人教教學課件高考生物總復習課件：專題《基因工程》知識研習新人教選修張

知識結(jié)構(gòu)(對應學生用書P154)選修３現(xiàn)代生物科技專題知識研讀(對應學生用書P154)專題１基因工程(一)1．基因工程的誕生。2．基因工程的原理及技術(shù)。3．DNA的粗提取與鑒定。課程標準(即時鞏固解析為教師用書獨有)考點一基因工程的基本工具一、與DNA分子相關(guān)的酶

種類項目限制酶DNA連接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分子片段脫氧核苷酸DNA分子作用部位磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵堿基對間的氫鍵作用結(jié)果形成黏性末端或平末端形成重組DNA分子形成新的DNA分子形成單鏈DNA分子考點整合二、載體1．作用(1)作為運載工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細胞內(nèi)。(2)利用它在宿主細胞內(nèi)對目的基因進行大量復制。2．具備的條件(1)能在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)定保存并大量復制。(2)有多個限制酶切割位點，以便與外源基因連接。(3)具有某些遺傳標記基因，以便進行篩選。3．種類(1)質(zhì)粒：一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細菌擬核DNA之外，能夠自我復制的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(2)λ噬菌體的衍生物。(3)動植物病毒。【歸納總結(jié)】①一般來說，天然載體往往不能滿足人類的所有要求，因此人們根據(jù)不同的目的和需要，對某些天然的載體進行人工改造。②限制酶切割位點所處的位置必須是在所需的標記基因之外，這樣才能保證標記基因的完整性，有利于對目的基因的檢測?！景咐?】

(2009·福建理綜)轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點。請回答：(1)構(gòu)建含抗病基因的表達載體A時，應選用限制酶_____，對____________進行切割。(2)培養(yǎng)基中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，應使基因表達載體A中含有____________，作為標記基因。(3)香蕉組織細胞具有________，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導入抗病基因的香蕉組織細胞培育成植株。圖中①②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的_________________?！窘馕觥勘绢}主要考查基因工程的相關(guān)知識。(1)由于限制酶SmaⅠ的切割位點在抗病基因中間，因此不能用限制酶SmaⅠ來進行切割目的基因。要將目的基因從含抗病基因的DNA分子中切割下來，從圖中看需要用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ同時進行切割。而運載體要和目的基因含有相同的黏性末端才能進行連接，所以質(zhì)粒也要用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ同時進行切割。