抗核小體抗體檢測診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡的評價

抗核小體抗體檢測診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡的評價【摘要】目的探討抗核小體抗體檢測及AnuA與抗雙鏈DNA抗體、抗核抗體等特異性抗體聯(lián)合檢測診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡的價值。方法ANA采用間接免疫熒光法，抗dsDNA抗體、AnuA采用ELISA法，分別對48例SLE病人、44例病例對照病人及20例正常人進行檢測。結(jié)果AnuA陽性率%，特異性%；抗dsDNA抗體陽性率%，特異性%；ANA陽性率%，特異性50%。AnuA與抗dsDNA抗體聯(lián)合檢測，陽性率%，特異性%。結(jié)論單一指標(biāo)用于SLE的診斷AnuA最好，抗dsDNA抗體次之，ANA最差；AnuA與抗dsDNA抗體聯(lián)合檢測診斷SLE陽性檢出可互補，能提高陽性率，且特異性好，是診斷SLE較好的聯(lián)合檢測指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】系統(tǒng)性紅斑狼瘡；抗核小體抗體

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種累及多系統(tǒng)多器官的自身免疫性疾病。其主要特征是體內(nèi)產(chǎn)生多種抗核抗體，如抗雙鏈DNA抗體(抗dsDNA抗體)、抗史密斯抗體、抗組蛋白抗體、抗核糖體P蛋白抗體、抗核小體抗體等，而引起自身多組織、多器官以血管炎為特征的彌漫性損害的疾?。?］。目前SLE的實驗室檢查主要檢測血清ANA、抗dsDNA抗體、AnuA等。本文對此三項指標(biāo)檢測診斷SLE的價值進行了探討，結(jié)果報告如下。

1材料與方法

研究對象研究組為2003年11月～2005年6月我院門診和住院SLE患者48例，男6例，女42例，年齡18～52歲，病程6個月～4年，診斷均符合美國風(fēng)濕病學(xué)會SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］。病例對照組44例，男4例，女40例，年齡17～69歲，病程4個月～6年，均為我院門診和住院病人，其中類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎30例，皮肌炎3例，干燥綜合征4例，混合性結(jié)締組織病3例，系統(tǒng)性硬化癥4例。正常對照組20例，男10例，女10例，年齡20～50歲，為無償獻血者。

方法

標(biāo)本的采集與處理抽取患者靜脈血，充分凝固后離心取血清保存于-20℃低溫冰箱，檢測前解凍后檢測。

AnuA檢測采用德國歐蒙公司提供的AnuA第二代ELISA檢測試劑盒，批號E050504EA。嚴(yán)格按說明書進行操作。設(shè)陰陽性對照孔，結(jié)果判斷：≥20U/ml為陽性。

抗dsDNA抗體檢測采用上海德波生物有限公司提供的抗dsDNA抗體ELISA檢測試劑盒，批號20050412。嚴(yán)格按說明書進行操作。設(shè)陰陽性對照孔，結(jié)果判斷：≥10U/ml為陽性。

ANA檢測采用德國歐蒙公司提供的ANA檢測試劑盒，批號T050512TB。以Hep—2細胞和猴肝為基質(zhì)片，按說明書應(yīng)用間接免疫熒光法檢測。設(shè)陰陽性對照，結(jié)果判斷：血清稀釋≥1:100顯示熒光判為陽性。

統(tǒng)計學(xué)方法采用χ2檢驗。

2結(jié)果

各觀察組AnuA、抗dsDNA抗體、ANA檢測結(jié)果SLE中自身抗體的陽性率：ANA最高，為%；AnuA次之，為%；抗dsDNA抗體最低，為%。特異性：AnuA和抗dsDNA抗體較高，均為%，而ANA僅50%。見表1。

表1各觀察組AnuA、抗dsDNA抗體、ANA檢測結(jié)果

48例SLE患者AnuA與抗dsDNA抗體檢測結(jié)果比較陽性率AnuA為%，高于抗dsDNA抗體的%，差異有顯著性。13例抗dsDNA抗體陰性而AnuA陽性，4例AnuA陰性而抗dsDNA抗體陽性。見表2。

表248例SLE患者AnuA與抗dsDNA抗體檢測

48例SLE患者單獨檢測AnuA與聯(lián)合檢測AnuA和抗dsDNA抗體結(jié)果比較陽性率聯(lián)合檢測為%，高于單獨檢測AnuA的%，差異有顯著性。見表3。

