血糖影響因素及血糖測定

血糖影響因素及血糖測定第1頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)體內(nèi)哪些激素對血糖濃度有影響。學(xué)習(xí)和掌握葡萄糖氧化酶法測血糖的原理和操作方法。第2頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月【實(shí)驗(yàn)原理】人和動物血糖濃度受神經(jīng)、激素的調(diào)節(jié)，維持相對穩(wěn)定。胰島素和腎上腺素是調(diào)節(jié)血糖濃度的兩種重要激素，前者使血糖濃度降低，后者使血糖濃度升高。葡萄糖可由葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸，并產(chǎn)生過氧化氫，后者在過氧化物酶的作用下，能與苯酚及４－氨基安替比林作用產(chǎn)生紅色醌化合物。醌的產(chǎn)量與葡萄糖量成正比。與葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液比較，可計(jì)算得到血漿葡萄糖濃度。第3頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月【實(shí)驗(yàn)試劑與器材】速效胰島素、鹽酸腎上腺素、抗凝劑（草酸鈉或草酸鉀、肝素鈉、檸檬酸三鈉）禁食四小時以上兔子兩只葡萄糖試劑盒（Ｒ１、Ｒ２、標(biāo)準(zhǔn)液）酶標(biāo)板、板條、微量進(jìn)樣器、注射器、燒杯酶標(biāo)儀、生化培養(yǎng)箱第4頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月【實(shí)驗(yàn)步驟】注射激素前后血漿樣品制備（1）動物準(zhǔn)備:正常家兔兩只,實(shí)驗(yàn)前禁食4小時以上,稱體重.記錄并標(biāo)號。

⑵取血：在耳緣靜脈處進(jìn)行，用酒精棉擦拭兔耳，使血管擴(kuò)張，用棉花擦干，用針筒采血或于取血處涂薄層凡士林，然后用刀片割破耳緣靜脈，將血液收集于草酸鈉抗凝管（每ml約需2mg草酸鈉）內(nèi),邊接邊搖,以防凝固，取約5ml，用普通離心機(jī)2000rpm離心10分鐘，取上清分裝備用，編號為兔血清①、②；第5頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月⑶注射激素后再取血:將一家兔皮下注射胰島素(1單位/kg體重),另一只家兔皮下注射腎上腺素(0.4mg/kg體重).分別記錄在注射時間.注射腎上腺素20分鐘,胰島素30分鐘后,按上述方法或頸靜脈取血各取5ml于抗凝管內(nèi),用普通離心機(jī)2000rpm離心10分鐘，取上清分裝備用，編號為兔血清③、④第6頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月血漿樣品萄葡糖測定

⑴工作試劑配置：取一支試管，加入R14.5ml與R20.5ml混合。⑵取酶標(biāo)板一塊，板條一條，加入板框中，設(shè)定空白管A1，標(biāo)準(zhǔn)管A2.A3，測定管A4.A5，A6.A7，A8.A9，A10.A11（做兩管取平均值，可減少實(shí)驗(yàn)誤差）第7頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月混勻，37℃保溫15min，以空白管調(diào)零，505nm波長處測定各管吸光度值。計(jì)算血糖含量=A樣/A標(biāo)×標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度第8頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月加入物（ul）A1A2A3A4A5A6A7A8A9A10A11葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液33蒸餾水3兔血漿①33②33③33④33工作試劑300300300300300300300300300300300第9頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月混勻置于37℃孵育箱，反應(yīng)10min后，在酶標(biāo)儀上進(jìn)行比色測定，測定波長為492nm，用空白管A1調(diào)零，讀取標(biāo)準(zhǔn)管及測定管吸光度。第10頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月【結(jié)果與計(jì)算】血漿葡萄糖濃度=×標(biāo)準(zhǔn)管葡萄糖濃度(5.55mmol/L)第11頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月【討論】血糖的來源：1．碳水化合物的消化和單糖的吸收：機(jī)體進(jìn)食后，食物淀粉在唾液淀粉酶、胰酶、小腸黏膜分泌的二糖酶作用下水解成單糖。經(jīng)過載體主動轉(zhuǎn)運(yùn)入十二指腸和空腸壁內(nèi)，并擴(kuò)散入血。2．糖原的分解：在饑餓時，肝儲存的糖原在葡萄糖-6-磷酸酶作用下，分解成葡萄糖入血，是空腹血糖的直接來源也是維持血糖濃度恒定的重要機(jī)制。3．糖異生：空腹時，體內(nèi)的非糖物質(zhì)如氨基酸、乳酸和甘油可經(jīng)肝臟的糖異生作用生成葡萄糖，參與血糖的恒定。第12頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月二、血糖的去路：1．有氧氧化2．合成糖原3．轉(zhuǎn)換成甘油三酯、蛋白質(zhì)或氨基酸等非糖物質(zhì)。4．當(dāng)血糖濃度高于腎糖閾時，從尿排出。三、血糖的調(diào)節(jié)：1．降血糖的激素主要是胰島素，另有胰島素樣生長因子2．升血糖激素有胰高血糖素、腎上腺素、生長激素和皮質(zhì)醇。第13頁，課件共14頁，創(chuàng)作于2023年2月四、測定的臨床意義：1．生理性高血糖：攝入高糖食物后，或情緒緊張腎上腺分泌增加時2．病理性高血糖：（1）糖尿?。?）內(nèi)分泌腺功能障礙（3）顱內(nèi)壓增高（4）脫水引起高血糖3．生理性低血糖：見于饑餓和劇烈運(yùn)動4．病理性低血糖：（1）胰島B細(xì)胞增生和胰島B細(xì)