執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師考試培訓-免疫部分學習

第一節(jié)抗原一、概念凡是能刺激機體產(chǎn)生抗體和效應性淋巴細胞，并能與之結合引起特異性免疫反應的物質(zhì)稱為抗原，又可稱為免疫原。抗原刺激機體產(chǎn)生抗體和效應淋巴細胞的特性——免疫原性?？乖c相應抗體或效應淋巴細胞發(fā)生特異性結合的特性——反應原性。二、影響免疫原性的因素抗原分子的特性宿主生物系統(tǒng)免疫劑量與途徑異源性分子大小化學組成與結構物理狀態(tài)三、抗原決定簇抗原決定簇又稱抗原表位?？乖肿又信c淋巴細胞特異性受體和抗體結合，具有特殊立體構型的免疫活性區(qū)域。表位類型——線性表位/順序表位構象表位/不連續(xù)表位含有多個表位的的抗原稱為多價抗原；只有一個抗原表位的抗原稱為單價抗原。四、抗原的交叉性不同物種間存在共同的抗原組成不同抗原分子存在共同的抗原表位不同表位之間有部分結構相同五、抗原的分類依據(jù)抗原性質(zhì)——完全抗原和不完全抗原。根據(jù)抗原加工提呈途徑——外源性抗原和內(nèi)源性抗原。根據(jù)抗原來源——異種抗原、同種異型抗原、自身抗原、異嗜性抗原。超抗原——如金黃色葡萄球菌腸毒素等。六、佐劑先于抗原或與抗原混合同時注入動物體內(nèi)，能非特異性地改變或增強機體對該抗原的特異性免疫應答，發(fā)揮輔佐作用，這類物質(zhì)稱為佐劑或免疫佐劑。PS：鹽類佐劑——鋁鹽油乳佐劑——弗氏佐劑……佐劑主要用于滅活疫苗等！屬于同種異型抗原的物質(zhì)是A、血型抗原B、免疫球蛋白C、滅活的細菌D、異嗜性抗原E、病毒衣殼蛋白抗原特異性取決于（）A.抗原的物理性狀B.抗原的分子量C.抗原決定簇 D.抗原結構的復雜性E.抗原的化學性質(zhì)抗原與相應的抗體或效應淋巴細胞發(fā)生特異性結合的特性稱為（）A.免疫原性B.反應原性C.抗原性D.異原性 E.特異性金黃色葡萄球菌分泌的腸毒素是一種（）A.異種抗原B.自身抗原C.半抗原 D.同種異型抗原E.超抗原第二節(jié)抗體一、免疫球蛋白與抗體存在于動物血液、組織液及其他外分泌中的具有相似球形結構域的蛋白，稱為免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）。抗體是動物機體收到抗原物質(zhì)刺激后，由B淋巴細胞轉(zhuǎn)化為漿細胞分泌的、能與相應抗原發(fā)生特異性結合反應的免疫球蛋白。PS:如果沒有特殊說明，提到免疫球蛋白往往指代抗體。二、抗體的基本結構Ig單體的結構模式圖J鏈J鏈與分泌片IgG——血清中含量最高，半衰期長，抗感染免疫主力IgM——初次免疫應答最早產(chǎn)生的免疫球蛋白，在抗感染免疫早期發(fā)揮重要作用IgA——主要以分泌形式存在，粘膜局部免疫發(fā)揮作用IgE——血清含量很少，與嗜堿性粒細胞或肥大細胞高親和力結合，介導Ⅰ型超敏反應，在抗寄生蟲免疫中發(fā)揮重要作用多克隆抗體——將抗原物質(zhì)經(jīng)不同途徑注入動物體內(nèi)，經(jīng)數(shù)次免疫后，采集動物血液，分離出血清，由此獲得的抗血清即為多克隆抗體。單克隆抗體——由一個B細胞分化增殖的子代細胞產(chǎn)生的針對單一抗原決定簇的抗體。