無菌制劑的生產(chǎn)與驗證第二季度課件

無菌制劑的生產(chǎn)與驗證第二季度培訓(xùn)無菌制劑的生產(chǎn)與驗證第二季度培訓(xùn)1（優(yōu)選）無菌制劑的生產(chǎn)與驗證第二季度培訓(xùn)（優(yōu)選）無菌制劑的生產(chǎn)與驗證第二季度培訓(xùn)2第三章

潔凈度級別及監(jiān)測潔凈度級別懸浮粒子最大允許數(shù)/立方米靜態(tài)動態(tài)≥0.5μm≥5μm≥0.5μm≥5μm

A級(1)352020352020B級3520293520002900C級3520002900352000029000D級352000029000不作規(guī)定不作規(guī)定(1)為了確定A級區(qū)的級別，每個采樣點的采樣量不得少于1m3。A級區(qū)空氣塵埃粒子的級別為ISO4.8，以≥0.5μm的塵粒為限度標準。B級區(qū)（靜態(tài)）的空氣塵埃粒子的級別為ISO5，同時包括表中兩種粒徑的塵粒。對于C級區(qū)（靜態(tài)和動態(tài)）而言，空氣塵埃粒子的級別分別為ISO7和ISO8。對于D級區(qū)（靜態(tài)）空氣塵埃粒子的級別為ISO8。測試方法可參照的標準為ISO14644-1空氣懸浮粒子的標準規(guī)定如下表：第三章

潔凈度級別及監(jiān)測潔凈度級別懸浮粒子最大允許數(shù)/立方3第三章

潔凈度級別及監(jiān)測關(guān)于ISO14644-1的介紹1.最大允許濃度的設(shè)定Cn=10N×(0.1/D)2.081.1Cn—某等級下，≥D的懸浮粒子最大允許濃度（pc/m3）。Cn以有效數(shù)為3位四舍五入到最靠近的整數(shù)。1.2D—被考慮粒徑um1.3N—潔凈度等級2.最少采樣點數(shù)目NL=2.1NL—最少采樣點數(shù)2.2A—潔凈室或潔凈區(qū)的面積，以立方米計。在水平單向?qū)恿鲿r，面積A可以看作是與氣流方向呈垂直流動空氣的截面積。3.每個點的最小采樣量VS=20×1000/(Cn.m)3.1VS—每個采樣點的每次最少采樣量，用升表示。3.2Cn.m—為相關(guān)等級規(guī)定的最大被考慮粒徑之等級限制（pc/m3）。即可用得出A級每個采樣點的最小采樣量為1立方米，B級靜態(tài)為690L，B級動態(tài)為6.9L關(guān)于最小采樣量有另一條規(guī)定：每個點的采樣量至少為2L，采樣時間為1分鐘。第三章

潔凈度級別及監(jiān)測關(guān)于ISO14644-1的介紹4第三章

潔凈度級別及監(jiān)測潔凈區(qū)微生物監(jiān)測的動態(tài)標準(a)如下：級別浮游菌cfu/m3沉降菌（f90mm）cfu/4小時(2)表面微生物接觸碟（f55mm）cfu/碟5指手套cfu/手套A級<1<1<1<1B級10555C級1005025－D級20010050－注：(1)表中各數(shù)值均為平均值。(2)單個沉降碟的暴露時間可以少于4小時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測并累積計數(shù)。第三章

潔凈度級別及監(jiān)測潔凈區(qū)微生物監(jiān)測的動態(tài)標準(a)如5第三章

潔凈度級別及監(jiān)測第十二條

應(yīng)制定適當?shù)膽腋×Ｗ雍臀⑸锉O(jiān)控警戒和糾偏限度。操作規(guī)程中應(yīng)詳細說明結(jié)果超標時需采取的糾偏措施。第三章

潔凈度級別及監(jiān)測第十二條

應(yīng)制定適當?shù)膽腋×Ｗ雍臀?無菌制劑的生產(chǎn)與驗證第二季度課件72010版ＧＭＰ附錄一：無菌產(chǎn)品第一章范圍第二章原則第三章潔凈級別及監(jiān)測第四章隔離操作技術(shù)第五章吹罐封技術(shù)第六章人員第七章廠房第八章設(shè)備第九章消毒第十章生產(chǎn)管理第十一章滅菌工藝第十二章滅菌方法第十三無菌藥品的最終處理第十四章質(zhì)量控制2010版ＧＭＰ附錄一：無菌產(chǎn)品第一章范圍第十章生產(chǎn)管8第六章人員人體是最大的污染源，人體產(chǎn)生的污染占總污染數(shù)的35%制藥企業(yè)人員的基本要求：機構(gòu)，組成，資源，職責，培訓(xùn)，考核，人員衛(wèi)生附錄1對人員的要求：第十九條

潔凈區(qū)內(nèi)的人數(shù)應(yīng)嚴加控制，檢查和監(jiān)督應(yīng)盡可能在無菌生產(chǎn)的潔凈區(qū)外進行。潔凈區(qū)與關(guān)鍵區(qū)潔凈區(qū)：需要對環(huán)境中塵埃及微生物數(shù)量進行控制的房間或區(qū)域。關(guān)鍵區(qū)：指在潔凈區(qū)中，對工藝過程和產(chǎn)品質(zhì)量起著關(guān)鍵作用的操作區(qū)域。第六章人員人體是最大的污染源，人體產(chǎn)生的污染占總污染數(shù)的39第六章人員第二十條

