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文檔簡介
基因重組與基因工程GeneticRecombinationandGene
cloning
第六章DNA分子內(nèi)或分子間發(fā)生遺傳信息的重新組合稱遺傳重組或或基因重排。重組產(chǎn)物稱為重組體?;蛑亟M主要發(fā)生在減數(shù)分裂時同源染色體之間的交換。(形式多樣)重組與進化關(guān)系密切,增加群體的遺傳多樣性,利于突變的優(yōu)化組合。DNA重組接合作用(conjugation)轉(zhuǎn)化作用(transformation)轉(zhuǎn)導作用
(transduction)#轉(zhuǎn)座
(transposition)#同源重組
(homologousrecombination)#位點特異的重組(site-specificrecombination)異常重組發(fā)招生加在圈同烏源眠序牽列較間絹的康重敞組尚稱峽為墳同皮源挎重隆組(幫h叉o擇m聲o挨l蠶o麻g燥o截u帝s半r紹e驗c住o養(yǎng)m您b望i云n港a蔬t插i翁o鞋n趨),革又丸稱鎖基古本結(jié)重覆組敘。食是移最徹基箱本兼的D堪N懲A重斬組它方雁式錄,銅通控過誘鏈罵的置斷恰裂芽和才再盟連斥接舌,轎在霞兩鍬個D碼N啟A分胞子袖同握源味序曾列稿間怖進駛行繪單綿鏈曠或蓋雙貧鏈悅片竟段看的狼交撿換徐。以E五.終c亡o揀l禮i的奮同懸源灑重瘦組圍為縮慧例哨,炸了筍解議同動源牲重帆組逝機古制企的H煎o甜l職l刷i粱d郊a壇y模德型蠟。6咱.謙1、貼同匯源鍋重洞組H右o逆l括l欣i珍d斧a納y模懼型離中代,辭同茄源紹重妖組警主偷要4個眨關(guān)全鍵溫步奮驟①兩祖?zhèn)€脂同告源況染怪色像體D姻N壓A排赴列河整園齊②異一慣個D助N區(qū)A的廚一屈條樣鏈鈔斷鞋裂薦、才并共與嫩另適一哪個D下N忍A對卵應蛇的喂鏈修連瘦接要,惕形鉤成H湯o剝l脫l水i蠢d傍a農(nóng)y中紐奉間粘體③可通玩過注分粒支諷移畜動禾產(chǎn)長生東異厚源端雙唐鏈D賠N岔A(卵立晶體器異獲構(gòu)鍬)④H個o葛l講l亮i倡d腸a盡y中估間鑄體期切宴開門并商修露復紗,教形釀成影兩排個間雙勤鏈貼重擴組復體D董N倡A,尤分多別衫為床:片段重組體(patchrecombinant)拼接重組體(splicerecombinant)片印段訓重門組圓體:切友開每的氣鏈罰與換原罪來叔斷色裂愈的徐是線同敬一類條攜鏈順,良重紀組爭體同含槽有損一灶段仆異強源線雙長鏈瞎區(qū)虛,黑其兩宗側(cè)來盒自招同天一系親衛(wèi)本D奪N伍A。拼橡接倚重逃組刊體:切拉開哭的皂鏈騰并杰非鄭原拾來媽斷輪裂追的沾鏈苦,脖重乳組聾體膊異騰源撇雙第鏈認區(qū)狐的兩胳側(cè)來晉自玩不機同媽親推本D第N游A。5′5′5′5′3′3′3′3′5′5′5′5′3′3′3′3′
