核酸分離提取技術(shù)教學(xué)課件

核酸分離提取技術(shù)31、園日涉以成趣，門雖設(shè)而常關(guān)。32、鼓腹無所思。朝起暮歸眠。33、傾壺絕余瀝，窺灶不見煙。34、春秋滿四澤，夏云多奇峰，秋月?lián)P明輝，冬嶺秀孤松。35、丈夫志四海，我愿不知老。核酸分離提取技術(shù)核酸分離提取技術(shù)31、園日涉以成趣，門雖設(shè)而常關(guān)。32、鼓腹無所思。朝起暮歸眠。33、傾壺絕余瀝，窺灶不見煙。34、春秋滿四澤，夏云多奇峰，秋月?lián)P明輝，冬嶺秀孤松。35、丈夫志四海，我愿不知老。植物分子生物學(xué)實驗技術(shù)主要內(nèi)容第一部分核酸的分離制備第二部分PCR技術(shù)第三部分主要分子標(biāo)記第四部分基因克隆中國古典哲學(xué)思想是世界思想文化寶庫中的一支奇葩，它的深邃和睿智至今仍然在人們的社會、工作、生活中發(fā)揮著巨大的作用。高校的思想政治課教學(xué)作為大學(xué)生思想政治教育教學(xué)的主陣地，更應(yīng)注重對中國傳統(tǒng)文化的傳承，深入挖掘中國古典哲學(xué)思想中的德育素材，研究其當(dāng)代價值。通過創(chuàng)立“五大模塊教學(xué)體系”、創(chuàng)建個性化與生活化的思政課教學(xué)的新模式，建構(gòu)參與式、思辨式、開放式的學(xué)習(xí)方法體系，引入過程性評價和實踐性評價的考核評價體系，對大學(xué)生進行人生觀教育、感恩與誠信教育、理想信念教育和創(chuàng)新教育等，從而進一步豐富思想政治教育的內(nèi)容，從實踐上深化了思想政治課教法的改革。一、弘揚傳統(tǒng)文化、創(chuàng)新教育理念中國古典哲學(xué)思想是中華民族在長期的歷史發(fā)展過程中所沉淀下來的精神文明成果，是中國傳統(tǒng)文化的精髓。其中不僅蘊涵著豐富的人生哲理，同時又十分注重道德修養(yǎng)和教育方法，強調(diào)道德踐行，并作為道德傳統(tǒng)世代相承。當(dāng)前在社會主義市場經(jīng)濟體制下，人們的思想意識、價值觀念日趨多元化和復(fù)雜化，這就對當(dāng)代大學(xué)生的思想政治教育提出了新的要求。因此，我們應(yīng)以文化建設(shè)為引領(lǐng)、內(nèi)涵建設(shè)為核心、實用創(chuàng)新為重點，繼承中國古典哲學(xué)思想的精髓，以人文性、民族性、發(fā)展性的高校思想政治教育理念為依托，來弘揚中國的傳統(tǒng)文化，使大學(xué)生成為中國古典思想的繼承人，成為中國傳統(tǒng)文化的傳承者。二、建立模塊體系，研究當(dāng)代價值。在課堂教學(xué)中將古典哲學(xué)思想融入思想政治課“兩課”教學(xué)中，將原有的內(nèi)容體系優(yōu)化整合成“人生觀教育”、“和諧觀教育”、“實踐觀教育”、“發(fā)展觀教育”和“創(chuàng)新觀教育”等“五大模塊內(nèi)容體系”，從古典哲學(xué)思想這一獨特視角，豐富了教學(xué)內(nèi)容，開拓了學(xué)生視野。1、重視人的價值與當(dāng)代大學(xué)生人生觀、道德觀、理想觀的教育。儒家的道德理想倡導(dǎo)高尚的人格信念和堅守的人生信念，給人以深刻的思想和道德的啟迪，具有陶冶情操、修養(yǎng)道德的功效，研究其當(dāng)代價值可以幫助大學(xué)生追求人生的價值、樹立正確的理想信念。通過開展“認識你自己”的課內(nèi)研討會、“放飛理想翅膀”專題演講會、“品國學(xué)經(jīng)典、揚愛國豪情”的詩歌朗誦會等形式對學(xué)生進行理想教育、愛國教育、人生觀教育，使學(xué)生樹立正確的人生觀、世界觀。