(2)由于卡那霉素能抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，所以構(gòu)建的基因表達載體A中應含抗卡那霉素基因，作為標記基因。(3)由于究香蕉通組織識細胞社具有愿全能陸性，沒因此販利用老植物娃組織辰培養(yǎng)巖技術(shù)證可將話導入術(shù)抗病鍋基因掌的香米蕉組脫織細斬胞培拉育成肚植株給?！敬鸢浮?1躁)P必st墾Ⅰ、Ec逃oRⅠ含抗羨病基瘡因的DN殊A、質(zhì)革粒(2貍)抗卡緣瑞那霉鴿素基綱因(3竿)全能賽性潤脫分演化、榜再分艦化【即時憤鞏固1】(2但01撥0·江蘇)下表陸中列購出了美幾種奶限制勸酶識損別序階列及魚其切疫割位園點，這圖1、圖2中箭討頭表壇示相虎關(guān)限競制酶煎的酶蛋切位吵點?；收埢乇炒鹣路袉柸暑}：限制酶BamHⅠHindⅢEcoRⅠSmaⅠ識別序列及切割位點G↓GATCCCCTAG↑GA↓AGCTTTTCGA↑AG↓AATTCCTTAA↑GCCC↓GGGGGG↑CCC(1壩)一個銀圖1所示扣的質(zhì)中粒分鐮子經(jīng)Sm協(xié)aⅠ切割匙前后女，分幣別含喊有__殼__肯__皆__個游鳴離的佩磷酸閉基團沉。(2蟻)若對衫圖中厲質(zhì)粒惜進行孟改造桐，插滾入的Sm題aⅠ酶切安位點案越多危，質(zhì)始粒的恥熱穩(wěn)督定性釘越__云__珠__茂__。(3暗)用圖都中的滿質(zhì)粒怪和外佳源DN殿A構(gòu)建償重組合質(zhì)粒店，不互能使難用Sm毫aⅠ切割統(tǒng)，原脊因是__劍__受__營__腎__夫__槳__奪__分__鉗__鋤__粥__卷__智__逃__皺__洪__辭__奸__。(4悲)與只吉使用Ec鼠oRⅠ相比望較，料使用Ba道m(xù)HⅠ和Hi填nd酸Ⅲ兩種蛙限制跑酶同門時處延理質(zhì)員粒、私外源DN撥A的優(yōu)隸點在島于可恩以防魯止__撈__稅__壯__細__混__壟__。(5火)為了渡獲取德重組餃質(zhì)粒給，將津切割虧后的源質(zhì)粒坊與目記的基顯因片找段混拆合，荷并加怪入__雅__厘__直__酶。(6員)重組裂質(zhì)粒鈴中抗粥生素檢抗性攝基因要的作弄用是硬為了__仗__騾__君__降__。(7顛)為了虜從cD屋NA文庫亦中分墻離獲錢取蔗殺糖轉(zhuǎn)盾運蛋抓白基侵因，具將重舌組質(zhì)揪粒導擊入喪獨失吸歌收蔗融糖能如力的飽大腸列桿菌姥突變鑼體，鵝然后從在__黃__虎__的培揮養(yǎng)基訊中培躬養(yǎng)，望以完焰成目懸的基皂因表憶達的作初步凍檢測林。【解析】本題饒綜合刺考查誓基因應工程診的過碼程及擺應用耐。(1膊)質(zhì)粒驢是雙騙鏈環(huán)擊狀DN糠A分子臺，在Sm販aⅠ切割宅前沒栽有游兵離的墨磷酸休基團窯，Sm沒aⅠ作用脾于兩崗個核鑰苷酸妹之間充的磷鹿酸二貿(mào)酯鍵勤，切游割產(chǎn)察生的DN狂A片段慌末端利是平再末端棉，因滅而質(zhì)烈粒經(jīng)份切割霞后含菊有2個游宇離的祝磷酸脾基團畏。(2勇)質(zhì)粒貨的熱親穩(wěn)定萌性主煉要由其氫鍵儲的數(shù)李量決磨定，敬氫鍵們數(shù)量笨越多尼，質(zhì)粒挨的熱洽穩(wěn)定祥性越攜高，診反之吸則低霸，DN紛A分子徹中A與T之間宜存在2個氫錘鍵，C與G之間談存在3個氫長鍵，秧因此DN筒A分子鉗中G—墾C堿基租對越守多，妥熱穩(wěn)頓定性扯就越朵高，Sm宏aⅠ識別CC纖CG鳴GG序列冬，并忠在C和G之間嘗將這澇段序墳列切憑開，程也就臣是質(zhì)荒粒中Sm憐aⅠ酶切漆位點兼越多信，G—止C堿基態(tài)對越撿多，奶熱穩(wěn)菠定性譯越高司。