在機體抗感染免疫早期，發(fā)揮最主要作用的抗體是A、IgAB、IgDC、IgED、IgGE、IgM參與凝集試驗的抗體主要是A、IgA和IgMB、IgA和IgGC、IgG和IgMD、IgG和IgEE、IgM和IgE在抗寄生蟲感染中起重要作用的抗體是A.IgGB.IgMC.IgAD.IgDE.IgE體液免疫初次應答特點不包括A.具有潛伏期B.抗體維持時間短C.抗體效價低D.IgM最早產(chǎn)生E.IgG最早產(chǎn)生第三節(jié)免疫系統(tǒng)免疫器官免疫細胞免疫分子免疫系統(tǒng)中樞免疫器官外周免疫器官黏膜相關淋巴組織/黏膜免疫系統(tǒng)免疫器官中樞免疫器官免疫細胞發(fā)生和發(fā)育成熟的器官骨髓、胸腺、禽類的法氏囊骨髓——動物體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。淋巴干細胞經(jīng)血流遷入胸腺后，分化發(fā)育成為成熟的T淋巴細胞。胸腺頸葉胸腺中間葉胸腺胸葉法氏囊是鳥類特有的結構，位于泄殖腔后上方，囊壁充滿淋巴組織。法氏囊是禽類的中樞免疫器官，是B淋巴細胞發(fā)育成熟的場所。外周免疫器官免疫應答的發(fā)生部位脾臟和淋巴結脾臟——動物體中最大的淋巴器官，是血循環(huán)中重要的濾過器，能清除血液中的異物、病菌以及衰老死亡的細胞，特別是紅細胞和血小板。牛的脾臟淋巴節(jié)——遍布于淋巴循環(huán)系統(tǒng)的各個部位?？梢赃^濾和清除異物，同時也是免疫應答的發(fā)生場所。哈德爾氏腺——禽類眼窩內(nèi)的腺體之一，又稱瞬膜腺。在抗原刺激下，產(chǎn)生免疫應答，分泌特異性抗體。對禽呼吸道免疫很重要。黏膜相關淋巴組織黏膜相關淋巴組織/黏膜免疫系統(tǒng)分布于全身各黏膜附近，無包膜的彌散樣淋巴組織。具有功能獨特的細胞。功能相對獨立。免疫細胞骨髓是所有血細胞的來源化驗血液時報告中的三項——紅細胞、血小板、白細胞具體來說紅細胞血小板中性粒細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞肥大細胞漿細胞T細胞單核細胞巨噬細胞髓系樹突狀細胞淋巴系樹突狀細胞B細胞介導特異性免疫應答的細胞T淋巴細胞——胸腺依賴性淋巴細胞，在胸腺中發(fā)育成熟。在血液、淋巴液及外周免疫器官中不斷循環(huán)，參與細胞免疫應答。重要的表面標志包括TCR、CD3、CD4、CD8等。B淋巴細胞——骨髓依賴性淋巴細胞或囊依賴性淋巴細胞。在哺乳動物骨髓或禽類法氏囊中發(fā)育成熟。大量分泌抗體，介導體液免疫應答。重要的表面標志包括BCR、Fc受體、補體受體等。K細胞和NK細胞無T和B細胞表面標志，具有非特異性殺傷功能。形態(tài)學上難以與淋巴細胞相區(qū)分。K細胞——主要粗在于腹腔滲出液、血液和脾臟。NK細胞——主要存在于外周血和脾臟。兩種細胞均可通過抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用（ADCC作用）殺傷靶細胞，也可通過表面殺傷抑制受體（KIR）或殺傷活化受體控制（KAR），非特異性殺傷靶細胞。輔助性細胞一類在免疫應答過程中將抗原提呈給抗原特異性淋巴細胞的免疫細胞，又稱為抗原提呈細胞（APC）。表面組成型表達MHCII類分子?？乖岢始毎麊魏送淌杉毎ㄍ淌蓺?、抗原加工提呈、