2、孔子仁學(xué)思想與平等、互助、和諧社會關(guān)系的建立?！叭省笔强鬃觽惱淼赖滤枷氲暮诵?，其“仁者愛人”思想，在規(guī)范人與人、人與社會、人與自然的關(guān)系中發(fā)揮了及其重要的作用。在教學(xué)中將這一思想融入到對大學(xué)生進行愛國教育、感恩教育、誠信過程中，通過開展“忠心獻祖國、誠心獻社會、愛心獻他人、孝心獻父母、信心獻自己”的“五心”教育等活動；建立“學(xué)生誠信檔案”制度，與學(xué)生簽訂了誠信考試、誠信應(yīng)聘與就業(yè)等承諾書，為建立平等、誠信、互助、和諧的人際關(guān)系及穩(wěn)定、良好的社會秩序提供基礎(chǔ)和保障。3、知行合一的認識論與大學(xué)生的實踐觀。知和行，是中國哲學(xué)的一對重要范疇，而做到知行合一就是做到認識和實踐的統(tǒng)一。在教學(xué)中，將古代哲人的這一思想融入到認識論的教學(xué)中，通過“我身邊的哲學(xué)”、“哲理與生活”等內(nèi)容，促進知行合一，把大學(xué)生的思想道德教育融入于學(xué)習(xí)生活、社會實踐和校園文化活動中，使學(xué)生在參與中受教育、長才干、得提高，做到知行統(tǒng)一，才能真正使大學(xué)生思想道德教育發(fā)揮實效性。4、老子“天人合一”、“無為”思想與科學(xué)發(fā)展觀在教學(xué)中，借鑒老子“天人合一”的思想中所蘊涵的唯物辨證的智慧精髓，來講解當(dāng)前的以人為本，全面、協(xié)調(diào)、可持續(xù)的科學(xué)發(fā)展觀，使特色理論增加了文化底蘊，夯實了教育基礎(chǔ)，同時又弘揚了傳統(tǒng)文化。三、創(chuàng)新教學(xué)模式，提高綜合能力中國古典哲學(xué)思想與思想政治課教學(xué)的整合，其目的是為培養(yǎng)適應(yīng)二十一世紀的創(chuàng)新型人才、促進學(xué)生的全面發(fā)展與終身發(fā)展。這就要在思想政治課教學(xué)中構(gòu)建全新的、立體的、長效的教育創(chuàng)新模式，提升思想政治教育的針對性與實效性。為此，在遵循教育發(fā)展規(guī)律的基礎(chǔ)上，打破思想政治教育的傳統(tǒng)模式，創(chuàng)建個性化與生活化的思想政治教育的新模式，讓學(xué)生在具體人物的思想個性的框架中獲得一種獨立思考的空間，將課堂上內(nèi)化的認知外化為良好行為，并貫穿于學(xué)生成長的全過程。通過教學(xué)實踐總結(jié)出來以“聽、講、看、練、做、傳”為主要內(nèi)容的“個性化”、“生活化”的教育模式，即：在課堂教學(xué)過程中，學(xué)生通過“聽”與“講”，將課程內(nèi)容進行內(nèi)化，形成認知；在教育見習(xí)、實習(xí)活動中，通過“看”與“練”，達到情感升華；在社會實踐活動中，通過“做”使學(xué)生在參與中受教育、長才干、得提高，做到知行統(tǒng)一；最后，在頂崗實習(xí)和自己的職業(yè)崗位上，通過“傳”做到身體力行、身先士卒，做好傳幫帶。突出了教學(xué)的實效性，體現(xiàn)了開放式教學(xué)的特色，發(fā)揮思想政治教育的全方位、長期性的功效。