抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)

關(guān)于抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)第1頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三抗原抗體反應(yīng)的化學(xué)本質(zhì)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)抗原抗體的結(jié)合力反應(yīng)過程第2頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三第3頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三第4頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三抗原和抗體的結(jié)合是互補(bǔ)性的特異性結(jié)合不形成牢固的共價(jià)鍵，通過非共價(jià)鍵結(jié)合這種弱的結(jié)合力涉及幾種分子間的作用力

一、抗原抗體結(jié)合力一、抗原抗體結(jié)合力*1．靜電引力*2．范德華引力*3．氫鍵結(jié)合力*4．疏水作用力第5頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

靜電引力（庫倫引力）

（electrostaticforces）（coulombicforces）

概念：抗原和抗體分子帶有相反電荷的氨基和羧基基團(tuán)之間相互的引力。

引力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)間的距離的平方成反比；平均鍵能約為

20.9kJ/mo1。第6頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

范德華引力（VanderWaalsforces）概念：抗原和抗體相互接近時(shí)，由于分子的極化作用而出現(xiàn)的引力。

結(jié)合力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)的極化程度的乘積成正比、與它們之間距離的7次方成反比，鍵能約為4.2～12.5kJ／mol。

這種引力的能量小于靜電引力。

具有特異性。第7頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

概念：供氫體上的氫原子與受氫體原子間的引力。氫鍵結(jié)合力(hydregenbondforces)

供氫體：羧基、氨基和羥基

受氫體：羧基氧、羧基碳和肽鍵氧等

能的大小取決于氫鍵的方向：氫鍵具有高度的方向性。

氫鍵結(jié)合力與供氫體和受氫體之間距離的6次方成反比，鍵能約20.9kJ/mol。第8頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

疏水作用力（疏水鍵）

概念：兩個(gè)疏水基團(tuán)在水溶液中相互接觸時(shí)，由于對水分子排斥而趨向聚集的力。

抗原決定簇與抗體上的結(jié)合點(diǎn)靠近，互相間正、負(fù)極性消失，親水層立即失去。

此力在抗原抗體反應(yīng)中的結(jié)合是很重要的。

提供的作用力最大，約占總結(jié)合力的50％。第9頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

抗原抗體結(jié)合力示意圖抗原抗體氫鍵結(jié)合力

ONONHH靜電引力--++范得華力-++-+--+疏水作用力排斥的水第10頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

二、抗原抗體親和性（affinity）*親和性是抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與對應(yīng)的抗原決定簇之間的相適應(yīng)性而存在著的引力，這是抗原與抗體之間固有的結(jié)合力。*親和力（avidity)

是指反應(yīng)系統(tǒng)中復(fù)雜抗原與相應(yīng)抗體之間的結(jié)合能力。親和力與親和性、抗體的結(jié)合價(jià)和抗原的有效決定簇?cái)?shù)目相關(guān)。親和力越大，抗原抗體結(jié)合越牢固。第11頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

親和常數(shù)親和常數(shù)K=

K值大的抗體與抗原牢固結(jié)合，不易解離，說明該抗體有高親和力?？贵w與抗原結(jié)合是可逆的反應(yīng)，在平衡時(shí)其第12頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

血清學(xué)反應(yīng)條件下，抗原抗體均帶負(fù)電荷，使極化的水分子在其周圍形成水化層，成為親水膠體。

三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體

當(dāng)抗原與抗體結(jié)合后，表面電荷減少，水化層變??；而且由于抗原抗體復(fù)合物形成后，與水接觸的表面積減少，由親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。

在電解質(zhì)作用下，各疏水膠體之間靠攏，形成可見的抗原抗體復(fù)合物。第13頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體轉(zhuǎn)化NaCl可見反應(yīng)第14頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)*1.特異性*2.比例性*3.可逆性

第15頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

一、

特異性（specificity）*概念：抗原分子，只能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體結(jié)合而起反應(yīng)的專一性能。一、特異性*決定因素：由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性決定的。

抗體分子N端可變區(qū)形成3nm×1.5nm×0.7nm的槽溝，只有與其空間結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的抗原決定簇才能如楔狀嵌入。*交叉反應(yīng)(crossreaction)兩種不同的抗原物質(zhì)具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原決定簇，則可與彼此相應(yīng)的抗體反應(yīng)。第16頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

特異性示意圖第17頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三*最適比(optimalratio)或等價(jià)點(diǎn)(equivzlencepoint)

最迅速出現(xiàn)沉淀時(shí)的抗原抗體的濃度比或量比。

二、比例性（proportionality）

等價(jià)帶(equivalencezone)抗原與抗體分子比例合適的范圍。

帶現(xiàn)象：Ag與Ab比例不適而不出現(xiàn)可見反應(yīng)。*前帶(prozone)抗體過量時(shí)。*后帶(postzone)

抗原過量時(shí)。第18頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

比例性示意圖抗體過量比例合適抗原的量抗原過量抗體沉淀的量前帶等價(jià)帶后帶第19頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

三、可逆性（reversibility)概念：是指抗原與抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性。

解離后抗原抗體仍保持原有特性。一定條件：低pH、高濃度鹽等。常用于解離抗原抗體復(fù)合物的物質(zhì)有：

3mol/L硫氰化鉀、pH2.40.1mol/L甘氨酸、

7mol/L尿素等。第20頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三抗體混有SPAg抗體-SPAg抗體-SPAg分離劑一、抗原抗體結(jié)合二、分離抗體

可逆性示意圖抗體第21頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三抗原抗體反應(yīng)影響因素一、反應(yīng)物自身因素*抗原：1.理化特性

2.Ag決定簇?cái)?shù)量

3.Ag決定簇種類*抗體：1.來源

2.特異性與親和力

3.濃度第22頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三二、環(huán)境條件：*電解質(zhì)：0.85%NaCl*酸堿度：pH6～9*溫度：15～40℃第23頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三第三節(jié)抗原抗體反應(yīng)類型1.沉淀反應(yīng)2.凝集反應(yīng)3.補(bǔ)體參與的反應(yīng)4.中和反應(yīng)5.免疫標(biāo)記第24頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三

表

抗原抗體反應(yīng)的基本類型表反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測方法敏感度沉淀反應(yīng)液相沉淀試驗(yàn)觀察沉淀、檢測濁度+，++++

瓊脂凝膠擴(kuò)散觀察掃描沉淀線或環(huán)+

凝膠電泳技術(shù)或峰或弧++補(bǔ)體參與反應(yīng)補(bǔ)體溶血試驗(yàn)以裸眼或光電比色儀++

補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)觀察測定溶血現(xiàn)象+++免疫標(biāo)記技術(shù)熒光免疫技術(shù)檢測熒光現(xiàn)象++++

放射免疫技術(shù)檢測放射性++++

酶標(biāo)免疫技術(shù)檢測酶底物顯色++++

發(fā)光免疫技術(shù)測定發(fā)光強(qiáng)度++++

生物素-親合素技術(shù)結(jié)合其它標(biāo)記技術(shù)++++

金標(biāo)免疫技術(shù)檢測金顆粒沉淀++++凝集反應(yīng)

直接凝集試驗(yàn)用裸眼、放大鏡或顯+

間接凝集試驗(yàn)微鏡觀察紅細(xì)胞或膠++

凝集抑制試驗(yàn)乳等顆粒和各種凝集+++

協(xié)同凝集試驗(yàn)