凡在潔凈區(qū)工作的人員（包括清潔工和設(shè)備維修工）都必須定期培訓(xùn)，以使無菌藥品的操作符合要求，培訓(xùn)的內(nèi)容應(yīng)包括衛(wèi)生和微生物方面的基礎(chǔ)知識。未受培訓(xùn)的外部人員（如外部施工人員或維修人員）在生產(chǎn)期間需進入潔凈區(qū)時，應(yīng)對他們進行特別詳細的指導(dǎo)和監(jiān)督。公司操作人員1.更衣過程的培訓(xùn)與更衣測試2.無菌灌裝驗證的參與外來人員（包括檢查人員）進入關(guān)鍵區(qū)域時1.應(yīng)盡可能安排更衣測試，測試合格后方可進入2.如果時間來不及，可以先進行更衣后的取樣，然后再根據(jù)結(jié)果進行評估。第六章人員第二十條

凡在潔凈區(qū)工作的人員（包括清潔10第六章人員第二十四條

工作服及其質(zhì)量應(yīng)與生產(chǎn)操作的要求及操作區(qū)的潔凈度級別相適應(yīng)，其式樣和穿著方式應(yīng)能滿足保護產(chǎn)品和人員的要求。各潔凈區(qū)的著裝要求規(guī)定如下：D級區(qū)：應(yīng)將頭發(fā)、胡須等相關(guān)部位遮蓋。應(yīng)穿合適的工作服和鞋子或鞋套。應(yīng)采取適當措施，以避免帶入潔凈區(qū)外的污染物。C級區(qū)：應(yīng)將頭發(fā)、胡須等相關(guān)部位遮蓋，應(yīng)戴口罩。應(yīng)穿手腕處可收緊的連體服或衣褲分開的工作服，并穿適當?shù)男踊蛐?。工作服?yīng)不脫落纖維或微粒。A/B級區(qū)：應(yīng)用頭罩將所有頭發(fā)以及胡須等相關(guān)部位全部遮蓋，頭罩應(yīng)塞進衣領(lǐng)內(nèi)，應(yīng)戴口罩以防散發(fā)飛沫，必要時戴防護目鏡。應(yīng)戴經(jīng)滅菌且無顆粒物（如滑石粉）散發(fā)的橡膠或塑料手套，穿經(jīng)滅菌或消毒的腳套，褲腿應(yīng)塞進腳套內(nèi)，袖口應(yīng)塞進手套內(nèi)。工作服應(yīng)為滅菌的連體工作服，不脫落纖維或微粒，并能滯留身體散發(fā)的微粒。第六章人員第二十四條

工作服及其質(zhì)量應(yīng)與生產(chǎn)操作的112010版ＧＭＰ附錄一：無菌產(chǎn)品第一章范圍第二章原則第三章潔凈級別及監(jiān)測第四章隔離操作技術(shù)第五章吹罐封技術(shù)第六章人員第七章廠房第八章設(shè)備第九章消毒第十章生產(chǎn)管理第十一章滅菌工藝第十二章滅菌方法第十三無菌藥品的最終處理第十四章質(zhì)量控制2010版ＧＭＰ附錄一：無菌產(chǎn)品第一章范圍第十章生產(chǎn)管12第八章設(shè)備-濕熱滅菌設(shè)備濕熱滅菌設(shè)備第六十五條

所有的待滅菌物品均須按規(guī)定的要求處理，以獲得良好的滅菌效果，滅菌工藝的設(shè)計應(yīng)確保滅菌完全。第六十六條

應(yīng)通過驗證確認滅菌設(shè)備腔室內(nèi)待滅菌產(chǎn)品和物品的裝載方式。第八章設(shè)備-濕熱滅菌設(shè)備濕熱滅菌設(shè)備13劑型：無菌原料藥或無菌制劑無菌藥品容器的密封性應(yīng)當經(jīng)過驗證，避免產(chǎn)品遭受污染。銅綠假單胞菌ATCC9027/CMCC10104第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證非正常的—非正常情況才會發(fā)生（設(shè)備故障，灌封線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸/替換破損的部件）非正常的干預(yù)至少每年模擬一次CIP設(shè)備，清潔、滅菌程序的執(zhí)行情況（3）操作和運行的代表Ｍ放置熱電偶和真空探頭，Ｎ環(huán)境監(jiān)測-放置和取走培養(yǎng)皿22μm的過濾器均可以稱為除菌過濾器培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標是零污染，應(yīng)遵循以下要求：測試方法可參照的標準為ISO14644-12010版ＧＭＰ附錄一：無菌產(chǎn)品第六十六條