內(nèi)切酶
(recBCD)DNA侵擾(recA)分支遷移
(recA)
內(nèi)切酶(recBCD)
DNA
連接酶5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′3′3′5′3′5′3′3′5′5′3′5′3′5′3′H脅o竟l系i鼓d解a欣y中偽間健體5′3′5′3′5′3′5′3′目句錄片炎段喝重劇組帝體(滋見件模約型奏圖古左巷邊瞎產(chǎn)戚物符)平:切邀開籮的覽鏈見與螞原膛來旗斷考裂遺的狐是爛同棒一釋條培鏈夠,拒重兩組段體攝含爭有男一效段最異完源者雙濫鏈捧區(qū)洪,虹其老兩簽側(cè)杠來裂自鞭同著一同親覆本D豎N筍A。拼驢接愧重漂組含體(號見疾模似型芝圖含右惱邊遣產(chǎn)困物稿)帥:切問開新的乘鏈犧并血非授原表來朗斷撐裂寺的芹鏈戀,淺重灰組昨體腐異完源齒雙繩鏈向區(qū)校的釘兩廟側(cè)利來讀自年不凝同混親腰本D改N莖A。5′3′5′3′5′3′5′3′5技′3卸′5墻′3攝′5食′3玩′5怎′3稿′Holiday中間體5′3′5′3′5′3′5′3′5′3′5′5′5′3′3′3′5′5′5′5′3′3′3′3′5′5′5′5′3′3′3′3′5′5′5′5′3′3′3′3′5′5′5′5′3′3′3′3′內(nèi)切酶(ruvC)內(nèi)切酶(ruvC)DNA連接酶DNA連接酶片紡段滾重雀組進體拼曬接編重匹組眉體目欠錄分遮支工移熔動心的貌過濟程族伴羨隨仇著D獄N裳A的撲修晌復同液源拘重觸組司是諒減憑數(shù)粘分腰裂奏的腰原漏因委。同奸源綠重狡組法是凍由騙于屑堿恰基炒間釘?shù)膸r精世確能配與對膀?qū)嵦瞵F(xiàn)趟的異清源含雙瓦鏈不與罩基湖因悅交便換同修源載重溉組伯時脂會貼產(chǎn)噸生態(tài)異趨源帽雙承鏈激,丸從近而崖發(fā)壤生咸基蹤蝶因殊交鳳換鉤。減芳數(shù)勞分濟裂告后顏分怎離畜:黑(澆對謀異界源成雙網(wǎng)鏈市區(qū)帖內(nèi)語不噸配哨對帥堿圈基寶的習修義復喂而菠進野行噸的準基杰因轟校蘋正擠過失程奇稱延作潤基余因免轉(zhuǎn)兩換搖)基揮因賊轉(zhuǎn)騎換息頻增率赴在洞非唯對餐稱敵異倒源垃雙剃鏈疫區(qū)接較晉高啟?;嘁蛞恨D(zhuǎn)徹換享也缺可點以遲在擱有陡絲放分咳裂驢時基姐否妹單染鹽色膀體霞的美等迷位反基社因鋸間壩、擔有幟絲導分桃裂抹與室減低數(shù)啟分司裂表時由同框一成條擴染夕色喜單遇體存上斃非別等弓位歐重給復宇基枕因畜之月間城發(fā)綢生H杠o編l寧l拼i谷d點a惠y亭模拔型家提寇出久了從同立源到重騎組址的兵基瓶本否模發(fā)式親,貨但普對筆于器基夠因厘重禿組固具瘋體姿細撥節(jié)惰,看異麗源蜜雙押鏈材的透形舅成可細晶節(jié)后不兔清齊楚螺。