(3宣)據(jù)圖1可知刃，Sm償aⅠ切割壘的位撿點在提抗生圍素抗傻性基呀因之噴中，揚抗生目素抗日性基催因是桐標記學基因矩，應膏盡量淘避免手破壞肅，據(jù)沒圖2可知Sm喘aⅠ切割聚的位趟點在票目的流基因傷之中,破壞林了目旁的基港因,所以榆不能燥使用Sm疊aⅠ切割模。(4個)用同繡種限癥制酶煤切割鴿后的湖質(zhì)?；魏湍勘坏幕鶎Ｒ?在基魯因表伏達載尚體構(gòu)需建時醒，常令形成診三種貞直接格方式對，其格中目始的基榜因與懇目的揮基因痰的連終接、蠅質(zhì)粒趴與質(zhì)凱粒的慚連接怖是無匠效的扣連接搭，用脅兩種亂限制低酶可鑒避免聯(lián)此類恒現(xiàn)象順。(5歉)基因諷表達側(cè)載體話的構(gòu)嘴建過程醉中需努加DN臟A連接遼酶，殼連接遞脫氧篩核糖妄和磷再酸。(6對)抗生賠素抗奮性基潤因?qū)偬幱跇锁f記基臂因，染供重捏組DN匆A的鑒呼定和捎選擇凡。(7柿)目的借基因后是蔗犁糖轉(zhuǎn)鉗運蛋普白基濾因，氏將其礙導入把喪失略吸收患蔗糖俗能力士的大怎腸桿聰菌突跪變體批后，炎應進樓行目任的基救因的依檢測租與鑒耗定，虎可根產(chǎn)據(jù)受距體細朋胞是趣否含抱有蔗娃糖轉(zhuǎn)急運蛋躲白，雀即是鳴否具跳備吸譜收蔗慣糖的粘能力司判斷創(chuàng)基因換工程辰是否忌成功亞，因蹄而可義在含燈有蔗勉糖(唯一絲式碳源)的培賽養(yǎng)基饞中培窮養(yǎng)?！敬鸢浮?1瞧)0、2(2池)高(3日)S印ma匹Ⅰ會破辰壞質(zhì)還粒的緊抗性蛙基因依、外泰源DN夜A中的斥目的頁基因(4餡)質(zhì)粒煎和含掘目的異基因具的外珠源DN續(xù)A片段竹自身蹤蝶環(huán)化(5妥)D莫NA連接(6勵)鑒別朱和篩部選含估有目翅的基備因的服細胞(7民)蔗糖講為唯鵝一含往碳營旁養(yǎng)物詢質(zhì)考點袋二基因育工程仍基本叮操作境程序資分析一、律目的貓基因昂的獲吩取途攏徑1．直懂接分刮離：駛從自登然界嬌已有付的物袋種中摟分離粉，如壘從基撕因組器文庫仍中獲輝取。2．人財工合野成目員的基旋因常用謝的方晌法有幫：(1鋪)已知成核苷敢酸序屠列的度較小嫩基因袍，直籌接利溜用DN渡A合成草儀用豆化學屬方法俗合成雁，不著需要耐模板驗。(2購)以RN昂A為模塘板，躺在逆粘轉(zhuǎn)錄狼酶作航用下們?nèi)斯ぬ柡铣申枴?．PC討R技術(shù)鈔與DN是A復制透的比蘇較PCR技術(shù)DNA復制相同點原理DNA雙鏈復制(堿基互補配對)原料四種游離的脫氧核苷酸條件模板、ATP、酶等不同點解旋方式DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化場所體外復制主要在細胞核內(nèi)酶熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(Taq酶)細胞內(nèi)含有的DNA聚合酶結(jié)果在短時間內(nèi)形成大量的DNA片段形成整個DNA分子二、幸基因蜓表達便載體拜的構(gòu)難建1．基農(nóng)因表貞達載休體的止組成澡：啟次動子孝、目項的基弄因、甩終止哨子以諒及標籠記基摘因等勢。2．基歐因表最達載矮體的捷構(gòu)建穿方法三、漫將目執(zhí)的基塔因?qū)О槿胧芘蝮w細債胞生物種類植物細胞動物細胞微生物細胞常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射技術(shù)Ca2＋處理法受體細胞體細胞受精卵原核細胞轉(zhuǎn)化過程將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上→農(nóng)桿菌→導入植物細胞→整合到受體細胞的DNA→表達將含有目的基因的表達載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動物Ca2＋處理細胞→感受態(tài)細胞→重組表達載體與感受態(tài)細胞混合→感受態(tài)細胞吸收DNA分子四、晉目的咱基因組的檢線測與跡鑒定1．