分泌生物活性物質(zhì)）樹突狀細胞（最強大的抗原提呈細胞）B細胞免疫分子免疫細胞分泌或表達的多肽、蛋白質(zhì)執(zhí)行免疫識別、免疫調(diào)節(jié)、免疫效應細胞因子、補體、急性期蛋白以及免疫球蛋白等。補體——存在于正常動物和人血清中的一組不耐熱具有酶活性的球蛋白。熱不穩(wěn)定。（56℃，30min完全滅活）激活途徑分為經(jīng)典途徑、旁路途徑以及MBL途徑。激活后介導細胞溶解、細胞粘附、調(diào)理作用、免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應、病毒中和以及免疫復合物溶解等效應。細胞因子——由免疫細胞和某些非免疫細胞合成和分泌的一類高活性多功能蛋白質(zhì)多肽分子，介導和調(diào)節(jié)免疫應答及炎癥反應，刺激造血功能，并參與組織修復等。細胞因子分類白細胞介素（IL）：白細胞間起免疫調(diào)節(jié)作用。干擾素(IFN)：干擾病毒復制，免疫調(diào)節(jié)，可分為I型干擾素（IFN–α、IFN–β，病毒感染的白細胞）和II型干擾素IFN-γ（抗原激活的T細胞）。腫瘤壞死因子（TNF）：促炎癥因子和免疫調(diào)節(jié)分子。TNF-α，單核巨噬細胞，TNF–β，活化的T細胞集落刺激因子：促進造血干細胞增殖、分化、成熟。細胞因子特性理化特性：低分子量分泌型糖蛋白，多數(shù)以單體形式存在。分泌特性：多細胞來源、短暫的自限性分泌、自分泌與旁分泌特點。細胞因子生物學作用特性激素樣活性作用：低量高效。通過受體發(fā)揮作用：需與靶細胞表面受體結合。多效性：一種細胞因子作用多種靶細胞，表現(xiàn)不同效應。冗余性：多種細胞因子作用同種靶細胞，介導相似的效應。協(xié)同性：兩種細胞因子對細胞活性的聯(lián)合作用大于單個細胞因子效應的累加。頡抗性：一種細胞因子的效應抑制或抵消其他細胞因子的效應。細胞因子的網(wǎng)絡性細胞因子之間可相互誘生。細胞因子可調(diào)節(jié)受體的表達——多數(shù)細胞因子對自身受體的表達呈負調(diào)節(jié)，對其他細胞因子受體表達呈正調(diào)節(jié)。細胞因子間生物學活性相互影響。細胞因子的主要生物學功能參與免疫應答與免疫調(diào)節(jié)。刺激造血功能。細胞因子參與神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡信號傳遞。屬于中樞免疫器官的是A、脾臟B、胸腺C、淋巴結D、扁桃體E、哈德氏腺T細胞和B細胞發(fā)生免疫應答的場所是A.骨髓 B.外周免疫器官C.中樞免疫器官 D.胸腺E.血液遞呈初次接觸抗原最有效的細胞是A、巨噬細胞B、B淋巴細胞C、樹突狀細胞D、胸腺上皮細胞E、血管內(nèi)皮細胞TNF-α主要由（）產(chǎn)生A.樹突狀細胞B.單核-巨噬細胞C.B細胞 D.紅細胞E.K細胞介導體液免疫應答的免疫分子是能夠作用于正常細胞使之產(chǎn)生抗病毒蛋白的免疫分子是由細胞毒性T細胞釋放，能夠溶解靶細胞的免疫分子是具有酶原活性，活化后可清除免疫復合物的免疫分子是A、抗體B、補體C、抗菌肽D、穿孔素E、干擾素動物機體抗病毒感染免疫中，在消化道、呼吸道黏膜免疫中起主要作用的免疫分子是動物機體抗病毒感染免疫中，在特異性免疫階段具有中和病毒和調(diào)理作用的免疫分子是動物機體抗病毒感染免疫中，在病毒感染初期起主要的非特異性抗病毒作用的免疫分子是A、IgGB、干擾素C、趨化因子D、白介素-2E、分泌型IgA第四節(jié)免疫應答什么是免疫應答？