微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬培訓(xùn)課件

微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬傷寒沙門菌不產(chǎn)氣，其余沙門菌產(chǎn)酸產(chǎn)氣2微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬3微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)㈣抗原構(gòu)造及分組⒈O(jiān)抗原－多糖－類脂－蛋白質(zhì)復(fù)合物，其刺激機體產(chǎn)生的抗體為IgM。具有相同抗原分為一組，A-Z，O51－O63，O65－O67共42組⒉H抗原（不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)）有兩相：第一相－特異相，第二相－非特異相，其刺激機體產(chǎn)生的抗體為IgG。4微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)⒊表面抗原⑴VI抗原（不耐熱的酸性多糖聚合物）－有抗吞噬及保護細菌受相應(yīng)抗體和補體的溶菌作用。⑵M抗原－粘液抗原，可阻止0抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生凝集⑶5抗原－不穩(wěn)定5微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)㈤變異性⒈S-R變異－光滑（S）→粗糙（R）⒉H-O變異－有鞭毛的失去鞭毛。⒊位相變異－具有雙相的變?yōu)閱蜗?。⒋V-W變異－V型菌（O不凝集）、VW型菌（Vi部分缺失，O凝集）、W型菌（Vi缺失，O凝集）㈥抵抗力－對熱抵抗力不強。水2－3W，糞便1－2個月6微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)二、致病性與免疫性㈠致病物質(zhì)⒈侵襲力－菌毛黏附→M細胞→細胞肌動蛋白重排→吞噬泡（沙門菌存留緩慢繁殖）→信號調(diào)節(jié)、基因調(diào)控，合成多種因子拮抗宿主細胞的抗菌反應(yīng)。M細胞→未降解細菌→腸粘膜細胞固有層→巨噬細胞吞噬→胞內(nèi)寄生菌。Vi抗原抗吞噬作用⒉內(nèi)毒素⒊腸毒素。7微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)㈡所致疾病⒈腸熱癥－傷寒沙門菌和副傷寒沙門菌⒉腸炎型－鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌多見。⒊菌血癥或敗血癥－多見豬霍亂沙門菌感染⒋無癥狀攜帶者㈢致病機理8微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬9微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)三、微生物檢驗㈠標本采集－食物、血液及骨髓、糞便（肛拭）、尿液、膽汁10微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)㈢分離培養(yǎng)與鑒定⒈分離培養(yǎng)⑴血液和骨髓液－增菌液（胰酶消化大豆肉湯）⑵糞便和肛拭－腸道選擇培養(yǎng)基（GN、MAC、SS）⑶尿液和體液－離心取沉淀物接種GN、MAC、SS、血平板⑷食物等固體物質(zhì)－磨碎加10倍無菌生理鹽水接種GN、MAC、SS、⒉觀察培養(yǎng)情況－挑選可疑菌落鑒定11微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬12微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)3.鑒定⑴生化鑒定：初步：透明或半透明或黑色菌落，KIA：K/A，K/AG；H2S+/-，動力＋。全面生化⑵血清學(xué)分型－A-FO多價，Vi，分群分型血清⑶VI噬菌體分型－一般醫(yī)院不做。13微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬14微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬15微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)㈤抗體檢測(肥達反應(yīng)－Widaltest)⒈方法⒉結(jié)果解釋：⑴正常值：O＞1:80，H＞1:160，A、B、C＞1:80⑵O抗原－抗體IgM，H抗原－抗體IgG。①O高H不高－疾病早期；沙門菌屬其他菌種感染致交叉反應(yīng)；H-O變異的沙門菌引起的感染；一周后復(fù)查H升高－腸熱癥。②H高O不高－疾病晚期；繼往患病或預(yù)防接種；回憶反應(yīng)16微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬17微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬㈡、沙門菌屬檢驗程序糞、尿、殘余食物血液、骨髓增菌培養(yǎng)35℃18－24小時分離培養(yǎng)增菌培養(yǎng)SS、MAC、GN35℃18－24小時可疑菌落基因探針、PCR、Vi噬菌體法報告生化初步鑒定（KIA、MIU、IMVIC、氧化酶、觸酶、硝酸鹽還原血清學(xué)最終鑒定全套生化反應(yīng)（必要時）沙門菌屬多價血清單價定型血清報告18微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第四節(jié)志賀菌屬(Shigella)三、微生物特性㈠形態(tài)與染色㈡培養(yǎng)特性：腸道選擇培養(yǎng)基：MAC、SS－不發(fā)酵乳糖㈢生化反應(yīng)：D群較活躍。各群均分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，發(fā)酵甘露醇（A群除外）19微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬

20微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬21微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬22微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第四節(jié)志賀菌屬(Shigella)㈣抗原構(gòu)造：O抗原（群、型）－多糖復(fù)合物；K抗原－阻斷O抗原與相應(yīng)抗血清凝集。23微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第四節(jié)志賀菌屬(Shigella)㈤抵抗力：不強。㈥變異性⒈S-R變異⒉耐藥性變異－對磺胺、四環(huán)素、氨芐西林、百炎凈耐藥。24微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第四節(jié)志賀菌屬(Shigella)二、致病性與免疫性㈠致病物質(zhì)⒈侵襲力－菌毛的作用。⒉內(nèi)毒素－腸粘膜上皮細胞死亡，毛細管血栓，壞死脫落潰瘍，致膿血便；內(nèi)毒素血癥。25微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第四節(jié)志賀菌屬(Shigella)⒊外毒素：志賀菌侵襲宿主細胞→IL-1、IL-6、TNF-a、INF-r↑→IL-1、TNF-a、→↑ST受體在內(nèi)皮細胞表面的表達，使內(nèi)皮細胞成為ST攻擊的靶細胞，內(nèi)皮細胞損傷。A群ⅠⅡ型－志賀毒素ST(VT-對Vero細胞有毒性)ST屬VT1型，有下列3種活性。⑴細胞毒：VT對人肝細胞、Hela細胞、Vero細胞血管內(nèi)皮細胞、腎小管內(nèi)皮細胞有毒性。⑵腸毒素：引起水樣腹瀉⑶神經(jīng)毒：引起麻痹、昏迷、腦膜炎→死亡。4、ST和內(nèi)毒素的協(xié)同作用：HUG26微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第四節(jié)志賀菌屬(Shigella)㈡所致疾病⒈急性細菌性痢疾－又分為典型、非典型、中毒型⒉慢性細菌性痢疾－反復(fù)發(fā)作，病程超過2個月。隱匿型痢疾－有病史無癥狀，培養(yǎng)及結(jié)腸鏡檢陽性。⒊攜帶者－恢復(fù)期、慢性、健康（主要傳染源）。㈢致病機理㈣免疫性：局部粘膜表面產(chǎn)生SIgA27微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬28微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第四節(jié)志賀菌屬(Shigella)三、微生物檢驗㈠標本采集－采集膿血便或肛拭。㈡檢驗程序－見后29微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第四節(jié)志賀菌屬(Shigella)㈢檢驗方法及鑒定⒈分離培養(yǎng)：GN、SS、MAC⒉鑒定⑴初步鑒定TSIA(雙糖鐵)K/A、H2S-動力陰性。⑵最終鑒定：全面生化試驗及血清學(xué)鑒定：四種多價血清，①A群②B群③C群④D群30微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第四節(jié)志賀菌屬(Shigella)⒊非典型菌株：⑴傳代法：營養(yǎng)瓊脂和肉湯交替?zhèn)鞔?－10次→典型。4.毒力試驗－豚鼠眼結(jié)膜試驗5.快速診斷：直接凝集、免疫熒光菌球、協(xié)同凝集試驗。31微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬32微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬志賀菌屬檢驗程序糞便或肛拭增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)SS、MAC35℃4－6小時35℃18－24小時觀察、挑選可疑菌落接種KIA、MIU35℃18－24小時分析KIA、MIU反應(yīng)結(jié)果，涂片、氧化酶試驗最后鑒定全面生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定毒力試驗（必要時）報告33微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第五節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)一、分類：11個菌種:引起人類致病的有3種：鼠疫耶爾森菌(Y.pestis)、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Y.enterocolitica)、假結(jié)核耶爾森菌(Y.pseutuberculosis)。