同時，在課堂教學(xué)中還通過開展專題式教學(xué)、討論式教學(xué)、實踐式教學(xué)和活動課教學(xué)，探索出“探究式教學(xué)模式”、“愉悅式教學(xué)模式”、“生活性教育模式”，構(gòu)建了將學(xué)生被動接受式學(xué)習(xí)轉(zhuǎn)變?yōu)閰⑴c式、思辨式學(xué)習(xí)的“實踐體驗教學(xué)法”、“專題討論教學(xué)法”、“開放式學(xué)習(xí)法”等多種教學(xué)法，提高課程教學(xué)的實效性、針對性，促進學(xué)生綜合能力的提高。四、改革評價體系，培養(yǎng)從業(yè)素質(zhì)。在思想政治教育教學(xué)中，學(xué)習(xí)成績評價是檢查學(xué)生學(xué)習(xí)效果的重要途徑。傳統(tǒng)考核評價方式偏重知識掌握，考的是學(xué)生的“背功”、“應(yīng)試技巧”，過分注重知識掌握，而學(xué)生的綜合素質(zhì)和能力則無從評價。因此，構(gòu)建學(xué)生綜合考評體系是思想政治教育教學(xué)改革中的重要環(huán)節(jié)。在改革過程中，創(chuàng)建了過程評價和結(jié)果評價相結(jié)合、學(xué)生實踐活動和理論學(xué)習(xí)相結(jié)合、學(xué)生社會實踐、教育見習(xí)實習(xí)反饋信息與用人單位跟蹤調(diào)查結(jié)果相結(jié)合的的綜合評價體系。通過建立學(xué)生實踐考核檔案，對學(xué)生的校內(nèi)學(xué)習(xí)、校外實踐及就業(yè)后的反饋，即對學(xué)生的“聽、講、看、練、做、傳”進行全方位、長期性的考核和記錄。在教學(xué)過程評價中，創(chuàng)建了課堂討論評價法法、作業(yè)評價法、參觀體會評價法、社會調(diào)查評價法等評價方式。在考核過程中，教師著眼于學(xué)生思想道德水平的提高和綜合實踐能力的發(fā)展，側(cè)重培養(yǎng)學(xué)生的人品素質(zhì)、文化底蘊素質(zhì)、專業(yè)技能素質(zhì)和從業(yè)綜合素質(zhì)。有利于課堂教學(xué)的優(yōu)化與實踐活動的開展，也能真實地測試出思想政治教育的實際效果，以多樣化的評價方式激發(fā)學(xué)生興趣，使教師和學(xué)生形成互動，實現(xiàn)教與學(xué)的雙贏?？傊ㄟ^中國古典哲學(xué)思想的傳承來推進高校思政課教學(xué)模式的改革，對于當(dāng)前加強大學(xué)生的思想政治教育、弘揚中華民族的傳統(tǒng)文化、構(gòu)建社會主義和諧社會、進而全面推進中國特色社會主義事業(yè)具有重要的意義。引言“科學(xué)是第一生產(chǎn)力”，“科技要發(fā)展，人材是關(guān)鍵”因此努力辦好和發(fā)展農(nóng)村教育，為科技興農(nóng)培養(yǎng)各類專業(yè)技術(shù)人材，就成為重視農(nóng)業(yè)、支援農(nóng)業(yè)，振興農(nóng)村經(jīng)濟的一個十分重要的問題。1提高辦好農(nóng)機成人教育意義的認識中國的農(nóng)村，是辦學(xué)的廣闊天地，面向農(nóng)村辦學(xué)發(fā)展農(nóng)村各類技術(shù)專業(yè)教育是成人教育發(fā)展和改革的一項戰(zhàn)略任務(wù)，實踐證明，“經(jīng)濟要上去，必須抓教育；教育上不去，富民無根基”。無論過去，現(xiàn)在和將來，若要改變貧窮面貌，增加工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)后勁，提高勞動者素質(zhì)是關(guān)鍵。縣級農(nóng)機校自成立以來，為農(nóng)村及其它行業(yè)培養(yǎng)了大量的各類技術(shù)專業(yè)人材，有很多人現(xiàn)已成為農(nóng)機戰(zhàn)線及其它戰(zhàn)線的骨干和領(lǐng)導(dǎo)，為發(fā)展農(nóng)業(yè)振興農(nóng)村經(jīng)濟做出了很大貢獻。