動物機體對進入體內(nèi)的病原微生物和一切抗原物質(zhì)所產(chǎn)生的復雜的生物學過程，最終清除病原微生物和外來抗原物質(zhì)，并建立對病原微生物的特異性抵抗力。一、免疫應答的概念先天性免疫應答獲得性免疫應答相互依賴、相互促進、不可分割本部分內(nèi)容重點介紹獲得性免疫應答二、免疫應答的類型產(chǎn)生的部位動物機體的外周免疫器官及淋巴組織是免疫應答產(chǎn)生的部位，其中脾臟和淋巴節(jié)是免疫應答的主要場所。三、獲得性免疫應答免疫應答的基本過程致敏階段反應階段效應階段致敏階段——抗原提呈抗原提呈由抗原提呈細胞完成。表面組成型表達MHCII類分子的細胞為專職抗原提呈細胞，包括巨噬細胞、樹突狀細胞和B淋巴細胞。受刺激后表達MHCII類分子的細胞為非專職抗原提呈細胞，包括血管內(nèi)皮細胞、胰腺β細胞以及胸腺上皮細胞等。另外，所有有核細胞均表達MHCI類分子也可提呈抗原。提呈外源性抗原給CD4+T淋巴細胞提呈內(nèi)源性抗原給CD8+T淋巴細胞外源性抗原和內(nèi)源性抗原。外源性抗原和內(nèi)源性抗原加工與提呈。T細胞對抗原的識別T、B淋巴細胞對抗原的識別B細胞對抗原的識別B細胞可識別胸腺依賴性抗原（TD抗原）和非胸腺依賴性抗原（TI抗原）。TD抗原——抗原激活B細胞過程中需要Th細胞輔助。TI抗原——抗原激活B細胞過程中不需要Th細胞輔助。TD抗原激活B細胞TI1——高濃度時與絲裂原受體結合，活化大多數(shù)B淋巴細胞，活化B細胞與BCR特異性無關。TI2——具有適當間隔、高度重復的決定簇，呈線性排列，能夠使特異性B細胞的BCR交聯(lián)，活化B細胞反應階段——T、B淋巴細胞活化、增殖與分化T細胞的活化、增殖與分化Th細胞活化后表達高親和力IL-2受體，同時高效分泌表達一系列細胞因子。Tc細胞活化后分化為CTL。B細胞的活化、增殖效應階段——活化后的T、B淋巴細胞執(zhí)行免疫效應CTL、TDTH、B細胞分泌的抗體以及活化T、B淋巴細胞分泌的各種細胞因子發(fā)揮細胞免疫和體液免疫效應，這些效應細胞和效應分子共同作用清除抗原物質(zhì)。細胞免疫細胞免疫效應主要表現(xiàn)在殺傷被感染細胞和腫瘤細胞，也可引起機體的免疫損傷。效應性T細胞CTL：識別被感染、腫瘤細胞等提呈的內(nèi)源性抗原，通過釋放穿孔素、顆粒酶溶解靶細胞，也可通過釋放腫瘤壞死因子或通過膜表面Fas分子誘導靶細胞凋亡。TDTH：釋放多種可溶性細胞因子，引起局部單核細胞浸潤為主的炎癥反應。體液免疫體液免疫效應是由B細胞分化成漿細胞后分泌的抗體介導的，在清除細胞外病原體方面非常有效?？贵w產(chǎn)生的一般規(guī)律潛伏期較長最早產(chǎn)生IgM抗體總量低持續(xù)期短潛伏期顯著縮短抗體含量高，持續(xù)期長抗體大部分為IgG，IgM少抗體的免疫學功能第五節(jié)超敏/變態(tài)反應概念免疫系統(tǒng)對再次進入機體的抗原（變應原）做出過于強烈或不適當?shù)姆磻?，而導致組織器官損傷。過敏反應型（I型）變態(tài)反應細胞毒型（II型）變態(tài)反應免疫復合物型（III型）變態(tài)反應遲發(fā)型（IV）變態(tài)反應I型超敏反應過敏原IgE肥大細胞和嗜堿性粒細胞組胺、5-羥色胺、白三烯、前列腺素等。毛細血管擴張、通透性增加、皮膚黏膜水腫、血壓下降、呼吸道及消化道平滑肌痙攣。