分乒子水每平檢猛測(1徹)導入貝檢測執(zhí)：DN飼A分子馬雜交擱技術(shù)誘，即拼使用點放射包性同癢位素牌標記呈的含襲目的擠基因蜓的DN恐A片段扶作探石針檢呼測。2．個干體生喚物學薪水平傭鑒定擊：對趁轉(zhuǎn)基炸因生請物進師行抗足蟲或伐抗病牧的接讓種實鐮驗。【案例2】(2赤00梢8·海南)如圖浮為某真種質(zhì)待粒表赴達載效體簡泊圖，小箭主頭所憐指分吹別為既限制寧性內(nèi)或切酶Ec籌oRI、Ba嬌mHI的酶若切位澡點，am譯pR為青備霉素統(tǒng)抗性粘基因柳，tc妖tR為四壩環(huán)素功抗性今基因熄，P為啟敘動子夜，T為終居止子傘，or疼i為復運制原帽點。乘已知秧目的寇基因蠅的兩喉端分遞別有溪包括Ec士oRI、Ba垂mHI在內(nèi)嶄的多頂種酶雅的酶胳切位揀點。據(jù)圖捧回答絡：(1紹)將含殊有目喜的基傘因的DN酒A與質(zhì)攏粒表經(jīng)達載什體分蘇別用Ec獲oR右I酶切,酶切港產(chǎn)物順用DN廢A連接獲酶進習行連鉛接后揉，其粥中由籌兩個DN礙A片段蛙之間妄連接恭形成止的產(chǎn)邪物有__撐__墊__、__萄__簡__、__微__拉__三種徐。若槽要從配這些攔連接瞎物中埋分離各出重節(jié)組質(zhì)愛粒，樹需要油對這銳些連技接產(chǎn)榆物進嫩行__絕__彈__。(2摩)用上像述3種連怨接產(chǎn)謹物與壺無任稀何抗掏藥性背的原域核宿藝主細流胞進聲行轉(zhuǎn)剖化實居驗。植之后駕將這梳些宿杯主細茂胞接很種到狗含四剖環(huán)素展的培們養(yǎng)基屬中，故能生臘長的推原核手宿主相細胞筑所含哥有的磚連接謊產(chǎn)物刃是__味__蠻__控__；若筋接種唐到含脾青霉顏素的琴培養(yǎng)依基中算，能奧生長注的原希核宿蹈主細娛胞所島含有撫的連漸接產(chǎn)慈物是__掌__圾__友__針__制__儲__繼__牧__舌__憐__魔__薪__芽__凍__灣__。(3毒)目的犁基因與表達優(yōu)時，RN鴉A聚合令酶識腥別和熟結(jié)合蘇的位稅點是__砌__，其炕合成飽的產(chǎn)蕩物是__持__科__稅__。(4獸)在上因述實跌驗中閉，為書了防坐止目惑的基嫩因和鑰質(zhì)粒綿表達念載體羞在酶尊切后峰產(chǎn)生假的末依端發(fā)碧生任燥意連傍接，四酶切計時應竭選用死的酶妖是__諒__卸__得__?！窘馕觥磕康闹\基因霜的DN猶A與質(zhì)咳粒表閱達載我體分勸別用Ec之oR硬I酶切耗后黏遣性末誦端相筍同，肅可以若連接葛成目逼的基破因與毅目的匯基因殺、目照的基惜因與載體眉、載泉體與悲載體著，需溜要分罰離純掠化才際能得卻到重軌組質(zhì)什粒。Ec均oRI酶切緊破壞企了載野體中狂的四爆環(huán)素挑抗性損基因牢，只盾有載旗體與戚載體傅轉(zhuǎn)化示的原鴨核宿齒主細餐胞在細含四抄環(huán)素撕的培躲養(yǎng)基饞中能責生長戰(zhàn)。因危為青尼霉素縱基因供沒有康被破染壞，澡所以嘩目的羽基因周與載挎體、錦載體塘與載港體轉(zhuǎn)嫂化的窮原核炕宿主況細胞椒在含祥青霉冶素的終培養(yǎng)君基中斑能生古長。Ec塵oRI和Ba從mHI酶切已后有2種黏丘性末爪端，箱不能旅任意俊連接喪?！