在伍H段o棒l銷l婆i燙d易a象y禿基故礎(chǔ)對上霞提余出尊了飼單妨鏈駕斷盒裂哪?;晷驼骱图p延鏈叛斷道裂昆模則型油,丘兩傳個惠模麗型愁的守區(qū)沙別譜在巡壽于敘解攝釋老重悼組午期辯間右D蠶N輝A重的憤修匆復戀的甚具憤體坡過霜程瓶不延一構(gòu)樣何。器有京供勝體聰受涼體主之袖分嗓。閃(且受誘體帶:市發(fā)嗽生鑒鏈幟斷汁裂礦的習分禾子蝴P仁1蓄3玩8驢-胡1晚3撤9縫)細鐘菌律的跌基鈔因蘋轉(zhuǎn)此移蓋與燭重警組低丈等惰生呀物安也熔可庫以醋以蘿轉(zhuǎn)勁化桃、型轉(zhuǎn)揀導跟、茅結(jié)甘合稠等挑多值種果方撿式嘗實鹿現(xiàn)美細藝胞奴間猛的價基努因初轉(zhuǎn)慣移宗。具耀體津方肅式遺:秋接篩合激、染轉(zhuǎn)峰化守、襖轉(zhuǎn)縱導蠶、右細拴胞譜融薦合繩。外繼源說基叮因揭的嘉命貿(mào)運成:娘降瞇解撞、暫暫王時血??淞敉?、勺與仗內(nèi)竭源俯基抖因脫置當換夾、尋整康合晉。一伯、騎接豈合柄作債用贏(c煮o絡(luò)n前j倦u看g貓a全t壁i器o驗n盼)當露細虧胞嶺與揭細切胞避、哄或站細紡菌映通持過乳菌襲毛咽相集互合接觸疏時毒,棕質(zhì)缺粒D釣N謠A從女一師個月細歌胞提(編細顧菌器)襲轉(zhuǎn)碌移牲至另監(jiān)一舉細襪胞系(綿細懸菌突)建的D說N沉A轉(zhuǎn)帖移冶稱套為龍接耀合珍作內(nèi)用顧。F因施子繳編以碼壓表科面腸排歌斥下蛋梢白怎、若切板口發(fā)酶蠅、拌解搬螺捉旋撒酶燈、D桃N夠A轉(zhuǎn)勿移爐通蛙道稍蛋詠白廊等膚、F因霜子敵可灑以踏與幣細繳菌撐染抱色匠體鍛發(fā)含生畝交論叉酸連醋接強而綠重極組弦整者合貞入瞇細暫菌靜染卵色紗體二馬、勞轉(zhuǎn)碎化件作統(tǒng)用席(t踏r勻a嚼n掌s養(yǎng)f腸o咱r到m蠟a撇t陣i瘡o乘n)通壟過坦自亦動污獲涉取屋或包人駱為念地俘供稅給襲外正源D驢N倒A,使瘡細幻玉胞杏或尸培正養(yǎng)凳的迅受蝴體亡細櫻胞連獲拐得析新夫的算遺哈傳立表店型療。感納受絡(luò)態(tài)低細真胞高體濃交度檢鈣孩可士以席誘斗導株感屠受溉態(tài)例解:溶細菌技時油,悄裂快解孩的D壁N腹A片倘段議被惠另秩一釘細混菌概攝駛?cè)●R。三為、轉(zhuǎn)孕導狡作逗用港(t焦r傻a乳n翻s塞d途u纖c攀t新i暮o拒n弓)當萍病概毒決從潤被倆感投染較的欣細傍胞澡(歐供繭體浙)釋械放著出廟來臨,集再靠次秀感朱染戰(zhàn)另發(fā)一城細毅胞扶(息受攤體軍)垂時模,伍發(fā)丹生社在糖供壁體避細鐘胞則與帝受頸體廁細蹈胞建之嚼間的D層N套A轉(zhuǎn)所移擴及伙基握因櫻重把組旗。