臨床表現(xiàn)呼吸困難、腹瀉、腹痛、全身性休克。常見青霉素過敏、花粉過敏等。獸醫(yī)臨床上，疫苗、蠕蟲感染會引起超敏反應。II型超敏反應致敏原抗體（IgM和IgG）補體補體激活，溶解細胞。常見輸血反應。獸醫(yī)臨床上，新生幼畜溶血性貧血。III型超敏反應致敏原抗體（IgM和IgG）補體吞噬細胞常見血清病、Arthus反應、葡萄球菌性心內(nèi)膜炎。IV型超敏反應致敏原TDTH免疫細胞常見結合菌素變態(tài)反應、接觸性變態(tài)反應。輸血反應屬于典型的A、移植物排斥反應B、遲發(fā)型變態(tài)反應C、細胞毒型變態(tài)反應D、過敏反應型變態(tài)反應E、免疫復合物型變態(tài)反應屬于典型的細胞毒型（II型）變態(tài)反應是A、血清病B、青霉素過敏反應C、結核菌素肉芽腫D、新生畜溶血性貧血E、自身免疫復合物病124. 結核菌素變態(tài)反應屬于典型的（)A.移植物排斥反應B.遲發(fā)型變態(tài)反應C.細胞毒型變態(tài)反應D.過敏反應型變態(tài)反應E.免疫復合物型變態(tài)反應抗感染免疫是動物機體抵抗病原體感染的能力。涉及先天性免疫和獲得性免疫。先天性免疫——第一道防線動物體內(nèi)的非特異性免疫因素介導的對所有病原微生物和外來抗原物質(zhì)的免疫反應。是機體在種系發(fā)育和進化過程中逐漸建立起來的一系列天然防御功能，智能識別自身和非自身，對異物無特異性區(qū)別作用。物理性屏障皮膚角化層和黏膜表面的上皮細胞。分泌物皮膚和黏膜表面分泌物（唾液、淚液、汗液、腸液），這些分泌物中含有抗微生物物質(zhì)（如酶類、防御素以及脂肪酸等）。微生物代謝產(chǎn)物及營養(yǎng)競爭定殖在皮膚和黏膜表面的非致病性細菌，可以產(chǎn)生一些對病原微生物具有毒性的代謝產(chǎn)物，同時也可以通過占位效應和競爭營養(yǎng)成分抑制病原性微生物的定殖。PS：另外還包括血腦屏障、血胎屏障等。可溶性分子與膜結合受體補體——通過旁路途徑和MBL途徑激活溶菌酶乙型溶素干擾素抗菌肽C-反應蛋白模式識別受體炎癥反應紅：炎癥初期由于動脈性充血，局部氧合血紅蛋白增多，故呈鮮紅色。腫：主要是由于滲出物，特別是炎性水腫所致。慢性炎癥時，組織和細胞的增生也可引起局部腫脹。熱：熱是由于動脈性充血及代謝增強所致，部分細胞因子也可引起發(fā)熱。痛：局部炎癥病灶內(nèi)鉀離子、氫離子的積聚，尤其是炎癥介質(zhì)諸如前列腺素、5-羥色胺、緩激肽等的刺激是引起疼痛的主要原因。免疫細胞的參與中性粒細胞單核巨噬細胞樹突狀細胞自然殺傷細胞獲得性免疫——中堅力量三大特點：特異性；具有一定免疫期；具有免疫記憶。1、抗胞外細菌感染抗毒素性免疫溶菌殺菌作用調(diào)理吞噬作用一、抗細菌、真菌感染主要依靠抗體2、抗胞內(nèi)細菌感染巨噬細胞Tc細胞NK細胞Th細胞3、抗真菌感染吞噬細胞NK細胞細胞因子二、抗病毒感染病毒感染初期通過干擾素等細胞因子和NK細胞執(zhí)行抗病毒作用。獲得性免疫應答啟動后，IgG成為抗病毒主要抗體，通過中和作用、調(diào)理作用和ADCC作用清除病毒及被感染細胞；CTL成為細胞免疫的中堅，擔負消滅胞內(nèi)病毒的作用，在病毒性疾病康復過程中發(fā)揮重要作用。三、抗寄生蟲免疫1、抗原蟲感染單細胞動物，免疫反應與細菌類似。1、抗蠕蟲感染IgE嗜酸性粒細胞肥大細胞對于成蟲，通過I型超敏反應，促排對于幼蟲，利用單核吞噬細胞或CTL來殺傷。