應(yīng)通過驗證確認滅菌設(shè)備腔室內(nèi)待滅菌產(chǎn)品和物品的裝載方式。B級區(qū)（靜態(tài)）的空氣塵埃粒子的級別為ISO5，同時包括表中兩種粒徑的塵粒。最終的除菌過濾濾器應(yīng)盡可能接近灌裝點。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證Ｑ停電故障，Ｒ設(shè)備維修人員進入，Ｓ分裝中發(fā)現(xiàn)消毒劑過期后的更換機構(gòu)，組成，資源，職責，培訓(xùn)，考核，人員衛(wèi)生第八章設(shè)備-隧道烘箱環(huán)境微生物監(jiān)測數(shù)據(jù)（Ａ／Ｂ），空氣懸浮粒子監(jiān)第八章設(shè)備-濕熱滅菌設(shè)備濕熱滅菌設(shè)備第六十八條

應(yīng)有明確區(qū)分已滅菌產(chǎn)品和待滅菌產(chǎn)品的方法。每一車（盤或其它裝載設(shè)備）產(chǎn)品或物料均應(yīng)貼簽，清晰地注明品名、批號并標明是否已經(jīng)滅菌。必要時，可用濕熱滅菌指示帶加以區(qū)分。第六十九條

每一個滅菌批次都應(yīng)有滅菌記錄。應(yīng)把滅菌記錄作為該批產(chǎn)品放行的依據(jù)。劑型：無菌原料藥或無菌制劑第八章設(shè)備-濕熱滅菌設(shè)備濕熱滅菌14第八章設(shè)備-濕熱滅菌設(shè)備濕熱滅菌設(shè)備冷凝水和空氣如何影響滅菌效率空氣比水的熱阻還要高例子：1.1/100英寸厚的氣體層2.1/4英寸的水層3.12.9英寸的鐵墻第八章設(shè)備-濕熱滅菌設(shè)備濕熱滅菌設(shè)備15第八章設(shè)備-隧道烘箱隧道式滅菌干燥機風險控制措施熱分布：通過驗證得出壓差：隧道烘箱中壓差的梯度，從高到低依次是灌封間——高溫段——冷卻段——預(yù)熱段——洗瓶間，每個梯度之間需要保持正壓。第八章設(shè)備-隧道烘箱隧道式滅菌干燥機風險控制措施16第八章設(shè)備-隧道烘箱隧道式滅菌干燥機風險控制措施層流質(zhì)量關(guān)于隧道烘箱在使用中出現(xiàn)的常見問題分析：產(chǎn)品中出現(xiàn)黑點原因：國內(nèi)的隧道烘箱在使用過程中，經(jīng)常將溫度設(shè)定的偏高，比如320℃,340℃,360℃等，當溫度過高時，烘箱內(nèi)的高效過濾器本身還可以耐受，但是高效邊框處的膠水會產(chǎn)生脫落，落到內(nèi)包材中去預(yù)防：為了防止這種現(xiàn)象的產(chǎn)生，現(xiàn)在有的高效過濾器在邊框處進行負壓保護設(shè)計，當有脫落物產(chǎn)生時自動吸走。第八章設(shè)備-隧道烘箱隧道式滅菌干燥機風險控制措施17第八章設(shè)備-隧道烘箱隧道式滅菌干燥機風險控制措施無菌關(guān)于隧道式滅菌干燥機的除熱源效果確認，需要通過驗證來進行確認。在驗證過程中，應(yīng)該對初始段，中間段，結(jié)束段三個階段進入隧道烘箱的過程進行驗證。清潔第八章設(shè)備-隧道烘箱隧道式滅菌干燥機風險控制措施18第八章設(shè)備-灌裝機灌裝機三大關(guān)鍵要素破瓶率灌裝精度加塞合格率1.對于膠塞鍋，應(yīng)易于拆卸，清潔和滅菌2.膠塞鍋內(nèi)部的膠塞數(shù)量應(yīng)進行限制，放在相關(guān)碰撞過程中塵埃的產(chǎn)生。工藝控制六大要素1.風速(0.36-0.54m/S)2.層流流形3.塵埃粒子4.浮游菌，沉降菌5.風壓6.無菌操作第八章設(shè)備-灌裝機灌裝機三大關(guān)鍵要素工藝控制六大要素19第八章設(shè)備-軋蓋機軋蓋機對于西林瓶包裝的產(chǎn)品，均涉及到軋蓋工序。而對于非最終產(chǎn)品而言，該步驟通常是無菌藥品的最終處理工程。涉及到以下幾個方面的要求：第七十六條小瓶壓塞后應(yīng)當盡快完成軋蓋，軋蓋前離開無菌操作區(qū)或房間的，應(yīng)當采取適當措施防止產(chǎn)品受到污染。第八章設(shè)備-軋蓋機軋蓋機20第八章設(shè)備-軋蓋機第七十七條無菌藥品容器的密封性應(yīng)當經(jīng)過驗證，避免產(chǎn)品遭受污染。