溶菌感染重組感染細菌噬菌體圖1朝5造-此3轉(zhuǎn)忠導濁作祥用轉(zhuǎn)僅導聾:壓通憲過旬病圣毒飽介屈導港發(fā)叔生掌在筒供攀體礦細叼胞恰與孕受宏體皮細現(xiàn)胞之符間陵的D謝N柔A轉(zhuǎn)列移沿及乓基幣因金重裁組轉(zhuǎn)壟導:當晌病杜毒骨從厚被灰感帽染陶的沿供能體啟細片胞陳釋勞放徹出腰來叨,挽再斗次亡感鼓染仆另捐一銹受潮體解細碑胞亭時徹,印發(fā)送生造在騎供撓體妙細壩胞桑與山受抖體漲細剪胞略之攜間繭的D怎N澇A轉(zhuǎn)民移質(zhì)及妖基長因煤重格組拐即夠為紅轉(zhuǎn)斷導塞作襪用轉(zhuǎn)粥導(搞t餐r墳a虧n挽s內(nèi)d催u癥c忘t辱i箏o下n掘)*轉(zhuǎn)邀染(季t搜r輛a者n鋼s騾f(xié)訴e仙c賠t悟i冒o鳴n房誠)轉(zhuǎn)胡染嗽是蒜轉(zhuǎn)唯化惱的產(chǎn)一臂種姓特波殊賠形翻式昨。由t井r毒a綁n米s佳f漏o飲r營m掃a麻t弄i渡o邊n(龍轉(zhuǎn)化化坊)壟和i次n志f養(yǎng)e竟c幼t坑i瘡o航n(而感噴染腿)柄兩紙詞摧構(gòu)哨成蚊。原愚指屯將境噬始菌焰體拒、筋病村毒戒或困以薄其風為棒載乏體降構(gòu)膠建間的鏈重純組蔑子木導澡入作受趴體爪細毅胞廈的主過仙程享。通以過感苦染賄方在式將棗外喜來D部N積A引震入砌宿斬主冬細和胞桌,碑并爬導撿致酸宿習主艇細爺胞遺喝傳箏性教狀嗓改業(yè)變的星過惡程廟稱挖為姑轉(zhuǎn)遷染企。將鋒任跳何絨類唐型D敲N筍A轉(zhuǎn)巧移每至瓶動究物中細陡胞煙內(nèi)陸的頸過銀程燥均線可根叫載轉(zhuǎn)碎染餃。細抵菌尸的狼細易胞屑融籮合由膝于丙細害胞犬質(zhì)神膜姑融緩合俘導葡致交的奇基患因個轉(zhuǎn)稍移敢和珠重瘡組束。(搞原觸生慚質(zhì)柜體掛融桶合洋)細會菌收的嘩同購源陪重界組枝的慶酶寸學已機愿制1、R炮e占c蒜B寧C音D(休外姿切血核趙酸曾酶Ⅴ)吳和C棍h刪i位議點具頌有譽解媽旋蓋酶鳳(擁再令旋拼)組活栗性賣、A戴T閉P蓬a天s革e活拔性勁、款核餡酸久外耳切醫(yī)酶擔活勝性勝、序殘列朗特優(yōu)異貿(mào)性倒的暴單瘦鏈表內(nèi)育切恰酶號活滲性單譽鏈昌內(nèi)申切羅酶粉活斤性遍和卻解課旋休酶券活夠性黑使D扶N收A產(chǎn)懇生窩具撿有任游屆離鉤末嶼端東的猶單掉鏈-設(shè)-測-R受e擦c勺A的析作驗用獄位郊點R冷e杠c瞞B棵C忠D有洽固昂定禍切伸割尤位陣點原算核繪生濾物捎的赤重棕組梁酶調(diào)學記機補制恐已為經(jīng)違比松較蒙清苦楚C骨h拖i位筑點膠出掩現(xiàn)沉幾喝率尖很靠高維,再是R尼e飽c恩B闊C嶺D的踏靶麥位慎點G北C輝T鹽G瞞G估T恐G森G3‘?R粒e鍋c蟻B懶C膛D的球識松別婚和絕切職割隨位醬點a、R韻e酷c然B夫C否D結(jié)模合熄在D君N浴A的膊平頭扁末牧端撞(蕉產(chǎn)吃生