對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物分析

對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物分析第1頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月分類與典型藥物理化特征鑒別試驗(yàn)雜質(zhì)檢查含量測(cè)定本章內(nèi)容第2頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月化學(xué)結(jié)構(gòu)：1.親脂性芳香環(huán)2.中間連接功能基3.親水性胺基對(duì)氨基苯甲酸酯類酰苯胺類第3頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、對(duì)氨基苯甲酸酯類基本結(jié)構(gòu)與典型藥物第4頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月苯佐卡因（benzocaine）鹽酸丁卡因（tetracainehydrochloride）第5頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸普魯卡因胺（procainamidehydrochloride）鹽酸普魯卡因（procainehydrochloride）第6頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、酰苯胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與典型藥物基本結(jié)構(gòu)第7頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸利多卡因（lidocainehydrochloride）鹽酸布比卡因（bupivacainehydrochloride）第8頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸羅哌卡因第9頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

1.芳伯氨基特性：對(duì)氨基苯甲酸酯類結(jié)構(gòu)中有芳伯氨基，發(fā)生重氮化-偶合；與芳醛縮合；易氧化變色。鹽酸丁卡因無(wú)此特性。酰苯胺類分子結(jié)構(gòu)中含有芳酰氨基，酸水解后顯芳伯氨基的特性反應(yīng)。注意空間位阻的影響。

三、主要理化性質(zhì)第10頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.水解特性：對(duì)氨基苯甲酸酯類分子結(jié)構(gòu)中的酯鍵易水解，除鹽酸丁卡因水解產(chǎn)物為對(duì)丁基苯甲酸外，其余均為對(duì)氨基苯甲酸(PABA)。3.弱堿性：該類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有脂烴胺側(cè)鏈為叔胺氮原子，具有一定堿性，可成鹽；可與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)，可相互區(qū)別。4.與金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)：利多卡因和布比卡因分子結(jié)構(gòu)中酰氨基上氮可與Cu2+或Co2+絡(luò)合，生成有色配位化合物沉淀。第11頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5.吸收光譜特性：含有苯環(huán)及取代基，具有特征的紫外光譜與紅外光譜行為。6.其它特性：因結(jié)構(gòu)中有芳伯氨基或同時(shí)具有脂烴胺側(cè)鏈，其游離堿多為堿型油狀液體或低熔點(diǎn)固體，難溶于水，可溶于有機(jī)溶劑。其鹽酸鹽則易溶于水。第12頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)鑒別試驗(yàn)

一、重氮化—偶合反應(yīng)

分子結(jié)構(gòu)中含有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生此反應(yīng)。第13頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

直接反應(yīng)：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺。丁卡因雖無(wú)芳伯氨基，但可與NaNO2反應(yīng)生成N－亞硝基化合物的乳白色沉淀。

第14頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月苯佐卡因、鹽酸普魯卡因鑒別方法：本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄III）

取供試品約50mg，加稀鹽酸1ml，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。第15頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第16頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、與金屬離子反應(yīng)1.鹽酸利多卡因的鑒別方法

（與銅離子反應(yīng)）藍(lán)紫色轉(zhuǎn)入氯仿中顯黃色第17頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月方法（ChP2010）

[鑒別]取本品0.2g，加水20ml溶解取溶液2ml，加硫酸銅試液0.2ml與碳酸鈉試液1ml，即顯藍(lán)紫色；加三氯甲烷2ml，振搖后放置，三氯甲烷層顯黃色。第18頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月亮綠色細(xì)小鈷鹽沉淀（與鈷離子反應(yīng)）第19頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸利多可因加硝酸酸化，加硝酸汞，加熱，顯黃色。對(duì)氨基苯甲酸酯類顯紅色或橙黃色。第20頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.鹽酸普魯卡因胺的鑒別方法基于普魯卡因胺分子中的芳酰胺結(jié)構(gòu)。紫紅色暗棕色棕黑色第21頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、水解產(chǎn)物反應(yīng)1.鹽酸普魯卡因的鑒別鹽酸普魯卡因+NaOH→白色↓（普魯卡因）第22頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月普魯卡因油狀物蒸氣濕潤(rùn)紅色石蕊試紙變藍(lán)對(duì)氨基苯甲酸鈉+HCl白色↓+過(guò)量HCl溶解第23頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月方法（ChP2010）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗铮焕^續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。第24頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.苯佐卡因的鑒別方法（ChP2010）取本品約0.1g，加氫氧化鈉試液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣。第25頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)

鹽酸丁卡因：取本品0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，析出白色結(jié)晶；濾過(guò)，結(jié)晶用水洗滌后，在80℃干燥，熔點(diǎn)為131℃。第26頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月五、吸收光譜特征