2目前農(nóng)村的特點及農(nóng)民對教育的基本要求縣級農(nóng)機校主要培訓(xùn)目標(biāo)就是面向農(nóng)業(yè)，面向農(nóng)村，面向千家萬戶，為了搞好農(nóng)機校的培訓(xùn)工作，首先必須了解現(xiàn)階段農(nóng)村的特點及農(nóng)民對教學(xué)的基本要求，這樣才能使教學(xué)工作有的放矢。2.1現(xiàn)階段農(nóng)村的特點2.1.1文化層次低，生產(chǎn)方式落后我國農(nóng)村人口多，底子薄，經(jīng)濟、文化、科技落后，全國文盲2.2億人，農(nóng)村占90%；鄉(xiāng)以下有文化的人主要是讀過中小學(xué)的人，消化、運用先進科學(xué)技術(shù)的能力很差，嚴重地阻礙了科學(xué)技術(shù)流向千家萬戶。文化低、生產(chǎn)方式落后是實現(xiàn)農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化的最大困難，所以農(nóng)村技術(shù)教育亟待解決。2.1.2勞動強度大，交通不方便中國的農(nóng)民長期以來都是日出而作,日落而歸,雖然隨著農(nóng)村經(jīng)濟體制改革與發(fā)展,機械化水平不斷地提高,勞動力有所解放,勞動強度有所降低,生產(chǎn)方式有所改進,但由于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)村生活習(xí)慣長期形成的特點，閑暇時間和勞動時間的界線仍然交叉，加上農(nóng)村人口居住分散，交通不便等情況，對在農(nóng)村辦學(xué)的組織形式，時間安排教學(xué)活動等提出了不同于城鎮(zhèn)教學(xué)的特點。2.1.3農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的季節(jié)性，地域性和專業(yè)性由于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的春種、夏管、秋收、冬貯明顯的季節(jié)性，導(dǎo)致農(nóng)村生活，勞動和一些社會活動的不同要求，造成了人們活動的交叉性和不能統(tǒng)一活動的狀況，給面向農(nóng)村辦學(xué)的系統(tǒng)化，集中化和規(guī)范化帶來很大困難。2.1.4農(nóng)民知識結(jié)構(gòu)的特點現(xiàn)階段我國農(nóng)民的知識結(jié)構(gòu)主要是生產(chǎn)經(jīng)驗的知識系統(tǒng)和生產(chǎn)技術(shù)的知識系統(tǒng)兩大類。而農(nóng)民在農(nóng)村經(jīng)濟活動中表現(xiàn)為生產(chǎn)經(jīng)驗化的傾向。誠然，勞動人民在長期的生產(chǎn)實踐中積累了豐富的生產(chǎn)經(jīng)驗，為我國農(nóng)業(yè)發(fā)展做出了不可磨滅的貢獻，但這種經(jīng)驗知識，長期為農(nóng)民所信賴而導(dǎo)致一種“惰性”，只滿足于現(xiàn)有生產(chǎn)經(jīng)驗，而不愿接受新的科學(xué)知識，所以他們對學(xué)習(xí)科學(xué)知識缺乏緊迫感。