撒機湊制子不懷清恩楚漠)b、外券切里、解攪鏈逮、目移柱動(A去T驕P)c、兔各耳落狀l撲o填o懸p結(jié)噴構(gòu)滅產(chǎn)沸生再芬旋浮酶芹活濟性號低案于浮解浮旋材酶斷活梳性吧)d、R煎e市c禽B弦C販D在l呆o妄o臥p單旗鏈魚區(qū)斗的c澇h畏i位第點3‘方4~6培N市T處盆切斷辣單奴鏈犬(禾單擋鏈稠內(nèi)話切紀酶霧)?c咱h童i位蠶點是:G豈C請T間G藥G壞T直G將G目成前意發(fā)紋現(xiàn)疲的魄重慕組牽熱運點E壁.話c佳o辨l債i含1轟0勺0麻0個促、E校u肝k豎.e、R乏e離c贈B戲C忘D切區(qū)割膝產(chǎn)香生3’單謙鏈上末鄭端2、R卷e雅c絨A蛋江白(1)活招性a、R棕e聲c彎A有默單茶、雙應鏈D頂N蛋A結(jié)國合舊活劑性b、R器e制c竟A有N陷T角P宰a派s廢e活喜性富(純底精物忽差笑異喊活疏性寧)與您單鎮(zhèn)鏈D武N坦A結(jié)孤合結(jié)時暖活床性歷最蛾大-籃-賢-依在賴桑于D叼N因Ac、R苗e尚c婆A有從啟陪動嚇一從個訪分連子擺的易單窮鏈疫侵勾入籮到款另憑一鵝雙暴螺浸旋憲分擴子的掃能這力降,激即縣聯(lián)割會難同浸源D擁N摧A(采但湖其乒靶D滑N紙A必版須喝有物缺益口喜-過-貢結(jié)挑合D子N包A)RecA入侵單鏈被置換連R尺e討c鄰A引覽發(fā)英鏈偶侵灶入殃模昂型R遺e萄c埋A引貧起兇的創(chuàng)鏈去交數(shù)換歪和H惹o燈l暖l楊i王d替a調(diào)y結(jié)經(jīng)構(gòu)織的延生材成(2)R俱e飄c括A蛋膊白瞧催株化齊雙除鏈鴉和鼓單耽鏈D某N誘A的其反靠應穿階素段a、聯(lián)決會竄前胸階椒段懂(都緩稍慢角)R疤e枯c喬A與盼單造鏈盯結(jié)緊合b、單濱鏈房誠與押雙咐螺挑旋筐的漢互照補突鏈貓迅探速禁配優(yōu)對拜,盲形送成欲雙霸鏈維連秧接蛇分求子H從o做l誼l崖i纏d泄a攝y(5‘侵楊入鳴)c、從關(guān)雙累螺吼旋喂結(jié)眨構(gòu)兵中興緩晶慢牌置蚊換叨一具條停鏈買產(chǎn)乓生柄一嗓段聾長舍的忍異狗源淡雙堅鏈D蠻N瓜A反殖應經(jīng)結(jié)糟束膠時帥,R限e裙c聾A結(jié)核合戚到藥雙洗鏈遲上?其貨中—單川鏈寶同焰化凝有瓣固葡定晚的涼方大向入鳳侵通單店鏈望進班入回的更方咐向同是5巾’-3附‘,雙啞鏈D編N潛A的渡互光補中鏈鎖是3’-5‘?R纏e怠c股B拋C喇D和R愿e病c陵A的撕共然同領(lǐng)作咬用R虎e嶄c蝴B午C喂D產(chǎn)遞生翁游運離發(fā)單執(zhí)鏈-漢-且-R省E練C抱A因糊子遣接俊到貼重歌組沖反買應3、荒原走核榴同代源宇重斤組司的劫其撿它瘋蛋克白需羅要E銳.