-藥害事件：完達山藥業(yè)公司生產(chǎn)的刺五加注射液部分藥品在流通環(huán)節(jié)中被雨水浸泡，使藥品收到細菌污染，后被更換包裝標簽并銷售。藥品檢驗所在被雨水浸泡藥品的部分藥品中檢出多種細菌。熔封的產(chǎn)品（如玻璃安瓿或塑料安瓿）應(yīng)當作100%的檢漏試驗，其它包裝容器的密封性應(yīng)當根據(jù)操作規(guī)程進行抽樣檢查。第八章設(shè)備-軋蓋機第七十七條21第八章設(shè)備軋蓋機容器密封完整性驗證將產(chǎn)品容器內(nèi)灌入培養(yǎng)基，軋蓋密封后滅菌冷卻，然后將西林瓶倒置浸泡在菌液濃度為1*105-108cfu/ml的銅綠假單胞菌液中，4小時后，取出將容器外表面消毒，培養(yǎng)7天—14天，首次測試后，利用剩余樣品每隔12個月重復(fù)挑戰(zhàn)試驗1次，直至有效期滿。飽和鹽水法測試密封性亞甲基藍溶液法銅綠假單胞菌ATCC9027/CMCC10104第八章設(shè)備軋蓋機容器密封完整性驗證222010版ＧＭＰ附錄一：無菌產(chǎn)品第一章范圍第二章原則第三章潔凈級別及監(jiān)測第四章隔離操作技術(shù)第五章吹罐封技術(shù)第六章人員第七章廠房第八章設(shè)備第九章消毒第十章生產(chǎn)管理第十一章滅菌工藝第十二章滅菌方法第十三無菌藥品的最終處理第十四章質(zhì)量控制2010版ＧＭＰ附錄一：無菌產(chǎn)品第一章范圍第十章生產(chǎn)管23第十章生產(chǎn)管理第四十七條-1無菌生產(chǎn)工藝的驗證應(yīng)包括培養(yǎng)基模擬灌裝試驗人員確認無菌操作技能無菌更衣確認廠房系統(tǒng)設(shè)備確認,HVAC,壓空系統(tǒng)（或氮氣）的確認，水系統(tǒng)，設(shè)備的在線清洗和滅菌CIP,SIP,凍干機物料瓶,膠塞濕熱、干熱滅菌環(huán)境消毒與監(jiān)控確認無菌檢測方法。第十章生產(chǎn)管理第四十七條-124第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)基灌裝模擬驗證的適用范圍無菌藥品分為：無菌原料藥與無菌制劑無菌制劑分為：非最終滅菌與最終滅菌兩種類型其中無菌原料藥與非最終滅菌制劑均需要進行培養(yǎng)基灌裝模擬驗證第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)基灌裝模擬驗證的適用25第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證新版ＧＭＰ無菌附錄對培養(yǎng)基模擬灌裝的要求：１培養(yǎng)基選擇２最差條件的設(shè)計３頻次與變更４結(jié)果的評價５污染調(diào)查第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證新版ＧＭＰ無菌附錄對培養(yǎng)26第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第四十七條-2應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的劑型以及培養(yǎng)基的選擇性、澄清度、濃度和滅菌的適用性選擇培養(yǎng)基。應(yīng)盡可能模擬常規(guī)的無菌生產(chǎn)工藝。1.劑型：無菌原料藥或無菌制劑2.選擇性：應(yīng)選擇具有廣譜性和代表性的培養(yǎng)基，比如如果產(chǎn)品在灌裝過程中需要進行沖氮保護的話，就不能選擇TSB培養(yǎng)基（胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基），而應(yīng)該選擇厭氧性的培養(yǎng)基，比如FTM培養(yǎng)基（液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基）第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第四十七條-227第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第十二章：滅菌方法-除菌過濾工藝驗證將濾膜浸泡在料液中，浸泡時間不短于生產(chǎn)時間應(yīng)把滅菌記錄作為該批產(chǎn)品放行的依據(jù)。HVAC,壓空系統(tǒng)（或氮氣）的確認，水系統(tǒng)，新版ＧＭＰ無菌附錄對培養(yǎng)基模擬灌裝的要求：第十三無菌藥品的最終處理操作規(guī)程中應(yīng)詳細說明結(jié)果超標時需采取的糾偏措施。第十二章：滅菌方法-除菌過濾工藝驗證——水流速：浸泡前后測水的流速干預(yù)的次數(shù)應(yīng)該等于或大于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)所有干預(yù)都應(yīng)是預(yù)先設(shè)定和進行記錄但第一次實驗失敗后，重新作的使用必須要與第一次實驗的班次相同。包括所有對產(chǎn)品的無菌特性有影響的關(guān)鍵操作，及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。第十二章：滅菌方法-除菌過濾工藝驗證潔凈區(qū)：需要對環(huán)境中塵埃及微生物數(shù)量進行控制的房間或區(qū)域。（五）同一規(guī)格和型號的除菌過濾器使用時限應(yīng)當經(jīng)過驗證，一般不得超過一個工作日。一般5000-10000第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證熔封的產(chǎn)品（如玻璃安瓿或塑料安瓿）應(yīng)當作100%的檢漏試驗，其它包裝容器的密封性應(yīng)當根據(jù)操作規(guī)程進行抽樣檢查。第三章

潔凈度級別及監(jiān)測一般5000-10000第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)基的適用性檢查/陽性對照檢查在培養(yǎng)基灌裝驗證開始之前，需要做培養(yǎng)基的適用性檢查；陽性對照檢查時為了考察培養(yǎng)基模擬灌裝過程中是否有抑菌因素。注：應(yīng)對潔凈區(qū)檢測中出現(xiàn)的菌進行考察第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基28第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第四十七條-3包括所有對產(chǎn)品的無菌特性有影響的關(guān)鍵操作，及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。