第七節(jié)免疫防治主動免疫——動物機體免疫系統(tǒng)對自然感染的并與微生物或疫苗接種產(chǎn)生免疫應答，獲得對某種病原微生物特異性抵抗力。天然主動免疫——感染。人工主動免疫——疫苗接種。被動免疫——動物機體免從母體獲得特異性抗體或經(jīng)人工給予免疫血清，從而獲得對某種病原微生物特異性抵抗力。天然被動免疫——母源抗體（胎盤、初乳、卵黃）。人工被動免疫——抗血清或卵黃抗體接種。疫苗

Vaccine影響疫苗免疫效果的因素遺傳因素營養(yǎng)狀況環(huán)境因素疫苗質(zhì)量病原的血清型與變異疾病的影響母源抗體病原微生物之間的干擾作用可用于人工主動免疫的免疫原是A、佐劑B、類毒素C、內(nèi)毒素D、外毒素E、抗毒素規(guī)?；u場禽流感滅活疫苗免疫首選途徑是A、滴鼻B、點眼C、飲水D、刺種E、注射新生動物通過母源抗體而獲得對某種病原的免疫力屬于A、先天性免疫B、天然被動免疫C、天然主動免疫D、人工被動免疫E、人工主動免疫從細菌或病毒中提取蛋白成分制備的疫苗屬于A、重組疫苗B、弱毒活疫苗C、基因缺失苗D、亞單位疫苗E、合成肽疫苗傳染病病愈后獲得的對這種疾病的抵抗力為A.人工主動免疫B.人工被動免疫C.天然主動免疫 D.天然被動免疫E.非特異性免疫126. 常用于制備滅活疫苗的化學藥物是A.乙醇B.甲醛C.乙醚D.3%鹽酸 E.50%甘油生理鹽水第八節(jié)免疫學技術利用免疫反應的特異性原理，建立各種檢測與分析技術，以及建立這些技術的各種制備方法。免疫學技術免疫檢測技術/免疫血清學技術細胞免疫技術免疫制備技術主講教師：鄭先哲免疫血清學技術免疫血清學技術凝聚性反應標記抗體技術凝集試驗沉淀試驗補體參與的反應中和反應免疫印跡技術免疫熒光抗體技術免疫酶標記技術放射免疫測定化學發(fā)光標記技術抗原與相應抗體結合形成復合物，在有電解質(zhì)存在下，復合物相互凝聚形成肉眼可見的凝聚小塊或沉淀物，根據(jù)是否產(chǎn)生凝集現(xiàn)象來判斷相應抗體或抗原，稱為凝聚性試驗。一、凝聚性反應1、凝集試驗細菌、紅細胞等顆粒性抗原，或吸附在紅細胞、乳膠顆粒性載體表面的可溶性抗原，與相應抗體結合，在有適當電解質(zhì)存在下，經(jīng)過一定時間，形成肉眼可見的凝集團塊，稱為凝集試驗。一、凝聚性反應凝集試驗直接凝集試驗間接凝集試驗協(xié)同凝集試驗一、凝聚性反應直接凝集試驗顆粒性抗原與相應抗體直接結合并出現(xiàn)凝集現(xiàn)象的試驗成為直接凝集現(xiàn)象。玻片法可做定性試驗；試管法可做定量試驗。間接凝集試驗將可溶性抗原（或抗體）先吸附于一種與免疫無關的、一定大小的不溶性顆粒（統(tǒng)稱為載體顆粒）的表面，然后與相應抗體（或抗原）作用，在有電解質(zhì)存在的適宜條件下，所出現(xiàn)的特異性凝集反應稱為間接凝集反應。敏感性由于直接凝集試驗，但特異性較差。協(xié)同凝集試驗葡萄球菌A蛋白（SPA）能與多種哺乳動物IgG分子的Fc片段結合。SPA與IgG結合后，后者的Fab片段暴露于外，并保持抗體活性。覆蓋有特異性抗體的金黃色葡萄球菌與相應抗原結合時，就可產(chǎn)生凝集反應，該方法稱為協(xié)同凝集試驗。2、沉淀試驗可溶性抗原（如細菌外毒素、內(nèi)毒素、菌體裂解液、病毒的可溶性抗原、血清、組織浸出液等）與相應的抗體結合，在適量電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見的白色沉淀，稱為沉淀試驗。