2.2農(nóng)民對技術(shù)教育的基本要求隨著農(nóng)村改革的不斷深入，農(nóng)村生產(chǎn)結(jié)構(gòu)發(fā)生了巨大變化，商品生產(chǎn)迅速發(fā)展，傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)正朝著現(xiàn)代化的農(nóng)業(yè)過渡，這就要求廣大農(nóng)民必須掌握大量科學(xué)技術(shù)知識和生產(chǎn)技能。而農(nóng)民學(xué)習(xí)科學(xué)技術(shù)知識講求實用，如果傳授的技術(shù)知識與他們的實際生產(chǎn)無關(guān)或關(guān)系不大，那么他們就認為你賣的是“狗皮膏藥”而不買你的“帳”實用的技術(shù)知識對于農(nóng)民來說，他們是迫切需要的，凡是他們需要的知識，都要求個“快”字，這就要求農(nóng)民教育不但要講實用，而且還要注重速成，通過十多年農(nóng)機教育工作的實踐和長期與廣大農(nóng)民接觸，了解到農(nóng)民技術(shù)教育的一些要求，歸結(jié)起來，主要有以下幾點：一是時間要短。通常，農(nóng)民的時間觀念在其他工作和活動中較為淡薄，而在學(xué)習(xí)中卻十分注重。時間一長就坐不住，聽不進，感到厭倦，因此對農(nóng)民技術(shù)教育的學(xué)習(xí)必須講究時間效益。二是內(nèi)容要實，農(nóng)民講實惠，求實效，希望學(xué)習(xí)起來立竿見影，所以學(xué)校辦班要因地、因時、因人制宜地傳授技術(shù)知識，使學(xué)員學(xué)到的知識能解決生產(chǎn)實踐的需要，達到學(xué)以致用并產(chǎn)生經(jīng)濟效益。三是教材要精。農(nóng)民教育的教材要短小精悍，通俗易懂，圖文并茂，集知識性、趣味性于一體。四是理論要淺。高深的理論農(nóng)民不易接受，講課必須做到深入淺出，淺中求實，淺中求深，盡量化抽象為具體，化概念為形象。五是方法要活，教學(xué)應(yīng)根據(jù)不同的對象不同的內(nèi)容采取不同的方法，不同的教學(xué)手段。六是形式要多，教學(xué)不僅僅滿足于課堂教學(xué)，要根據(jù)教學(xué)的需要，隨時把課堂搬到田間地頭，或?qū)嶒瀳龅兀瑢嵙?xí)車間等，盡量以現(xiàn)身說法，使學(xué)習(xí)內(nèi)容看得見，學(xué)得懂。七是輔導(dǎo)要勤，農(nóng)民教學(xué)，不能上完課了事，應(yīng)注重經(jīng)常性的輔導(dǎo)，經(jīng)常深入到學(xué)員中去，輔導(dǎo)其實踐，面對面的解決一些生產(chǎn)中的具體問題。3農(nóng)機成人中等教育學(xué)校教學(xué)管理3.1農(nóng)機成人中等教育學(xué)校不同于普通學(xué)校普通學(xué)校有相對穩(wěn)定的生源，師資、經(jīng)費、教材和一整套互相銜接的組織機構(gòu)，規(guī)章制度，升學(xué)，就業(yè)的渠道等，一系列相應(yīng)措施，而農(nóng)機成人學(xué)校則不然，它生源不穩(wěn)定，內(nèi)容不穩(wěn)定，教材不穩(wěn)定等等，如果我們也采用普通學(xué)校的形式，內(nèi)容等進行教學(xué)，就丟掉了自己的特點，喪失了自身的優(yōu)勢，取消了自身存在的價值。所以，縣級農(nóng)機校辦學(xué)就應(yīng)因地、因時、因人制宜，開展多形式，多類別，多層次的培訓(xùn)，采取靈活多樣的教學(xué)方法，充分發(fā)揮機校自身的優(yōu)勢，為農(nóng)業(yè)、農(nóng)村、社會培養(yǎng)更多更好的技術(shù)人材。