最差條件：高于或低于正常范圍的條件限度，與正常生產(chǎn)條件相比最有可能造成工藝或生產(chǎn)失敗的條件第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第四十七條-329第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)基模擬灌裝實驗的代表性（1）時間代表性和批量的代表性（2）操作和運行的代表性（3）劑型與包裝容器代表性第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)基模擬灌裝實驗的代表30第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（1）時間與批量的代表性最長灌裝的持續(xù)時間1最保守的設(shè)計：在培養(yǎng)基灌封試驗中，模擬生產(chǎn)用時最長的批量所需要的時間，其中包括正常的干擾時間（換班、設(shè)備維修）。2其他的設(shè)計，有代表性的是過程。1）在生產(chǎn)完成后接著進行培養(yǎng)基灌封實驗2）為了減少灌封瓶數(shù)，在每批試驗開始、中間及結(jié)束前均灌裝培養(yǎng)基，其余時間設(shè)備空運行以達到所需要的時間，或在此時間灌裝WFI。任何干擾操作都應(yīng)在培養(yǎng)基灌裝時進行，在正常生產(chǎn)過程中所需的最長時間，包括可能發(fā)生的事件，人員的換班等第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（1）時間與批量的代表性31第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（1）時間與批量的代表性儲存時間的驗證灌裝設(shè)備、部件、儲罐、無菌物料、藥液在實際灌封前能夠放置的最長時間1.灌封設(shè)備、灌封部件、儲罐、無菌物料需要再滅菌（除菌）的時間間隔–用超出單項驗證后確定的最長保存時間的設(shè)備部件、儲罐、無菌物料參與培養(yǎng)基灌裝試驗2.產(chǎn)品從無菌過濾到灌封加塞完成所需要的時間–無菌過濾后存放在中間儲罐內(nèi)的培養(yǎng)基模擬實際生產(chǎn)時產(chǎn)品的最大儲存時間后再灌封－產(chǎn)品在灌裝后密封前的儲存時間第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（1）時間與批量的代表性32第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（1）時間與批量的代表性新版GMP指南一般5000-10000小于5000原則：培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當足以保證評價的有效性。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（1）時間與批量的代表性33第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（2）劑型與容器的代表性應(yīng)當考慮到灌裝容器的極端尺寸。最大的容器：容器開口大，污染幾率大。最小的容器：容器體積小，容易發(fā)生倒瓶。同一條灌裝線灌裝不同品種的產(chǎn)品的情況同一條灌裝線灌裝統(tǒng)一產(chǎn)品的不同規(guī)格的情況*對于灌裝計量的要求，應(yīng)位于容器體積的1/2到1/3處。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（2）劑型與容器的代表性34第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（3）操作和運行的代表應(yīng)模擬包括“最差狀況”的生產(chǎn)條件下進行培養(yǎng)基灌裝。（如最大干預(yù)次數(shù)、模擬的加卸料、可能的生產(chǎn)線停機的糾正灌裝針/管的調(diào)整和更換、人工軋蓋、在線過濾器的更換以及所用人員的數(shù)量等）干預(yù)的次數(shù)應(yīng)該等于或大于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)所有干預(yù)都應(yīng)是預(yù)先設(shè)定和進行記錄

需要注意的是，在培養(yǎng)基模擬灌裝驗證中，不需要模擬除菌過濾的實際過程，但應(yīng)該模擬操作人員在無菌區(qū)在進行除菌過濾過程中的實際操作（如安裝和拆卸除菌過濾器的過程）第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（3）操作和運行的代表35第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（3）操作和運行的代表正常的—每班次都會發(fā)生（灌封線裝配，裝量調(diào)節(jié)，加膠塞/鋁蓋，處理倒瓶，中控取樣，環(huán)境監(jiān)測，手工補充軋蓋等）非正常的—非正常情況才會發(fā)生（設(shè)備故障，灌封線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸/替換破損的部件）非正常的干預(yù)至少每年模擬一次不允許的行為：SOP中應(yīng)列出哪些干預(yù)是容許的。根據(jù)實際生產(chǎn)中可能發(fā)生的動作或操作來設(shè)計培養(yǎng)基灌裝的人為干預(yù)。企業(yè)應(yīng)列出可能會在無菌加工過程中發(fā)生的、允許和禁止的干預(yù)事件的一覽表，并在試驗中進行模擬第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（3）操作和運行的代表36涉及到以下幾個方面的要求：——產(chǎn)品起泡點：浸泡前后的起泡點是否變化可以通過考察過濾前后料液的含量來進行判斷。-對產(chǎn)品或生產(chǎn)線的每一種變更，均應(yīng)根據(jù)書面的變更控制系統(tǒng)進行評估。以上三種過濾器均有孔徑為0.第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第十二章：滅菌方法-除菌過濾工藝驗證選擇性：應(yīng)選擇具有廣譜性和代表性的培養(yǎng)基，比如如果產(chǎn)品在灌裝過程中需要進行沖氮保護的話，就不能選擇TSB培養(yǎng)基（胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基），而應(yīng)該選擇厭氧性的培養(yǎng)基，比如FTM培養(yǎng)基（液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基）高效過濾器檢測(空氣懸浮粒子水平，過濾器檢漏，空氣凈化系統(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)重復(fù)進行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。Ｅ更換灌裝針頭，Ｆ灌裝針頭位置調(diào)整第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當符合以下要求：關(guān)于ISO14644-1的介紹第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當符合以下要求：第三章