剖c禮o鞋l房誠i中損三木個磁基美因r烘u挑v劃A舊,晃r顛u修v挖B和r祝u令v模C的巡壽產(chǎn)倘物a、R姐u淺v炮A識醒別H示o修l休l番i律d炭a淘y結(jié)幫構(gòu)宇的嗚連雀接蔬點b、R坐u潮v屠B為宿分膨枝臣遷弦移情提方供雪動爆力裝(A虜T釣P臨a腰s猛e賊1孕0~2擦0陸b襪p芝/泥s)c、R群u艱v演C核峽酸筋內(nèi)痰切副酶-拼-頭-專市一禿性宮識草別H選o羞l折l靜i盼d滾a獵y結(jié)身構(gòu)廳的笛連效接伏點體秤外子切段段帖連恩接販點兵以轟拆瓦分列重質(zhì)組需體?E榴.店c山o球l授i重朗組歸的游各及階型段(瘦損稅傷證修捕復殺)損柿傷D倡N撇A復敵制然產(ch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阻遏蛋白Hin重組酶轉(zhuǎn)位片段hinH2IH1
H1鞭毛素hinH2IDNA啟動序列H1啟動序列沙討門季氏沒菌H片控段送倒斤位丘決爆定丈鞭著毛名相端轉(zhuǎn)百變P參1必9管77煌.聽3、羅轉(zhuǎn)亭座臣成酷分余概若述1、轉(zhuǎn)員座旦子(元)或陜轉(zhuǎn)烏座慰元暑件(棗t流r榜a寇n孟s剩p貌o嬌s筆o與n斑o既r哥t降r鉆a莖n濟s停p刑o虧s鎖a趁b獻l個e壩e裙l技e狗m粗e堡n研t憲)擠:基社因蝴組答上幅不毅必活借挪助休于朋同絮源問序鋤列規(guī)就包可喉以割移彼動爹的D貪N始A片袖段獸,崗它申們呆可致以趣直接安從禁基卵因心組滿的泰一芬個猶位未點當移班到昆另純一殃個權(quán)位畜點攤(焰供搞體見和誘受祥體襪)轉(zhuǎn)聞座陰(t蛾r開a喚n紡s泊p塘o別s雜i咱t礦i馬o扭n):牢轉(zhuǎn)勵座碎元流的蒙轉(zhuǎn)璃移問過抖程椒(陵不避十宇分族確雪切黎)2、替發(fā)閘現(xiàn)踐和偵發(fā)指展?1段9創(chuàng)1般4A幸.石E潑m炕e薦r昆s烈o哈n1匹9拉3跟6M臺a蠟r賊c酷u符s裹.磨M名.司R頸h墨o球a爽b共e杠s玉盼米排果餅皮倉、騎糊術(shù)粉羞層衣花剛斑拜突棒變玉倦米殃籽線粒賭糊嚴粉漢層味色磨素吳不慨穩(wěn)益定墻遺燃傳印機完理跳唯躍扁基衫因唯(j俊u損m委p緞i裙n御g木g狠e夜n券e)?1勺9蜓4貸7冷銹泉絹港痛實路驗緒室吧(位美賢)B臂a蔽r蜜b仇a膊r端a企M險c仁C尋l毯i勞n虧t錢o慣c虎ka游)不滑依渠賴供術(shù)體冠序察列與扁靶唐位緞點究間確序糠列牽的牽同喊源楊性b歇)轉(zhuǎn)慢座糞不貞是陣簡廉單灰的橋轉(zhuǎn)克移踢,夾涉聾及視轉(zhuǎn)硬座狠子升的譽復六制H螺o茫t頭s音p浮o溉t宋s(熱鐵點)R刃e開g是i帥o逃n濱a妻l布p撓r圾e竟f終e聯(lián)r何e渣n皇c唱e(在3麥k神b區(qū)約域桌內(nèi)牧的暫隨扎機借插欣入)d甚)某噸些嚴轉(zhuǎn)阿座狐因英子剃(T浪n軌3)良對奔同決類臥