敬鸢浮?1乓)目的掃基因—載體榴連接采物猴載體—載體情連接翅物昨目的友基因—目的覆基因螞連接蘋物戲分離就純化(其他炕合理搬答案裙也可仙以)(2莖)載體—載體義連接太物毅目的角基因—載體艇連接早物、狀載體—載體婆連接腔物(3戰(zhàn))啟動瞞子mR赴NA(4凝)Ec笑oRI和Ba幼mHI【即時各鞏固2】(2遼00喘8·廣東)天然飾釀酒伏酵母陡菌通再常缺沸乏分莖解淀淡粉的絡酶類,用作功發(fā)酵它原料盡的淀塞粉需銷經(jīng)一朵系列呈復雜綁的轉(zhuǎn)救化過臨程才驕能被陶利用交。研斧究者聚從某蘭絲狀老真菌漆中獲飼取淀膜粉酶裙基因白并轉(zhuǎn)打入釀錯酒酵觀母菌纖，獲晃得的罩釀酒咳酵母責工程婚菌可豬直接虹利用自淀粉希產(chǎn)生競酒精物。請則回答引下列接問題噴：(1訂)將淀消粉酶劇基因典切割際下來融所用再的工插具是__鳥__，用__梳_將淀舉粉酶肯基因形與載使體拼假接成荷新的DN曠A分子厚，下剛一步存將該DN澆A分子__剃_，以津完成備工程遙菌的臺構(gòu)建縫。(2陣)若要柿鑒定恩淀粉慘酶基避因是脾否插炭入釀容酒酵忽母菌斃，可亞采用唐的檢期測方混法是__慌__檔__耽__；若川要鑒宜定淀貧粉酶餡基因蓋是否擋翻譯梢成淀脊粉酶本，可采浪用__叮__埋__湊__檢測甜；將寄該工清程菌桿接種稠在含雜淀粉糧的固每體平歉板培莫養(yǎng)基首上，盾培養(yǎng)框一定恰時間捐后，撓加入仁碘液偉，工丈程菌蜓周圍理出現(xiàn)封透明盈圈,請解收釋該故現(xiàn)象湯發(fā)生澡的原守因。__積__壘__司__竿__爆__翠__碑__章__嘴__寄__。(3開)如何笛進一批步鑒勞定不喂同的纖轉(zhuǎn)基堪因工幸程菌炎菌株梳利用盾淀粉飄能力搖的大察小？__俊__霧__舅__仙__歷__朋__譽__刪__儀__搏__余__堪__塔__婦__堵__板__智__。(4眾)微生務物在忌基因敢工程料領域疤中有隱哪些槽重要建作用媽？__防__遮__?！窘馕觥勘绢}畜考查結(jié)了與銅基因撞工程派相關(guān)合的知桂識。欣將基研因切敏割下村來的習工具底是限個制酶避，將鍵基因蟻與運仗載體罰結(jié)合傍在一盆起的曠是DN害A連接婦酶，密基因袖工程箱的基攤本流品程是犯：獲挺取目男的基道因，餡基因逼表達遵載體呀的構(gòu)瞎建，暈將目魯?shù)幕懸驅(qū)|入受內(nèi)體細災胞，旱目的抄基因丸的檢青測與裙鑒定賢。目俯的基咽因的涉檢測激與鑒維定包例括分唐子水恨平的各檢測壞，如改用DN屢A分子測雜交荷技術(shù)留來檢架測基涉因或胖對應邪的mR疲NA，用被抗原棄－抗絨體雜詳交來瘦檢測產(chǎn)蛋白質(zhì)，慶也包乏括個躁體生爆物學許水平賽的鑒陪定。爹淀粉進在工蹈程菌京分泌偵的淀疏粉酶富的作搞用下事被分權(quán)解，歐加入鍵碘液慕后，銹因工貨程菌娛周圍堤無淀嶄粉而桌不變海藍，毅故出辜現(xiàn)透他明圈盆?！敬鸢浮?1想)限制哄性核涌酸內(nèi)圖切酶DN勾A連接碗酶姨導入貼釀酒厭酵母笛菌(2罪)D彼NA分子呆雜交陶抗友原－考抗體讓雜交臣或淀號粉酶償活性快該賣工程寨菌產(chǎn)傾生的捎淀粉廢酶可抗分泌貫至培媽養(yǎng)基慌中，萄培養(yǎng)之基中魚淀粉往被水襲解的瞎區(qū)域匪，遇竹碘不旁再變英藍色顧，產(chǎn)趁生透墾明圈(3揮)測定亡相同世培養(yǎng)別條件賠下不偽同工傻程菌虛菌株探的淀子粉酶涌活性博或酒逃精產(chǎn)溫量(4巴)①工具壩酶主分要來必自微歇生物濃；②最重卡要的提目的啊基因謊供體盲庫之丸一；③目的爽基因亞的載爽體之壘一；④作為河受體輸細胞表；⑤提供可用于蟻發(fā)酵心的工慨程菌知識貸研讀(對應劈燕學生貨用書P15臭7)基因勻工程(二)1．基惱因工拖程的客應用窄。2．蛋底白質(zhì)衫工程鬧。課程標準(即時埋鞏固拴解析朗為教申師用夕書獨務有)考點枕一基因殘工程割的應飄用成寄果一、啦植物去基因聲工程菠的成失果1．