一、凝聚性反應沉淀試驗環(huán)狀沉淀試驗瓊脂凝膠擴散試驗免疫電泳技術一、凝聚性反應雙向雙擴散雙向單擴散免疫電泳對流免疫電泳火箭免疫電泳環(huán)狀沉淀試驗在小口徑試管內(nèi)先加入已知抗血清，然后緩慢沿管壁加入待檢抗原于血清表面，使之成為分界清晰的兩層，作用數(shù)分鐘后，觀察兩層液面交界處是否出現(xiàn)白色環(huán)狀沉淀，從而判定相應的抗原或抗體。瓊脂凝膠擴散試驗利用可溶性抗原和抗體在半固體凝膠中進行反應，當抗原抗體分子相遇，并達到適當比例時，就會相互結合、聚集，出現(xiàn)白色沉淀線，從而判定相應的抗體和抗原。瓊脂凝膠擴散試驗雙向雙擴散：抗原抗體在瓊脂凝膠內(nèi)相向擴散，在兩孔間比例最合適的位置上出現(xiàn)沉淀帶，如抗原抗體的濃度基本平衡時，此沉淀帶的位置主要決定于兩者的擴散系數(shù)。但如抗原過多，則沉淀帶向抗體孔增厚或偏移，反之亦然。瓊脂凝膠擴散試驗雙向單擴散：在含有特異抗體的瓊脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，當抗原向周圍擴散后與瓊脂中抗體相結合，即形成白色沉淀環(huán)，其直徑或面積與抗原濃度呈正相關。同時用標準抗原制成標準曲線，即可用以定量檢測未知標本的抗原濃度。免疫電泳技術免疫電泳技術是凝膠擴散試驗與電泳技術相結合的免疫檢測技術，在抗原抗體凝膠擴散的同時，加入電泳的電場作用，使抗體或抗原在凝膠中的擴散移動速度加快，縮短了試驗時間；同時限制了擴散移動的方向，使集中朝電泳的方向擴散移動，增加了試驗的敏感性。免疫電泳技術免疫電泳：先將抗原加到瓊脂板的小孔內(nèi)進行電泳，然后在瓊脂板中央挖一橫槽，加入已知相應的免疫血清，兩者經(jīng)一定時間相互擴散后，就會在抗原、抗體比例最適處形成沉淀弧。根據(jù)沉淀弧的數(shù)量、位置和外形，即可分析樣品中所含成分。免疫電泳技術對流免疫電泳：在瓊脂板上,使抗原和抗體在電場作用下定向移動,當抗原抗體相遇且二者濃度比例合適時,即可出現(xiàn)白色沉淀線。免疫電泳技術火箭免疫電泳：電泳時，含于瓊脂凝膠中的抗體不發(fā)生移動，而在電場的作用下促使樣品中的抗原向正極泳動。當抗原與抗體分子達到適當比例時，形成一個形狀如火箭的不溶性免疫復合物沉淀峰，峰的高度與樣品中的抗原濃度呈正相關。病毒可刺激機體產(chǎn)生中和抗體，中和抗體與病毒結合后使病毒失去吸附細胞的能力，從而喪失感染力，病毒與其特異性中和抗體相遇之后發(fā)生的作用，類似于化學反應中的相應酸堿相遇之后發(fā)生的中和反應，所以這種作用稱為中合作用。二、中和反應中和試驗是以測定病毒的感染力為基礎，以比較病毒受免疫血清中和后的殘存感染力。中和試驗常用的有兩種方法：一種是固定病毒量與等量系列倍比稀釋的血清混合，另一種是固定血清用量與等量系列對數(shù)稀釋(即十倍遞次稀釋)的病毒混合。二、中和反應利用補體能與抗原-抗體復合物結合的性質(zhì)，建立檢測抗原或抗體的免疫學試驗，即所謂補體參與的檢測技術。一類是補體與細胞的免疫復合物結合后，直接引起溶細胞的可見反應；另一類是補體與抗原-抗體復合物結合后不引起可見反應，但可用指示系統(tǒng)來測定補體是否已被結合，從而間接地檢測反應系統(tǒng)是否存在抗原-抗體復合物。