1.紫外吸收光譜：分子結(jié)構(gòu)中含有苯環(huán)2.紅外吸收光譜：利用化合物結(jié)構(gòu)中特殊基團(tuán)的振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)等紅外活性振動(dòng)產(chǎn)生的紅外吸收峰對(duì)藥物進(jìn)行鑒別的方法。第27頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第28頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)特殊雜質(zhì)與檢查一、鹽酸普魯卡因中對(duì)氨基苯甲酸的檢查雜質(zhì)來(lái)源：分子結(jié)構(gòu)中含有酯鍵，可發(fā)生水解。注射液制備過(guò)程中受滅菌溫度、時(shí)間、溶液pH、貯藏時(shí)間以及光線和金屬離子影響，易水解。第29頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（為什么要檢查？）ChP2010規(guī)定鹽酸普魯卡因及其注射液以及注射用鹽酸普魯卡因均需要檢查對(duì)氨基苯甲酸。第30頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月檢查方法（ChP2010）：HPLC限量:鹽酸普魯卡因原料藥以及注射用滅菌粉末中對(duì)氨基苯甲酸不得超過(guò)0.5%。鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸不得超過(guò)1.2%。第31頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月Agillent安捷倫Waters沃特斯Bruker布魯克Varian瓦里安AB美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)Shimadzu島津Finnigan菲尼根第32頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、鹽酸氯普魯卡因注射液中有關(guān)物質(zhì)和光解產(chǎn)物的檢查雜質(zhì)來(lái)源：在生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中，其注射液在一定的滅菌時(shí)間、溫度和pH條件下，更易發(fā)生水解反應(yīng)，生成4-氨基-2-氯苯甲酸降解產(chǎn)物。檢查方法（USP34-NF29）：HPLC限量：4-氨基-2-氯苯甲酸≦0.625%4-氨基-2-氯苯甲酸注射液≦3.0%第33頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、鹽酸利多卡因注射液中2，6-二甲基苯胺及其他雜質(zhì)的檢查雜質(zhì)來(lái)源：生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中水解。第34頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月檢查方法（ChP2010）：HPLC限量：2，6-二甲基苯胺≦0.04%

其他各雜質(zhì)≦1.0%第35頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)含量測(cè)定亞硝酸鈉滴定法非水溶液滴定法紫外分光光度法高效液相色譜法第36頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、亞硝酸鈉滴定法本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中可與亞硝酸鈉反應(yīng)，可用亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。

第37頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月ChP2010中的苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和注射用鹽酸普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺及其片劑與注射劑，可直接采用本法測(cè)定含量。第38頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.基本原理：芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成重氮鹽，可用永停滴定法指示反應(yīng)終點(diǎn)。第39頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.滴定法（ChP2010）：取供試品適量，精密稱定，置燒杯中，除另有規(guī)定外，可加水40ml與鹽酸溶液（1→2）15ml，置電磁攪拌器上，攪拌使溶液，再加溴化鉀2g，插入鉑-鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點(diǎn)時(shí)，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，至電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點(diǎn)。第40頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3.測(cè)定的主要條件(1)加入適量的溴化鉀加快反應(yīng)速度：重氮化反應(yīng)機(jī)制：反應(yīng)速度取決于：溶液中芳伯氨基的濃度和NO+的濃度（第一步）第41頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月KBr+HClHBr+KClHNO2+HBrNOBr+H2OKHBr∵KHBr比KHCl大300倍

∴生成NOBr量大得多∴加快重氮化反應(yīng)速度加入溴化鉀（ChP2010規(guī)定加入2g）HNO2+HClNOCl+H2OKHCl第42頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(2)加過(guò)量鹽酸加速反應(yīng)：因胺類藥物鹽酸鹽溶解度﹥硫酸鹽①重氮化反應(yīng)速度加快②重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定③防止生成偶氮氨基化合物芳胺與鹽酸摩爾比1：2.5～6偶氮氨基化合物第43頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(3)反應(yīng)溫度：溫度過(guò)高，可使亞硝酸逸失，并可使重氮鹽分解：

Ar—N2+Cl-+H2O→Ar—OH+N2↑+HCl

滴定應(yīng)在室溫（10－30℃）條件下滴定，其中15℃以下結(jié)果準(zhǔn)確。第44頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(4)滴定速度：滴定速度不宜太快。為了避免滴定過(guò)程中亞硝酸揮發(fā)和分解，滴定時(shí)宜將滴定管尖端插入液面下約2/3處滴定，一次將大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌條件下迅速加入，后將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗，再緩緩滴定。“先快后慢”第45頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4.指示終點(diǎn)的方法(1)永停滴定法：ChP2010全部采用該法。永停滴定儀第46頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月外指示劑法

用KI-淀粉指示劑指示終點(diǎn)的原理：

2NaNO2+2KI+4HCl

2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

第47頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(3)電位法：Pt-飽和甘汞電極(4)內(nèi)指示劑法：中性紅，藍(lán)紫色→純藍(lán)色第48頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月例：鹽酸普魯卡因含量測(cè)定方法（ChP2010）

取本品約0.6g，精密稱定，照永停滴定法，在15－25℃，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2·HCl。第49頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月計(jì)算：精密稱取鹽酸普魯卡因0.5207g，按永停滴定法,在15～25℃用亞硝酸鈉滴定液（0.1022mol/L）滴定到終點(diǎn)，用去亞硝酸鈉滴定液18.52ml.已知,每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的鹽酸普魯卡因。求鹽酸普魯卡因的百分含量？第50頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、非水溶液滴定法ChP2010采用本法測(cè)定鹽酸布比卡因含量。原理：鹽酸布比卡因側(cè)鏈哌啶環(huán)上的叔氮原子具有弱堿性，可采用非水溶液滴定法測(cè)定含量。第51頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月溶劑：冰醋酸-醋酐溶液因其在冰醋酸中堿性弱，加醋酐可增加其堿性。醋酐解離生成的醋酐合乙酰氧離子比醋酸合質(zhì)子的酸性強(qiáng)，利于堿性增強(qiáng)，滴定突躍敏銳。滴定液：高氯酸（0.1mol/L）第52頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第53頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、紫外分光光度法ChP2010采用紫外分光光度法測(cè)定注射用鹽酸丁卡因的含量第54頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、高效液相色譜法ChP2010采用該法測(cè)定鹽酸利多卡因注射液的含量。第55頁(yè)，課件共58頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月練習(xí)1.亞硝酸鈉滴定法指示終點(diǎn)的方法有若干，ChP2010采用的方法為A.電位法B.外指示劑法