第四章 抗體制藥ar

第四章抗體制藥抗體？1937年Tiselius用電泳法將血清蛋白分離為白蛋白、α（甲種球蛋白）、β（乙種球蛋白）、γ球蛋白（丙種球蛋白），并證明抗體活性主要存在于γ球蛋白組分。在相當(dāng)一段時(shí)間內(nèi)丙種球蛋白稱為抗體的同義詞。第一節(jié)概述抗體？

抗體是指能與相應(yīng)特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白（Ig）。它是機(jī)體免疫系統(tǒng)受抗原物質(zhì)刺激后，B淋巴細(xì)胞被活化、增值和分化為漿細(xì)胞合成和分泌的球蛋白。第一節(jié)概述抗原決定簇？

是指抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán)，又稱表團(tuán)，通常由5-7個(gè)氨基酸殘基或5-7個(gè)多糖殘基/核苷酸組成?？乖瓫Q定蔟是T細(xì)胞受體、B細(xì)胞受體和抗體識(shí)別結(jié)合的基本單位，他們之間的相互作用具有高度特異性。如：菌體抗原（O抗原）、鞭毛抗原（H抗原）等。第一節(jié)概述多克隆抗體？

病原微生物含有多種抗原決定簇的抗原物質(zhì)，因此這些抗體制劑也是多種抗體的混合物，故稱多克隆抗體，會(huì)給治療和診斷帶來誤差。第一節(jié)概述單克隆抗體？1975年Kohler和Milstein首先利用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體。他們將抗體產(chǎn)生細(xì)胞于具有無限增殖能力的骨髓瘤細(xì)胞相融合，通過有限稀釋法及克隆化使雜交瘤細(xì)胞成為純一的單克隆細(xì)胞系，此細(xì)胞系能產(chǎn)生結(jié)構(gòu)和特異性完全相同的高純度抗體。第一節(jié)概述單克隆抗體？由一種抗原決定簇刺激機(jī)體，由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原所產(chǎn)生的抗體。單克隆抗體具有高度特異性、均一性、來源穩(wěn)定、可大量生產(chǎn)等特點(diǎn)。第一節(jié)概述以單克隆抗體作為載體的藥物可對(duì)腫瘤進(jìn)行定向治療。但是，臨床應(yīng)用的實(shí)踐證明，免疫導(dǎo)向法并沒有成功，其障礙有：①單克隆抗體均是鼠源性抗體，應(yīng)用于人體內(nèi)可產(chǎn)生人鼠抗體，加速了排斥反應(yīng)，在人體內(nèi)半衰期只有5~6h，難以維持有效藥物作用靶組織時(shí)間。②完整的抗體分子，即Ig的相對(duì)分子質(zhì)量過大，難以穿透實(shí)體腫瘤組織，達(dá)不到有效的治療濃度。第一節(jié)概述基于上述原因，需從兩個(gè)方面對(duì)單克隆抗體加以改造：①降低單克隆抗體的免疫原性。②降低單克隆抗體的相對(duì)分子質(zhì)量。利用基因工程技術(shù)制備出基因工程抗體，即可達(dá)到上述目的。第一節(jié)概述單克模隆抗穴體藥精的現(xiàn)諷狀抗體蜘藥的程銷售蠢額97年~9忘9年由4.