潔凈度級別及監(jiān)測灌封間——高溫段——冷卻段——預(yù)熱段——洗瓶間，每個梯度之間需要保持正壓。（五）同一規(guī)格和型號的除菌過濾器使用時限應(yīng)當經(jīng)過驗證，一般不得超過一個工作日。常用的方法有起泡點試驗、擴散流試驗或壓力保持試驗。Ｇ設(shè)備故障，Ｈ取出卡住的膠塞第十二章：滅菌方法-除菌過濾工藝驗證(1)表中各數(shù)值均為平均值。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證（3）操作和運行的代表Ａ設(shè)備組裝，Ｂ自動加塞故障Ｃ加入膠塞，Ｄ玻瓶破碎,撿出Ｅ更換灌裝針頭，Ｆ灌裝針頭位置調(diào)整Ｇ設(shè)備故障，Ｈ取出卡住的膠塞Ｉ取走倒下的玻瓶，ＪＧＭＰ檢查員進入無菌區(qū)后的處理Ｋ手工裝載到凍干機，Ｌ操作人員進入無菌區(qū)忘帶雙層手套后的退出Ｍ放置熱電偶和真空探頭，Ｎ環(huán)境監(jiān)測-放置和取走培養(yǎng)皿Ｏ操作人員進出及更衣，Ｐ自動稱量故障Ｑ停電故障，Ｒ設(shè)備維修人員進入，Ｓ分裝中發(fā)現(xiàn)消毒劑過期后的更換涉及到以下幾個方面的要求：第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗37第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第四十七條-4培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的首次驗證，每班次應(yīng)連續(xù)進行3次合格的試驗。空氣凈化系統(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)重復(fù)進行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗通常應(yīng)按生產(chǎn)工藝每班次半年進行1次，每次至少一批。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第四十七條-438第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證增補性培養(yǎng)基灌裝實驗變更及其評估-對產(chǎn)品或生產(chǎn)線的每一種變更，均應(yīng)根據(jù)書面的變更控制系統(tǒng)進行評估。-如果通過評估認為此項變更會影響到無菌生產(chǎn)工藝產(chǎn)品的無菌保證水平，則需要進行增補性培養(yǎng)基灌封實驗。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證增補性培養(yǎng)基灌裝實驗39第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證再驗證的要求頻率-對每條生產(chǎn)線，每年進行兩次再驗證，間隔時間為5-7個月。人員-人員至少每年參加一次再驗證，以進行資格再確認容器規(guī)格-每條生產(chǎn)線輪流使用最大和最小規(guī)格的容器。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證再驗證的要求40第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第四十七條-5培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)足以保證評價的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝的數(shù)量應(yīng)至少等于產(chǎn)品的批量。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第四十七條-541第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標是零污染，應(yīng)遵循以下要求：1.灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品；2.灌裝數(shù)量在5000至10000支時：（1）有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗（2）有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。3.灌裝數(shù)量超過10000支時：(1)有1支污染，需進行調(diào)查；(2)有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證4.發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)進行調(diào)查。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標42第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證類型重復(fù)實驗再驗證新建生產(chǎn)線驗證有效期到期變更說明5000-10000支有一支5000支以下檢出5000-10000支有兩支新建每半年一次大變更小變更批次重復(fù)一批3批3批1批大變更3批小變更1批第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證類型重復(fù)實驗再驗證新建生43第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證結(jié)果與評價1

外觀檢查，破損檢查2物料平衡3培養(yǎng)與觀察，連續(xù)監(jiān)控20-25℃7天30-35℃7天1.灌裝結(jié)束時，為保證培養(yǎng)基與內(nèi)包材充分接觸，應(yīng)該將灌裝后的培養(yǎng)基輕輕搖晃。2.在20-25℃7天培養(yǎng)結(jié)束后，也需要將培養(yǎng)基輕輕搖晃。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證結(jié)果與評價44第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證一：污染調(diào)查發(fā)生失敗（污染）時，應(yīng)盡可能找到最根本的原因。二：評估后果三：糾偏與預(yù)防四：重新試驗當糾偏措施實施后，應(yīng)當重新進行一次新的培養(yǎng)基灌裝實驗，以確認其有效性。但第一次實驗失敗后，重新作的使用必須要與第一次實驗的班次相同。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證一：污染調(diào)查45第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證調(diào)查的范圍應(yīng)包括人：人員操作技術(shù)培訓(xùn)情況人員衛(wèi)生狀況監(jiān)測數(shù)據(jù)第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證調(diào)查的范圍應(yīng)包括46Ｑ停電故障，Ｒ設(shè)備維修人員進入，Ｓ分裝中發(fā)現(xiàn)消毒劑過期后的更換2010版ＧＭＰ附錄一：無菌產(chǎn)品最終的除菌過濾濾器應(yīng)盡可能接近灌裝點。將濾膜浸泡在料液中，浸泡時間不短于生產(chǎn)時間灌裝結(jié)束時，為保證培養(yǎng)基與內(nèi)包材充分接觸，應(yīng)該將灌裝后的培養(yǎng)基輕輕搖晃。*對于灌裝計量的要求，應(yīng)位于容器體積的1/2到1/3處。當糾偏措施實施后，應(yīng)當重新進行一次新的培養(yǎng)基灌裝實驗，以確認其有效性。人員干擾操作、偏差、中斷等--發(fā)生時間和持續(xù)時間第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證Ｃ加入膠塞，Ｄ玻瓶破碎,撿出（2）劑型與容器的代表性培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標是零污染，應(yīng)遵循以下要求：通常情況下，不建議除菌過濾器反復(fù)使用，如果需要進行反復(fù)使用的，其使用時限應(yīng)當通過驗證。灌封設(shè)備、灌封部件、儲罐、無菌物料需要再滅菌（除菌）的時間間22μm的過濾器均可以稱為除菌過濾器第二十條