轉(zhuǎn)浩座蘋因巧子潔的瞞插條入悔具領(lǐng)有水排白他惡性(票免界疫匯性驅(qū))e偽)靶核序尖列群在劇轉(zhuǎn)葛座鴿因仍子觀兩耀側(cè)肆會琴形爐成鬧正獻向脾重勢復f細)轉(zhuǎn)孤座決因款子俘的喪切添除欠與餐轉(zhuǎn)顫座栽將頃產(chǎn)畢生霸復精雜郊的搭遺恨傳哥學粒效恐應3、厲轉(zhuǎn)踏座績重勿組市的蹄特輝點c支)轉(zhuǎn)累座吉插訓入折的然靶狠位鑼點攪并疏非鹽完阿全碗隨次機(攜插浪入聽專羅一睛型喝)二尾、P約r跟o偵k嘴.轉(zhuǎn)推座摸子窄種乞類?兩蹲種艱類鎖型宰:泰簡能單造轉(zhuǎn)嶼座犯子孩(s篇i累m糞p廈l確e充t擔r首a類n鵲s求p戲o懷s陽o牽n)(地插孝入扮序速列i否n皂s旁e悠r毯t岡i短o斷n仍s句e龜q垃u挺e葛n著c較e侮I咳S)復泄合洋轉(zhuǎn)凝座長子燙(c侮o端m愿p偵o綢s嗽i它t殊e具t準r別a蝕n戰(zhàn)s疫p米o翠s磚o優(yōu)n)?共采同齊特碑征探:a)矩兩森端圈有2幻玉0~4齡0懂b戚p的I放R船(反摧向但重決復珠序甜列)b)節(jié)具拘有側(cè)編售碼陸轉(zhuǎn)握座牌酶竟(t艇r只a推n徐s織p絮o謠s羅a漠s著e)挪的參基吳因1、的插番入您序斬列棟(直最色簡聾單田的婚轉(zhuǎn)般座曉子赤稱愿作遵插騙入蓮序草列戴)?最毀簡逃單稈,坊是安細緩菌宋染頁色極體揉、捐質(zhì)柳粒秧和做某咸些露噬辣菌熄體刺的懲正館常碌組合分?命沖名滔:I魯S+鞠編掘號甩(敗鑒更定好類決型即)長晉度7藍0扒0~2犧0睡0團0售b煉p?特泛點答:a)釘兩只端I脂R為生轉(zhuǎn)激座松酶禽的幫識銅別脖位簽點悶(褲突釣變授)b)撈插宣入國靶顏位艘點頌后絞會怎出壇現(xiàn)旱靶孫位跳點忘的退正冰向扮重避復廉(3~9何b偽p)?I繼S可徹以脅正燥反仙方庸向判插淺入坦到D津N愁A(合宿斜主舅、齒質(zhì)叼粒腫或揭某處些狡噬背菌交體伐)桑,常尋對緞插福入兩位良點肉后幼面處的催基芝因旅表奏達籮功抗能偽產(chǎn)墓生揪極宏性影效服應a碰)T食n旁/貢T視n暮A搬f粗a口m慨i累l可yl具扇有I序R、裝轉(zhuǎn)本座相酶慢基匆因價、和調(diào)殿節(jié)面基矛因聞(針解填離梁酶糕)耍、儉抗餓抗六生鎮(zhèn)素芳基幕因lT助n院1將(住A冠m宮pR)物T貝n旱2像(雪A君m脾pR)T節(jié)n陣3那(繡A謎m池pR)上T摸n悠4射(錘A柴m愛pRS表t版rR)T什n雙5跌(楊K增a住nR)護T浩n懼6喝(劃k婆a愛nR)T棵n資7遭(榴S梨t慨rRT劣m超pR)送T占n霜9獲(委C燙a鄭mR)T枝n繩1等0虜(且T劣e宵tR)
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