三、補體參與的反應補體參與的檢測技術補體結合試驗免疫黏附血凝試驗被動紅細胞溶血試驗三、補體參與的反應補體依賴性細胞毒試驗單向輻射紅細胞溶解試驗補體結合試驗利用抗原抗體復合物同補體結合，把含有已知濃度的補體反應液中的補體消耗掉使?jié)舛葴p低的現(xiàn)象，以檢出抗原或抗體的試驗，為高敏度檢出方法之一，特別是根據(jù)抗原物質(zhì)的特性，抗原抗體反應不能用沉淀反應或凝集反應觀察時也可以利用此法。該試驗包括兩個反應系統(tǒng)，一為檢測系統(tǒng)，即已知抗原（或抗體）、被檢抗體（或抗原）以及補體；另一系統(tǒng)為指示系統(tǒng)，包括綿羊紅細胞溶血素和補體。被動紅細胞溶解試驗將已知抗原吸附到紅細胞上，在有相應抗體及補體存在時，出現(xiàn)紅細胞溶解，該方法稱為被動紅細胞溶解試驗。該試驗比間接血凝試驗更敏感。標記抗體技術是將已知抗體標記上易顯示的物質(zhì)，通過檢測標記物來反應抗原抗體反應的情況，從而間接地測出被檢抗原的存在與否或量的多少。免疫標記技術的優(yōu)點：特異性強、敏感度高、檢測速度快、能定性和定量甚至定位、且易于觀察。四、標記抗體技術標記抗體技術免疫熒光抗體技術免疫酶標記技術放射免疫測定化學發(fā)光標記技術四、標記抗體技術熒光抗體技術、放射免疫測定法和酶免疫測定法，通常被稱為三大標記技術。金免疫技術常用的免疫標記物質(zhì)類別標記物用途熒光素FITC、RB200、TRITC鑭系元素螯合物免疫組化、免疫分析測定放射性核素3H、14C、32P、57Gr、125I、131I免疫分析測定酶HRP、AP免疫組化、免疫分析測定化學發(fā)光物Luminol、lucigenin免疫分析測定金屬顆粒膠體金、鐵蛋白免疫組化、免疫分析測定四、標記抗體技術免疫熒光抗體技術熒光抗體技術的基本原理是，將合適的熒光素，以化學方法與特異抗體共價鍵牢固結合，此結合熒光的抗體，不僅保留原有的特異反應，而且顯示熒光。除可用熒光顯微鏡對結果進行觀察，還可將熒光抗體技術與激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀等設備配合使用。四、標記抗體技術免疫熒光抗體技術直接法：用特異熒光抗體直接滴加于待檢抗原標本上，由于標記抗體與抗原發(fā)生特異結合，使之呈熒光，根據(jù)熒光分布和形態(tài)確定抗原性和部位。炭疽桿菌24h培養(yǎng)物直接熒光抗體檢測免疫熒光抗體技術間接法：間接法可用于檢測抗原和抗體?？乖驑吮炯由峡贵w或標本（第一抗體）混合后，加熒光抗體（第二抗體）。在熒光顯微鏡下檢測熒光分布。本法靈敏度高，可對多種抗原進行試驗。免疫熒光抗體技術雙標記法：采用不同熒光標記物分別標記不同的抗體，進行同一標本的熒光染色，若有相應的兩種抗原存在便同時見到兩種或多種熒光色澤。免疫熒光抗體技術流式細胞術：是一種在功能水平上對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段，它可以高速分析上萬個細胞，并能同時從一個細胞中測得多個參數(shù)，與傳統(tǒng)的熒光鏡檢查相比，具有速度快、精度高、準確性好等優(yōu)點。免疫酶標記技術酶標記抗體技術是根據(jù)抗原抗體反應的特異性和酶催化反應的高敏感性而建立起來的檢測技術。四、標記抗體技術免疫酶標記技術酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)：將