朵68億美副元增付長(zhǎng)到13億美秀元03年抗熟體類繡藥物課總銷暑售額尺將會(huì)洲達(dá)到50億美損元25駱0多種樓抗體做類藥止物在勺臨床候試驗(yàn)希中1/影3已進(jìn)缸入三侵期臨階床1/類4已通概過臨請(qǐng)床三再期試占驗(yàn)美國(guó)茄市場(chǎng)巷上有繭種治獎(jiǎng)療用深的抗暫體藥爆物第一雅節(jié)碰概需述單克刑隆抗睛體藥匠的現(xiàn)顏狀19涌94年，Ce眨nt酸oc普or的Re碑op探ro一種角血小炊板表論面受勇體的誤單克禁隆抗兔體片蛋段被助批準(zhǔn)幣用于傭臨床談來預(yù)潛防治我療血雷栓形室成19宗97年批鳥準(zhǔn)上鞠市的12種生故物新銳藥中拆有2種是之抗體貧藥19具98年上輩市的12種新貪藥中攤有6種是創(chuàng)抗體鐘藥20旱00年又蔽批準(zhǔn)枯了My仇lo地ta拋rg用于饒治療至急性奏髓細(xì)產(chǎn)胞白輔血病譯的抗CD索33單克互隆抗遲體20愉01年已梯批準(zhǔn)另及預(yù)索期會(huì)斜被批架準(zhǔn)的10多種禮生物趴新藥弓中，踩也有5種是開屬于擊抗體坡類藥第一細(xì)節(jié)業(yè)概殼述抗體垂藥物歡市場(chǎng)職穩(wěn)步傲增長(zhǎng)第一哲節(jié)肉概除述第一勒節(jié)巡壽概恩述全球環(huán)有超拿過20坡0家上癥市或句未上鴉市公仁司正柜在研執(zhí)發(fā)用于臨假床診怨斷和釋治療班的單將克隆盛抗體正在親進(jìn)行株臨床忌試驗(yàn)催的抗僅體公養(yǎng)司（38家）第一閥節(jié)影概辰述當(dāng)前怒美國(guó)測(cè)治療桑性抗魔體市服場(chǎng)第一坑節(jié)作概腫述當(dāng)前暮美國(guó)放治療桂性抗板體市閃場(chǎng)第一喘節(jié)拜概傘述中國(guó)潤(rùn)抗體導(dǎo)研究篇現(xiàn)狀第一孕節(jié)播概檢述第二羊節(jié)惑單克狗隆抗額體及郵其制兔備一、堡抗原玩與動(dòng)浮物免認(rèn)疫二、她細(xì)胞腸融合役與雜蠶交瘤尤細(xì)胞萄的選上擇三、拼篩選嗓陽性陡克隆溫與克斥隆化四、錄雜交愧瘤細(xì)爭(zhēng)胞抗汗體形耐狀的旬鑒定五、軌單克銹隆抗賠體的帝大量駱制備六、戒單克紋隆抗需體的促純化第二季節(jié)案單克滾隆抗左體及揚(yáng)其制嚴(yán)備設(shè)計(jì)剩方案柜：一個(gè)B淋巴蹦細(xì)胞--屯--只分傘泌一牽種特昆異性害抗體小鼠略骨髓享瘤細(xì)剝胞--典--能無倘限增象殖雜種沿細(xì)胞第二詞節(jié)稻單克緣瑞隆抗見體及淡其制映備第二射節(jié)壘單克摧隆抗尤體及虛其制危備㈠雜交免瘤技堂術(shù)產(chǎn)咽生的3個(gè)技禿術(shù)關(guān)床鍵1.獄B淋巴班細(xì)胞魯與骨丘髓瘤華細(xì)胞貧的特透性：B淋巴輸細(xì)胞典（B損ly東mp釀ho濕cy鉛te制s）：接受雄抗原瞇刺激餅后，擾能分姐泌針拍對(duì)該汁抗原趙的特告異性共抗體，妹在體時(shí)液免激疫中絞具有嗽重要撿功能尸。B淋巴油細(xì)胞譜本身裝是一矮種終紡末分?；?xì)裝胞，咐通常院不再進(jìn)行掙細(xì)胞冶分裂勺，存壁活一攔點(diǎn)時(shí)綿間后專便會(huì)撥死亡--香--淺-短命細(xì)胞第二文節(jié)臟單克僻隆抗緞體及睬其制況備骨髓話瘤細(xì)扯胞（my薦el額om至ace組ll羽s）：惡性輪增殖神的轉(zhuǎn)棵化細(xì)殺胞，真只要球營(yíng)養(yǎng)牢條件敘適合萌可永范遠(yuǎn)分裂才和存培活--倡--鹿-長(zhǎng)命且細(xì)胞。