3.2農(nóng)機成人中等教育結(jié)構(gòu)農(nóng)機成人中等教育結(jié)構(gòu)應(yīng)該是：學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)者善于利用成人教育內(nèi)部要素正體性和相關(guān)性，努力構(gòu)造一個相鄰要素互為作用，彼此制約，功能齊全，立體交叉的教育結(jié)構(gòu)。從教育內(nèi)容上看：科學(xué)文化、業(yè)務(wù)技術(shù)、政治思想、社會文化生活教育并舉；知識傳授與技能培訓(xùn)并舉；基礎(chǔ)教育與專業(yè)教育并舉。從教育形式上看：業(yè)務(wù)技術(shù)教育與崗位培訓(xùn)結(jié)合，系統(tǒng)教育與應(yīng)急培訓(xùn)相結(jié)合，業(yè)余與脫產(chǎn)，半脫產(chǎn)相結(jié)合，以校為主，校鄉(xiāng)結(jié)合，以農(nóng)機培訓(xùn)為主，系統(tǒng)內(nèi)外相結(jié)合。從學(xué)習(xí)時間上看：以短訓(xùn)為主，長短結(jié)合，力求實效速成。從教學(xué)方法看：課堂面授與函授，廣播講座、音像教學(xué)相結(jié)合，集中和分散自學(xué)，個別輔導(dǎo)相結(jié)合。從教育對象看：管理型人員和技術(shù)人員并舉，職后與職前并舉，在職與非在職并舉。從教師隊伍看：專、兼職并存、互相補充。學(xué)校教學(xué)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)可分為三個方面，第一方面，包括教學(xué)目的和任務(wù)，農(nóng)機成人學(xué)校培養(yǎng)目標(biāo)主要是為當(dāng)?shù)亟?jīng)濟建設(shè)，農(nóng)機系統(tǒng)培養(yǎng)所需的各類專業(yè)技術(shù)人材，為當(dāng)?shù)亟?jīng)濟建設(shè)和振興農(nóng)村經(jīng)濟服務(wù)，第二方面主要是教學(xué)內(nèi)容，包括專業(yè)設(shè)置，教學(xué)計劃和教學(xué)大綱，教材等，這是教學(xué)目的，教學(xué)任務(wù)的具體化。第三方面，包括教學(xué)方法，教學(xué)形式，教學(xué)手段等，是保證教學(xué)內(nèi)容的傳輸和教學(xué)目的，任務(wù)完成不可忽視的要素。3.3通過多種途徑全面發(fā)展學(xué)員的智力一個人在實踐中怎樣發(fā)現(xiàn)問題，分析和解決問題，是由他的綜合智力水平?jīng)Q定的，因此學(xué)校在教學(xué)中要注意全面發(fā)展學(xué)員的智力，通過各種途徑培養(yǎng)高度的注意力，深刻的觀察力，嚴密的思維力，非凡的記憶力，豐富的想象力，提高整體智力水平。加強學(xué)校與社會各業(yè)務(wù)部門的聯(lián)系，有計劃的組織學(xué)員參加社會實踐活動，在條件允許情況下，讓學(xué)員承擔(dān)一定的實際任務(wù)，以提高學(xué)員的獨立思考，判斷、分析、解決問題的能力。強化技能訓(xùn)練，智力和技能是成正比的，智力的強弱制約著技能的高低，同時智力的鞏固與發(fā)展又離不開技能的訓(xùn)練，為此學(xué)校要把訓(xùn)練、學(xué)習(xí)、實驗等技能訓(xùn)練納入教學(xué)計劃，并廣泛開展課外活動。活躍學(xué)習(xí)風(fēng)氣，從不同角度擴大學(xué)員視野，從而提高技能水平。