第二-鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)課件

鎮(zhèn)痛藥對小鼠痛閾值的影響實(shí)驗(yàn)

目的1.了解鎮(zhèn)痛藥對實(shí)驗(yàn)動物痛閾值的影響。2.掌握鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)（熱板法）的操作方法。原理小鼠的足部接觸熱板，受熱刺激而產(chǎn)生疼痛反應(yīng)（即舔后足），以產(chǎn)生痛反應(yīng)所需的時間為痛閾值，通過測量給藥小鼠痛閾值的改變反映藥物的鎮(zhèn)痛作用。材料

1.動物：小白鼠25克~30克，雌性。2.儀器：YLS—6B智能熱板儀、秒表、注射器。3.藥物與試劑：曲馬多組注射液、生理鹽水、苦味酸方法1.調(diào)節(jié)智能熱板儀：使溫度控制在55±0.50C，熱板預(yù)熱10min。2.篩選合格小鼠：取20-26g雌性小鼠數(shù)只，每次1只放在熱板上，小鼠自放在熱板上至出現(xiàn)舔足所需的時間（秒）作為該鼠的痛閾值。凡舔后足時間小于5秒或大于30秒或跳躍者棄之不用。將合格的小鼠隨機(jī)分為2組，重復(fù)測定其正常痛閾值，計算兩次正常痛閾值的平均值，作為該鼠給藥前痛閾值。計算公式

痛閾提高百分率=（用藥后平均痛閾值-用藥前平均痛閾值）÷用藥前平均痛閾值×100%注意事項(xiàng)1、以雌性為好，雄性受熱后陰囊松弛觸及熱板，易致過敏反應(yīng)。2、室溫以15℃~20℃為宜，過低小鼠反應(yīng)遲鈍，過高小鼠過于敏感易引起跳躍，影響結(jié)果準(zhǔn)確性。3、正常小鼠放入熱板后易出現(xiàn)不安、舉前肢、舔前足、踢后肢等現(xiàn)象，這些動作不作為疼痛指標(biāo)，只有舔后足才作為疼痛指標(biāo)。扭體法原理：某些化學(xué)物質(zhì)（酒石酸銻鉀溶液、醋酸溶液等），注入小鼠腹腔可刺激腹膜引起持久的疼痛，致使小鼠產(chǎn)生“扭體”反應(yīng)（腹部內(nèi)凹，軀體與后腿伸張等）。鎮(zhèn)痛藥減輕疼痛反應(yīng)，可明顯減少“扭體”反應(yīng)的小鼠數(shù)。扭體反應(yīng)引起的一種間歇發(fā)作的運(yùn)動反應(yīng),表現(xiàn)為腹部收縮、腹前壁緊貼籠底、臀部歪扭和軀干后肢伸展,呈一種特殊姿勢。國外一般稱為“Writhing”,也有稱為“Stretching”、“Cramping”、或“Squirming”。這種反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制和它在藥理學(xué)上的意義迄未肯定。由于鎮(zhèn)痛藥可對機(jī)這一反應(yīng),曾建議用作篩選鎮(zhèn)痛藥的方法。注意1、醋酸有揮發(fā)性，用前宜臨時配制，存放過久可使作用減弱。醋酸扭體法制備疼痛模型最適醋酸刺激濃度為1.1%。每只動物腹腔注射部位和操作技術(shù)力求一致。2、小鼠體重輕，“扭體反應(yīng)”次數(shù)較低。3、室溫以20°C