經(jīng)篩職選與羞馴化察，現(xiàn)棍已建煩立多錦種骨本髓瘤慎細(xì)胞--聲--肚-沒有抗異體分葡泌物。第二翅節(jié)界單克蒜隆抗鼻體及素其制脾備2.細(xì)胞用融合助技術(shù)舒：第二量節(jié)鎖單克痛隆抗擋體及壇其制穩(wěn)備3.雜交尤瘤細(xì)保胞的羨篩選拒：第二條節(jié)跟單克王隆抗雅體及脾其制峰備第二畜節(jié)騰單克鉛隆抗協(xié)體及替其制姓備第二糾節(jié)挨單克掠隆抗鎖體及衛(wèi)其制催備第二明節(jié)笨單克明隆抗疼體及田其制姻備第二臣節(jié)催單克澤隆抗素體及羞其制匙備一、外抗原趟與動(dòng)債物免恒疫第二型節(jié)編單克遼隆抗率體及墊其制巡壽備第二惹節(jié)恩單克雀隆抗駱體及經(jīng)其制焰?zhèn)?.抗原動(dòng)物員體內(nèi)抗體特異乞性差腸、純峽度低被產(chǎn)量吩低，述反應(yīng)藍(lán)不夠勤靈敏2.抗原動(dòng)物內(nèi)體內(nèi)抗體抗原場(chǎng)不純抗體巖不純篩選虛單一嚴(yán)效應(yīng)B細(xì)胞不能熱增殖訊，產(chǎn)搬生大復(fù)量抗冊(cè)體刺激效應(yīng)B刺激效應(yīng)B第二蓋節(jié)爪單克酷隆抗闊體及倡其制赤備動(dòng)物握免疫:特定目標(biāo)處抗原動(dòng)物脾臟擱中B淋巴孩細(xì)胞B淋巴你細(xì)胞大量市繁殖免疫刺激能分窯泌針遷對(duì)于斤該抗修原的特異偽性抗鬧體目的穿：在細(xì)賴胞融犁合后唯獲得盡色可能勇多的雜分泌針質(zhì)對(duì)于效該目饅標(biāo)抗原篇的特神異性丟抗體的丟雜交要瘤細(xì)蛋胞第二駛節(jié)師單克盞隆抗舅體及箭其制冠備常用盒免疫轉(zhuǎn)方法勇：常規(guī)拐免疫形法“穩(wěn)耀妥；嶺優(yōu)勢(shì)野克隆敞”脾內(nèi)傲一次柿性免狹疫法“省攤時(shí)；紙省抗本原”短程黃免疫誘法“省旗時(shí)”體外枝免疫廉法“操顧作繁特瑣”免疫不途徑爸：皮下儲(chǔ)注射腹腔宜注射靜脈茅注射第二備節(jié)與單克晚隆抗翼體及桶其制縮慧備常規(guī)劑免疫礎(chǔ)法：第二糟節(jié)隊(duì)單克印隆抗瘦體及些其制煙備脾內(nèi)瓣免疫怕法：脾內(nèi)蓄免疫纖法即劣在麻張醉?xiàng)l荷件下蛋直接跑把0.尋1~勇0.蹲2ml的抗撓原注狹入脾求臟進(jìn)組行免修疫。恭脾內(nèi)文免疫陶法可金提高小臭鼠對(duì)掘抗原蜻的免鈴疫反連應(yīng)，雜節(jié)省節(jié)抗原南用量堆，細(xì)胞抗蝕原只瀉需105個(gè)左兆右，誦可溶飲性抗授原只蟲需10μg左右靈。第二沃節(jié)盤單克它隆抗敞體及慈其制階備體外售免疫壤法：體外唉免疫載法的遼優(yōu)點(diǎn)援很多穴，所蠅需抗照原量學(xué)少，停一般辛只需始幾微犯克，初免疫貌期短私，僅4~間5天，霸干擾因素指少，耗已成仁功的窩制備響出針休對(duì)多閣抗原氏的單舅克隆抗結(jié)體，罰但融愿合后男產(chǎn)生注的雜法交瘤枕細(xì)胞虧株不亂夠穩(wěn)定。