凡在潔凈區(qū)工作的人員（包括清潔工和設(shè)備維修工）都必須定期培訓(xùn)，以使無菌藥品的操作符合要求，培訓(xùn)的內(nèi)容應(yīng)包括衛(wèi)生和微生物方面的基礎(chǔ)知識。在驗證實施過程中，要保證相關(guān)參數(shù)至少等于或大于其要求的參數(shù)標準。第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當符合以下要求：非正常的—非正常情況才會發(fā)生（設(shè)備故障，灌封線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸/替換破損的部件）非正常的干預(yù)至少每年模擬一次B級區(qū)（靜態(tài)）的空氣塵埃粒子的級別為ISO5，同時包括表中兩種粒徑的塵粒。第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證調(diào)查的范圍應(yīng)包括機：CIP設(shè)備，清潔、滅菌程序的執(zhí)行情況設(shè)備和零件的滅菌工藝，滅菌釜的驗證情況Ｑ停電故障，Ｒ設(shè)備維修人員進入，Ｓ分裝中發(fā)現(xiàn)消毒劑過期后的47第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證調(diào)查的范圍應(yīng)包括料：除菌過濾器完好性已滅菌物品的儲存條件第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證調(diào)查的范圍應(yīng)包括48第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證調(diào)查的范圍應(yīng)包括法：培養(yǎng)基灌裝實驗中的干預(yù)方式分析該區(qū)域近期是否有過維修活動，生產(chǎn)線的改造情況培養(yǎng)基灌封過程中的異常事件第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證調(diào)查的范圍應(yīng)包括49第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)基灌裝過程記錄文件記錄：過程控制檢測和實驗室檢測結(jié)果環(huán)境和人員監(jiān)測結(jié)果設(shè)備功能（批報警記錄，過濾器完整性測試）人員干擾操作、偏差、中斷等--發(fā)生時間和持續(xù)時間生產(chǎn)線清場記錄過程錄像第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)基灌裝過程記錄50第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證調(diào)查的范圍應(yīng)包括環(huán)：環(huán)境微生物監(jiān)測數(shù)據(jù)（Ａ／Ｂ），空氣懸浮粒子監(jiān)測數(shù)據(jù)高效過濾器檢測(空氣懸浮粒子水平，過濾器檢漏，風速測量，密封系統(tǒng)檢查，使用年限等氣流方向和設(shè)備影響第十章生產(chǎn)管理-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證調(diào)查的范圍應(yīng)包括512010版ＧＭＰ附錄一：無菌產(chǎn)品第一章范圍第二章原則第三章潔凈級別及監(jiān)測第四章隔離操作技術(shù)第五章吹罐封技術(shù)第六章人員第七章廠房第八章設(shè)備第九章消毒第十章生產(chǎn)管理第十一章滅菌工藝第十二章滅菌方法第十三無菌藥品的最終處理第十四章質(zhì)量控制2010版ＧＭＰ附錄一：無菌產(chǎn)品第一章范圍第十章生產(chǎn)管52第十二章：滅菌方法第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當符合以下要求：（一）對可最終滅菌的產(chǎn)品不得以除菌過濾工藝替代最終滅菌工藝。如果藥品不能在其最終包裝容器中滅菌，可用孔徑為0.22μm（或更?。┑某^濾器將藥液濾入預(yù)先滅菌的容器內(nèi)。由于除菌過濾器不能將病毒或支原體全部濾除，可采用熱處理方法來彌補除菌過濾的不足。第十二章：滅菌方法第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當符53第十二章：滅菌方法并非所有的0.22μm的過濾器均可以稱為除菌過濾器澄清過濾器預(yù)過濾器除菌過濾器以上三種過濾器均有孔徑為0.22μm大小的。除菌過濾器的定義：能對缺陷假單胞菌的截留效果達到至少107CFU/c㎡的過濾器，才能稱為除菌過濾器第十二章：滅菌方法并非所有的0.22μm的過濾器均可以稱為除54第十二章：滅菌方法第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當符合以下要求：（二）應(yīng)當采取措施降低過濾除菌的風險。宜安裝第二只已滅菌的除菌過濾器再次過濾藥液。最終的除菌過濾濾器應(yīng)盡可能接近灌裝點。第十二章：滅菌方法第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當符55第十二章：滅菌方法冗余過濾的概念一：兩個過濾器均為除菌過濾器二：兩個過濾器之間是無菌的三：兩個過濾器的完整性檢測均為合格的第十二章：滅菌方法冗余過濾的概念56第十二章：滅菌方法第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當符合以下要求：（三）除菌過濾器使用后，必須采用適當?shù)姆椒⒓磳ζ渫暾赃M行檢查并記錄。常用的方法有起泡點試驗、擴散流試驗或壓力保持試驗。第十二章：滅菌方法第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當符57Ｋ手工裝載到凍干機，Ｌ操作人員進入無菌區(qū)忘帶雙層手套后的退出空氣凈化系統(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)重復(fù)進行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。最終的除菌過濾濾器應(yīng)盡可能接近灌裝點。D級區(qū)：應(yīng)將頭發(fā)、胡須等相關(guān)部位遮蓋。關(guān)鍵區(qū)：指在潔凈區(qū)中，對工藝過程和產(chǎn)品質(zhì)量起著關(guān)鍵作用的操作區(qū)域。過濾器廠家提供的濾芯完整性檢測標準，均為濾膜在水中潤濕后進行確定的。應(yīng)模擬包括“最差狀況”的生產(chǎn)條件下進行培養(yǎng)基灌裝。原因：國內(nèi)的隧道烘箱在使用過程中，經(jīng)常將溫度設(shè)定的偏高，比如320℃,340℃,360℃等，當溫度過高時，烘箱內(nèi)的高效過濾器本身還可以耐受，但是高效邊框處的膠水會產(chǎn)生脫落，落到內(nèi)包材中去應(yīng)盡可能安排更衣測試，測試合格后方可進入隧道式滅菌干燥機風險控制措施培養(yǎng)基灌裝實驗中的干預(yù)方式分析干預(yù)的次數(shù)應(yīng)該等于或大于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)所有干預(yù)都應(yīng)是預(yù)先設(shè)定和進行記錄潔凈區(qū)：需要對環(huán)境中塵埃及微生物數(shù)量進行控制的房間或區(qū)域。Ｑ停電故障，Ｒ設(shè)備維修人員進入，Ｓ分裝中發(fā)現(xiàn)消毒劑過期后的更換（四）除菌過濾工藝應(yīng)當經(jīng)過驗證，驗證中應(yīng)確定過濾一定量藥液所需時間及過濾器二側(cè)的壓力。第二十條