表348例SLE患者單獨檢測AnuA與聯(lián)合檢測AnuA和抗dsDNA抗體結(jié)果比較

3討論

核小體是構(gòu)成染色質(zhì)的基本單位，每個核小體是由180～200個bp繞八聚體核心組蛋白構(gòu)成的復(fù)合物，染色質(zhì)纖維由緊密排列的核小體組成［3］。在細胞凋亡過程中核酸內(nèi)切酶活化分切割核染色質(zhì)、染色質(zhì)釋放核小體［4］。核小體作為免疫原，可被抗原提呈細胞如單核細胞提呈給CD4+Th2細胞，Th2細胞增殖活化，激活B細胞產(chǎn)生AnuA，形成抗原抗體復(fù)合物參與SLE的發(fā)病［5］。2000年Amoura等對596例患者用酶聯(lián)免疫法檢測AnuA，結(jié)果發(fā)現(xiàn)AnuA-IgG僅見于三種結(jié)締組織病，即SLE陽性率%，系統(tǒng)性硬化癥陽性率%，混合性結(jié)締組織癥陽性率%，是狼瘡腎炎的標(biāo)記性抗體［6］。

用間接免疫熒光法檢測病人血清ANA，能檢測出多種風(fēng)濕性疾病的存在，如系統(tǒng)性硬化癥、干燥綜合征、未分化結(jié)締組織病、多發(fā)性肌炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，也能作為SLE的診斷指標(biāo)。但正因其能于多種風(fēng)濕性疾病中出現(xiàn)，陽性率高，特異性低，故不能作為SLE診斷的特異性指標(biāo)，而用作篩選試驗。

診斷SLE，AnuA、抗dsDNA抗體都有較高的特異性，抗dsDNA抗體在狼瘡腎炎的過程中可與腎小球基底膜結(jié)合，該反應(yīng)是由核小體介導(dǎo)的，即核小體既能產(chǎn)生AnuA，又能產(chǎn)生抗dsDNA抗體，作為SLE的特異性抗體，它們的陽性率各不相同，其中AnuA的陽性率要高于抗dsDNA，與文獻［7］結(jié)果基本一致。且高水平的AnuA幾乎是僅在SLE中出現(xiàn)［8］，提示AnuA可能是診斷SLE比抗dsDNA更特異的指標(biāo)。尤其對于抗dsDNA抗體陰性的SLE患者的診斷更具有臨床應(yīng)用價值。

分析AnuA和抗dsDNA抗體的檢測結(jié)果，13例抗dsDNA抗體陰性的SLE患者AnuA陽性，4例AnuA陰性的SLE患者抗dsDNA抗體陽性，故兩者用于診斷SLE，陽性檢出有一定的互補關(guān)系，這一結(jié)果與國內(nèi)蘇茵的研究類似［9］。二者聯(lián)合檢測能將陽性率提高到%以上，而特異性沒有差別。本文結(jié)果還顯示，AnuA及抗dsDNA抗體與SLE的病情活動性相關(guān)，特別是與狼瘡性腎疾病高度相關(guān)，可作為治療觀察的指標(biāo)。因此，臨床工作中可應(yīng)用AnuA與抗dsDNA抗體聯(lián)合檢測，既可明顯降低檢查費用，同時也達到SLE早期診斷和早期治療的目的。

綜上所述，AnuA、抗dsDNA抗體是診斷SLE的特異性自身抗體。相對來說，AnuA的陽性率要高于抗dsDNA抗體，兩者在診斷中有明顯的互補作用，聯(lián)合檢測，能提高SLE的檢出率，而不降低其特異性，有利于SLE的早期診斷和治療。

【參考文獻】

1蘇茵，賈汝琳，粟占國，等.自身抗體聯(lián)合檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義.中華風(fēng)濕學(xué)雜志，2005，1:16-19.

2LugbreK，MaderAW，RichmondstructureofthenucleasomecoreparticleatAresolutionNature，1997，389:251-261.

3郝進，郝飛，鐘白玉，等.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血單一核細胞核小體釋放水平及其臨床意義.中華皮膚科雜志，2003，36:372-374.

4EmlenW，NieburJ，kaderainvitroapplosisoflymphocytesfrompatientswithsystemiclupuserytheImmunol，1994，152:3685-3692.

5BrunsA，BlassS，HansdorfG，etaremajorTandBcellautoantigensinsystemiclupuserythemmatosus.ArthritsRheum，2000，43:2307-2315.

6Z，koutouzovS，，etofantinucleasomeantibodiesinarestrictedsetofconnectivetissuediseases.ArthritsRheum，2000，43:76-94.

7SimonJA，CabiedesJ，OrtizE，etantibodiesinpatientswithsystemicJupuserythematosusofrecentousetpotentialupilityasadiagnosticfoolanddiseaseactivity(Oxford)，2004，43:200-