34微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第五節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)二、鼠疫耶爾森菌㈠臨床意義⒈致病因素⑴內(nèi)毒素⑵鼠毒素－抑制心肌細胞線粒體的呼吸作用，引起不可逆休克及死亡。⑶毒力決定因子:FI封套抗原、VW毒力抗原、Pgm色素形成能力、PI鼠疫耶爾森菌素、C凝固酶、F纖維蛋白因子、PU嘌呤依賴性、T鼠毒素。35微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第五節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)㈡微生物特性⒈形態(tài)結(jié)構(gòu)：G-b、G-cb，兩極濃染，陳舊物：多形性⒉抗原構(gòu)造至少18種抗原，重要的有⑴FI抗原－封套抗原⑵V/W抗原－菌體表面抗原，V－蛋白質(zhì)，W－類脂蛋白。具有抗吞噬作用。⑶T抗原－可溶性蛋白抗原（鼠毒素）劇毒，可制成類毒素、抗毒素。37微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第五節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)⒊培養(yǎng)特性：普通培養(yǎng)基：可生長，但緩慢。血平板：培養(yǎng)48小時后為柔軟、粘稠、粗糙菌落。肉湯培養(yǎng)基：24小時－沉淀生長，48小時－菌膜，輕搖－鐘乳石狀下垂。生化特性－動力陰性，IMVC為－＋－－，賴氨酸、鳥氨酸、苯丙氨酸脫胺酶、脲酶、硫化氫均陰性。38微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第五節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)㈢微生物檢驗⒈檢驗程序－見P125⒉標本采集－采集血、痰、淋巴結(jié)穿刺液、尸檢臟器等樣本。⒊標本直接檢查⒋分離培養(yǎng)與鑒定⑴分離培養(yǎng)－無污染：血平板，有污染：龍膽紫溶血亞硫酸鈉瓊脂。39微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第五節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)⑵鑒定：典型形態(tài)、菌落特點、生化特征見鑒別表、噬菌體裂解試驗。⑶毒力試驗－動物試驗（用皮下注射）3－7天死亡，取肝、脾培養(yǎng)。⒌檢驗結(jié)果分析與報告40微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬41微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第五節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)三、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Y.enterocolitica)㈠臨床意義⒈致病因素⑴侵襲性及毒素⑵某些菌株與人體組織有相同抗原－自身免疫性疾病⒉所致疾?、判∧c、結(jié)腸炎⑵敗血癥⑶結(jié)節(jié)性紅斑、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎。42微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第五節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)㈡微生物特性⒈形態(tài)結(jié)構(gòu)⒉抗原成分O抗原－50種以上但只有幾種血清型與致病性有關(guān)，我國主要為O:9、O:8、O:5、O:3。⒊培養(yǎng)特性：MAC－乳糖不發(fā)酵菌落⒋生化特性：脲酶陽性、V-P22℃-25℃陽性、鳥氨酸脫羧酶陽性43微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第五節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)㈢微生物檢驗⒈檢驗程序－見P126⒉標本采集－采集糞便、食物、尿液、血液。⒊標本直接檢查⒋冷增菌－糞便標本可用5－7mlM/15PBS4℃冷增菌。44微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬第五節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)⒌分離培養(yǎng)與鑒定⑴分離培養(yǎng)：接種MAC、NYE或CIN平板。⑵初步鑒定MOT動力、V-P、ONPGβ-半乳糖苷酶22℃-25℃陽性。⑶最終鑒定：全面生化見表⒍檢驗結(jié)果分析。45微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬46微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬47微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬粘質(zhì)、液化沙雷菌的鑒別試驗粘質(zhì)沙雷菌液化沙雷菌紅色沙雷菌阿拉伯糖－＋＋棉子糖－＋/－＋木糖－＋＋鳥氨酸＋＋－48微生物學(xué)志賀菌沙門菌耶爾森菌屬腸桿菌科與其他科菌的鑒別試驗?zāi)c桿菌科弧菌科非