第二澇節(jié)聲單克哥隆抗洗體及忙其制理備二、傘細(xì)胞支融合繡與雜缺交瘤丟細(xì)胞給的選舅擇細(xì)胞浮融合栽方法冊(cè)：病毒頭介導(dǎo)莫的細(xì)暮胞融且合PE狼G介導(dǎo)乓細(xì)胞脊融合電極德融合第二布節(jié)眉單克集隆抗盼體及各其制兼?zhèn)浼?xì)胞蓄懸液堵的制磚備與隨融合⑴脾細(xì)浙胞懸剩液的海制備撇：最后拆一次蛛免疫敞后第3天制備⑵骨髓豎瘤細(xì)逐胞懸竭液的分制備沿：于對(duì)新數(shù)生位長(zhǎng)期展制備⑶樂細(xì)胞早融合深：5%秘P饒EG（10親00沿~4胳00向0），pH捉8.捉0，38℃，1m疑in第二躍節(jié)脈單克慎隆抗閥體及傘其制奸備2.所H語AT培養(yǎng)撲基的摘篩選融合鳳后細(xì)與胞混綢合液HA視T培養(yǎng)會(huì)基HT培養(yǎng)相基正?；囵B(yǎng)撕基2艦we京ek乳s勇la么te晃r1晨we罰ek醬l款at季er第二閣節(jié)燙單克租隆抗摔體及泊其制南備三、舉篩選倡陽性貼克隆充與克粘隆化常用壤方法指：要求糕：簡(jiǎn)便扛、快離速、惜敏感艱；在短爬時(shí)間模能檢麻測(cè)大樹量樣陜品酶聯(lián)榜免疫鴨吸附柿法（en收zy肉me囑-l販in悉ke槐dim卸mu筋no藍(lán)so熟rb董en佛tas逆sa倍y，EL舅IS欄A）間接繩免疫黃熒光營(yíng)法（In麻di遇re貿(mào)ctim抹mu望no嗽fl末uo據(jù)re紛sc床en灣ce，IF臭A）放射賽免疫洲法（ra掘di請(qǐng)oi姓mm蘿un單oa剝ss扯ay，RI佩A）雙向拼擴(kuò)散露法第二撲節(jié)雷單克哨隆抗站體及買其制拔備酶聯(lián)斜免疫垮吸附惡法（EL車IS啞A）技術(shù)沉原理奧：第二滿節(jié)排單克進(jìn)隆抗灶體及雁其制定備四、家克隆抵化常用副克隆種化方隙法：有限竿稀釋芽法軟瓊萄脂平離板法顯微福操作掃法80個(gè)細(xì)/9棕6孔飼養(yǎng)密細(xì)胞采（fe菌ed壇er愚c霞el花ls）EL寶IS艘A法檢爹測(cè)單愈克隆蛙雜交互瘤細(xì)漫胞的姨培養(yǎng)巧上清睡，選出舊分泌哈特異手性抗談體的掙陽性臘孔，煎所分虹泌抗殲體即法為單克向隆抗栽體。第二仇節(jié)炸單克他隆抗被體及縣其制僅備單克些隆抗楊體（mo敢no鄉(xiāng)豐cl春on倆al濁a睬nt缺ib順od招y，MA虛b）由單谷一克涉隆的反雜交鞠瘤細(xì)拔胞分書泌的蜻抗體痕，只繞針對(duì)丹于一燦個(gè)抗原與決定姨簇--兆--單克涂隆抗炊體（mo顛no妹cl帽on靠al云a病nt始ib拌od尤y，MA軍b）單克還隆抗牲體優(yōu)鄭點(diǎn)：高度疼純一高度頸專一應(yīng)用籠：疾病蒜的論蹈斷和去治療（生屑物導(dǎo)槳彈）生物悲大分裂子的闖鑒定氣、定顏位和財(cái)分離月純化細(xì)胞薄器的拌鑒定鹿、定樓位和成分離特定記細(xì)胞步或病握毒的業(yè)鑒定根、定坊位很招分離第二親節(jié)昆單克芬隆抗窮體及貍其制濃備五、罰單克袖隆抗鞋體的浴大量礎(chǔ)制備常用萬的大撇規(guī)模夜培養(yǎng)偶方法里：動(dòng)物仆接種娛法轉(zhuǎn)瓶幼培養(yǎng)彼法細(xì)胞可培養(yǎng)躬罐法第二泄節(jié)摸單克