(cè)定法。重點(diǎn)：生物檢定法的概念和基本方法。難點(diǎn)：生物檢定法的概念和基本方法。新知識(shí)點(diǎn)：物檢定法進(jìn)展和應(yīng)用范圍。10.氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)類藥品檢驗(yàn)（3學(xué)時(shí)，其中講授3學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：氨基酸類藥品的定性鑒別和定量測(cè)定方法。氨基酸藥品中特殊雜質(zhì)及安全性檢查。氨基酸的定性鑒別包括化學(xué)鑒別法、薄層色譜鑒別法和紫外、紅外光譜鑒別法。含量測(cè)定法包括顯色法、滴定法和分光光度法，重點(diǎn)介紹HPLC法。蛋白質(zhì)、多肽類藥品的定性鑒別和效價(jià)測(cè)定。特殊雜志及安全性檢查。定性鑒別包括顯色法、色譜法和動(dòng)物試驗(yàn)。特殊雜質(zhì)的檢查方法包括電泳法和液相色譜法。重點(diǎn)：氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)類藥品的具體的檢驗(yàn)方法。難點(diǎn)：氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)類藥品的具體的檢驗(yàn)方法。新知識(shí)點(diǎn)：特殊雜志及安全性檢查。11.酶類藥品檢驗(yàn)（1.5學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：酶分離純化的技術(shù)和方法。常用方法包括沉淀法、色譜法、電泳離法和雙水相系統(tǒng)萃取法。初步學(xué)習(xí)酶制備方案的設(shè)計(jì)。酶的活力測(cè)定。酶活力的定義、單位和比活力的概念。酶活力的測(cè)定方法包括固定時(shí)法、離心法、膜分間法、連續(xù)監(jiān)測(cè)法和固定濃度法。影響酶活力的因素包括溫度、pH、底物濃度、

輔酶和無(wú)機(jī)補(bǔ)充物及酶的抑制物。初步酶活力測(cè)定法的設(shè)計(jì)。設(shè)計(jì)時(shí)首先考慮酶促反應(yīng)的條件，包括底物、pH值、溫度、輔助因子、酶樣品和空白對(duì)照。學(xué)習(xí)幾個(gè)藥用酶的具體活力測(cè)定方法。重難點(diǎn)：酶類藥品的制備和質(zhì)控過(guò)程。點(diǎn)：酶活力測(cè)定法的設(shè)計(jì)。新知識(shí)點(diǎn)：酶活力的計(jì)算方法。12.糖類、脂類和核酸類藥品檢驗(yàn)（1.5學(xué)時(shí)，其中講授1.5學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：多糖類藥物的結(jié)構(gòu)分析研究。多糖類新藥的結(jié)構(gòu)分析包括單糖組成、分子量、糖苷鍵連接方法和糖苷鍵連接位置等的分析。多糖類新藥理化特性的分析，主要包括性狀、溶解度、比旋度、純度檢查及含量測(cè)定等。糖類藥品分為單糖、低聚糖和多糖。學(xué)習(xí)集中常用的糖類藥品的測(cè)定方法，包括硫酸軟骨素、香菇多糖、靈孢多糖、絨促性、素肝素、肝素鈉和低分子肝素。了解幾種脂類藥檢驗(yàn)，包括去氧膽酸、谷固醇、大豆磷脂、輔酶Q10、亞油酸乙酯等。核酸品的和核苷酸類藥品的定性鑒別、特殊雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定。定性鑒別沖用的有顯色、沉淀反應(yīng)和光譜法等，特殊雜質(zhì)的檢查多用紙色譜法、紙電泳法或薄層色譜法。含量測(cè)定多用紫外分光光度法。重點(diǎn)：糖類、脂類和核酸類藥品的檢驗(yàn)方法。難點(diǎn)：糖類、脂類和核酸類藥品的檢驗(yàn)方法。新知識(shí)點(diǎn)：幾種脂類藥品的13.基因工程藥物質(zhì)量控制（1.5學(xué)時(shí)，其中講授1.5學(xué)時(shí)基本內(nèi)容：了解基因工程的基本過(guò)程和主要的基因工程藥物?；蚬こ趟幬锏馁|(zhì)量要求及質(zhì)量控制要點(diǎn)。質(zhì)量控制包括原材料的質(zhì)量控制、培養(yǎng)過(guò)程的質(zhì)量控制、純化工藝過(guò)程的質(zhì)量控制和最終產(chǎn)品的質(zhì)量控制?；蚬こ趟幬锏拈_發(fā)研檢驗(yàn)。）制過(guò)程?；蚬こ趟幬锏臋z驗(yàn)項(xiàng)目包括氨基酸的組成分析、部分氨基酸序列的分析、肽圖分析、二硫鍵分析等。基因工程藥物還要經(jīng)過(guò)臨床前安全性評(píng)價(jià)。重點(diǎn)：基因工程藥物質(zhì)量控制要點(diǎn)及目前上市的幾種基因工程藥物。難點(diǎn)：蛋白質(zhì)含量、純度、分子量、等電點(diǎn)的測(cè)定，氨基酸的組成。分蛋白質(zhì)含量、純度、分子量、等電點(diǎn)的測(cè)定，析、部分氨基酸序列的分析、肽圖分析、二硫鍵分析。

新知識(shí)點(diǎn)：基因工程藥物的開發(fā)研制過(guò)程。14.生物藥物產(chǎn)品的新藥開發(fā)和質(zhì)量控制（1.5學(xué)時(shí)，其中講授1.5學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：我國(guó)新藥開發(fā)的傳統(tǒng)思路和現(xiàn)狀。藥物分析在新藥研究中的地位。新藥研究開發(fā)的主要過(guò)程，包括原料藥的合成和臨床前研究。生物藥物研制和申報(bào)。申報(bào)內(nèi)容包括新藥的結(jié)構(gòu)或組分、工藝路線、體內(nèi)外的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)、安全性評(píng)價(jià)、原料及制劑的穩(wěn)定性和生物利用度。多肽及蛋白質(zhì)類、酶類、核苷酸及核酸類、不飽和脂肪酸類藥物的結(jié)構(gòu)和組分確證的一般方法。主要基因工程產(chǎn)品和單克隆抗體兩種生物技術(shù)產(chǎn)品的申報(bào)要求。重點(diǎn)：生物藥物產(chǎn)品的新藥開發(fā)的思路和過(guò)程。了解生物藥物研制及申報(bào)的內(nèi)容和要求、生物技術(shù)產(chǎn)品的申報(bào)要求。難點(diǎn)：多肽及蛋白質(zhì)類、酶類、核苷酸及核酸類、不飽和脂肪酸類藥物的結(jié)構(gòu)和組分確證的一般方法。新知識(shí)點(diǎn)：我國(guó)新藥開發(fā)的傳統(tǒng)思路和現(xiàn)狀。15.生化藥物分析進(jìn)展和動(dòng)態(tài)（3學(xué)時(shí)，其中講授3學(xué)時(shí)）基本內(nèi)容：生物藥物分析技術(shù)的國(guó)外發(fā)展趨勢(shì)和國(guó)內(nèi)發(fā)展現(xiàn)狀。生物