植物分子生物學(xué)實驗技術(shù)主要內(nèi)容第一部分核酸的分離制備第二部分PCR技術(shù)第三部分主要分子標(biāo)記第四部分基因克隆參考書目:三〔美)DvekslerGsandDieffenbachCW,黃培堂俞煒源陳添彌等譯現(xiàn)代生物技術(shù)譯從PCR技術(shù)實驗指南科學(xué)出版社三(莢)ClarkMS主編顧紅雅瞿禮佳主譯植物分子生物學(xué)實驗手冊高等教育出版社施普林格出版社三三鄭成木主編植物分子標(biāo)記原理與方法湖南科學(xué)技術(shù)出版社Brownta.魏群等譯國外優(yōu)秀生命科學(xué)教材譯從基因克隆和DNA分析高等教育出版社3第一部分:核酸的分離制備uu日第一部分:核酸的分離制備1.DNA在分子生物學(xué)研究中的重要性DNA提取是一切分子生物學(xué)研究最基礎(chǔ)的技術(shù),高質(zhì)量的DNA是用于PCR和酶切分析等系列后續(xù)操作的重要保證發(fā)展了多種DNA提取方法,可從植物葉片、愈傷組織、組培苗、果實、韌皮部等多種組織器官中提取DNA;但不同植物、同種植物材料的不同來源、部位、形態(tài)以及不同化學(xué)成分、組織結(jié)構(gòu)特點差異,導(dǎo)致DNA提取時需要選擇不同的方法或作一些特殊處理從富含多糖、多酚、單寧、色素及其他次生代謝物質(zhì)的木本植物中提取DMA的方法難度就相對大于大多數(shù)禾谷類及蔬萊類植物(1)多酚被氧化成棕褐色(2)多糖、單寧等物質(zhì)與DNA會結(jié)合成粘稠的膠狀物,獲得的DNA常出現(xiàn)產(chǎn)量低、質(zhì)量差、易降解,影響了DNA質(zhì)量和純度,不能被限制性內(nèi)切酶酶切,嚴重的甚至不能作為模板進行PCR擴增2.提取DNA應(yīng)滿足的基本原則不同的研究對DNA的要求不一致,但一般應(yīng)滿足(1)排除蛋白、糖類和脂類等物質(zhì)的污染,DNA純度應(yīng)滿足下游操作需要用于RFLP、AFLP應(yīng)滿足酶切要求用于PCR的不含PCR的千擾甚至抑制物(2)所得DNA應(yīng)當(dāng)完整電泳檢測得到清晰、完整、可重復(fù)、無降解的條帶保證DNA一級結(jié)構(gòu)的完整(3)足夠量的DNA有的實驗要求量多(標(biāo)記)3.基本原理1)破壞(消化)細胞壁、釋放內(nèi)容物在破壁時也會剪切DNA,在完整性和產(chǎn)量間折衷考慮分離總DNA破壁方法液氮中快速冷凍、研磨成細粉末三分離核DN或細胞器DNA破壁方法更溫和的方法、以免過早破壞內(nèi)膜系統(tǒng)、含滲透劑的緩沖液4℃C勻漿」(2)破壞細胞膜使DNA釋放到提取緩沖液中通?？縎DS或CTAB去污劑來完成,保護DNA受核酸內(nèi)源酶降解緩沖液通常含EDTA,可螯合大多數(shù)核酸酶所需要的輔助因子鎂離子三4.基本步驟1)植物材料的采集及前處理盡可能使組織材料保持水分而保鮮(用濕紗布包襄,放置于密閉的冰盒等)野外遠距離采集樣本時,盡可能采用冷凍保存(如放置于液氮中)不具備冷凍條件時無水CaS04的瓶子分別保存使其迅速千燥,可將材料保存數(shù)月,返回后盡快提取DNA對具有大量次生代謝物(如丹寧、酚類、醌類等)的植物材料,盡可能采集幼嫩組織,冷凍保存、短時間內(nèi)提取DNA植物組織化學(xué)保存法乙醇、丙二醇處理法導(dǎo)致DNA劇烈降解(不推薦)樣品長期保存液氮處理后貯存在-80℃冰箱或直接儲放于液氮中在與提取緩沖液接觸前防止冰凍樣品在空氣中融化導(dǎo)致酚類易被氧化實驗室發(fā)苗、田間取葉片(清洗去除灰塵、泥土以及茵孢子等)饑餓處理減少淀