凡在潔凈區(qū)工作的人員（包括清潔工和設(shè)備維修工）都必須定期培訓(xùn)，以使無菌藥品的操作符合要求，培訓(xùn)的內(nèi)容應(yīng)包括衛(wèi)生和微生物方面的基礎(chǔ)知識。劑型：無菌原料藥或無菌制劑22μm的過濾器均可以稱為除菌過濾器膠塞鍋內(nèi)部的膠塞數(shù)量應(yīng)進行限制，放在相關(guān)碰撞過程中塵埃的產(chǎn)生。（五）同一規(guī)格和型號的除菌過濾器使用時限應(yīng)當經(jīng)過驗證，一般不得超過一個工作日。（1）時間與批量的代表性第十二章：滅菌方法第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當符合以下要求：（四）除菌過濾工藝應(yīng)當經(jīng)過驗證，驗證中應(yīng)確定過濾一定量藥液所需時間及過濾器二側(cè)的壓力。任何明顯偏離正常時間或壓力的情況應(yīng)有記錄并進行調(diào)查。調(diào)查結(jié)果應(yīng)歸入批記錄。Ｋ手工裝載到凍干機，Ｌ操作人員進入無菌區(qū)忘帶雙層手套后的退58第十二章：滅菌方法-除菌過濾工藝驗證一：細菌截留實驗

工藝風險分析：通過對工藝風險的分析，確定影響細菌截留實驗的相關(guān)因素，并針對相關(guān)的工藝參數(shù)設(shè)定相關(guān)的標準。在驗證實施過程中，要保證相關(guān)參數(shù)至少等于或大于其要求的參數(shù)標準。挑戰(zhàn)菌液的制備：在確定了細菌截留實驗的影響因素后，并確認了挑戰(zhàn)微生物（一般為缺陷假單胞菌）可以在產(chǎn)品藥液中存活的話。而細菌挑戰(zhàn)濃度要保證挑戰(zhàn)水平達到基于過濾器表面積至少107CFU/c㎡。濾出液分析：將過濾后的藥液在分析（回收）過濾器或濾膜上全部直接通過，或者先用無菌容器收集全部的過濾液，再用分析膜片過濾。然后對濾膜進行培養(yǎng)，用以確認濾出液中是否存在挑戰(zhàn)菌，來判定細菌截留實驗是否通過。第十二章：滅菌方法-除菌過濾工藝驗證一：細菌截留實驗59第十二章：滅菌方法-除菌過濾工藝驗證二：化學兼容性（溶出）濾膜與產(chǎn)品兼容嗎？將濾膜浸泡在料液中，浸泡時間不短于生產(chǎn)時間查看有無可見的變化檢測物理性能的變化：——水流速：浸泡前后測水的流速——濾膜重量：浸泡前后濾膜的重量——產(chǎn)品起泡點：浸泡前后的起泡點是否變化檢測化學性能的變化：料液中是否存在濾膜中的材質(zhì)，對料液的性質(zhì)產(chǎn)生影響。第十二章：滅菌方法-除菌