抗抗蟲轉(zhuǎn)辣基因驢植物御：主四要抗第蟲基剪因有Bt毒蛋牲白基那因、全蛋白評酶抑竊制劑趨基因顏、淀琴粉酶盆抑制殖劑基映因、年植物犯凝集成素基姿因等彼?？雇跋x棉帳、抗欠蟲番話茄、巾抗蟲噴煙草暑都已哲獲得伏成功填，既贈減少花了殺敏蟲劑黨的使孕用，全又保準護了簽環(huán)境苗。2．抗枝病毒倉轉(zhuǎn)基份因植禍物：皆主要準抗病復毒的墨病毒驢外殼狀基因剝、病滴毒的鈴復制稼酶基跡因、渠抗真崇菌的芒幾丁火質(zhì)酶霸基因刃和抗子毒素朝合成詳基因嚇?？键c整合多種放抗病碗毒植副株已躲培育寫成功它并開蹲始進晶行田經(jīng)間實肥驗、傻栽培監(jiān)。3．抗尊逆轉(zhuǎn)塞基因酸植物虧：主駁要有壺抗鹽陣堿、充抗干希旱的凡滲透充壓調(diào)癢節(jié)基懸因、步耐寒竿的抗勵凍蛋返白基布因、巧抗除霞草劑慮基因刑等，招減輕受了不告利環(huán)發(fā)境條厭件對類農(nóng)業(yè)諷生產(chǎn)黑造成手的影桂響。4．利蕉用轉(zhuǎn)指基因俘改良邊植物涌品質(zhì)專：主顆要成綠果有妻培育糕賴氨廚酸含派量較溝高的公玉米眠、耐御儲存蔥的番屢茄、揚花色你變異量的矮渣牽牛逃花等目。二、錄動物禾基因話工程劍的成囑果1．提國高動渾物生并長速皂度：是導入釣外源系生長足激素顧基因歪、培蓮育轉(zhuǎn)賓基因妖綿羊頂和轉(zhuǎn)搞基因吳鯉魚且。2．改倡善畜睡產(chǎn)品夠的品珠質(zhì)：枝如導插入腸儀乳糖精酶基犧因，污生產(chǎn)腳低乳軋?zhí)侨樗橹?．用碧轉(zhuǎn)基文因動頂物生扇產(chǎn)藥星物：舟利用闊乳腺置反應痛器生荷產(chǎn)抗字凝血劈燕酶、刑血清添白蛋特白、首生長稱激素拖等醫(yī)已藥產(chǎn)就品。4．用隆轉(zhuǎn)基古因動例物作哭器官冊移植滴的供雄體：廈利用紐奉基因降工程績抑制桌抗原缸決定危簇基恐因的敘表達密或除井去抗膚原決腦定基先因，臺培育弦出沒大有免弓疫排蠅斥反威應的詳轉(zhuǎn)基腔因克育隆豬拌器官低。三、昏基因氣工程返藥物利用崗轉(zhuǎn)基冠因工故程菌圖生產(chǎn)惡出人坡類蛋獎白質(zhì)扭藥物蠅。四、裳基因苗治療項目類型外源基因類型及舉例過程特點成果舉例體外基因治療腺苷酸脫氨酶基因①從病人體內(nèi)獲得某種細胞②細胞培養(yǎng)③體外完成基因轉(zhuǎn)移④篩選并擴增培養(yǎng)⑤重新輸入患者體內(nèi)操作復雜，但成功率高治療復合型免疫缺陷癥體內(nèi)基因治療治療遺傳性囊性纖維化病的基因外源基因→載體攜帶體內(nèi)相應組織細胞操作簡單，成功率低治療遺傳性囊性纖維化病【案例1】爭(2喬00豬9·江蘇)蘇云洗金桿然菌(B銹t)能產(chǎn)加生具牢有殺豎蟲能信力的硬毒素勢蛋白匯。下迎圖是序轉(zhuǎn)Bt毒素其蛋白綱基因輛植物鬧的培欄育過暴程示微意圖(am貝pr為抗扭氨芐感青霉池素基親因)，據(jù)寧圖回洪答下州列問惹題。(1張)將圖清中①的DN積A用Hi諒ndⅢ、Ba暖mHⅠ限制撫酶切漆后，毫反應姓管中誤有__兄__修__扭__種DN協(xié)A片段抬。(2碗)圖中②表示Hi投ndⅢ與Ba抗mHⅠ酶切哄、DN矛A連接飽酶連去接的壺過程記，此騎過程嘉可獲增得__選__俗__膏__種重眉組質(zhì)液粒；保如果性換用Bs鈴tⅠ與Ba板mHⅠ酶切匪，目破的基霧因與黨質(zhì)粒逼連接爐后可臺獲得__兩__亦__獨__種重冶組質(zhì)凱粒。(3牧)目的芬基因尺插入能質(zhì)粒壺后，莖不能丑影響黃質(zhì)粒秒的__百__短__妨__。(4頁)圖中③的Ti質(zhì)粒糕調(diào)控祖合成俊的vi戶r蛋白旺，可抓以協(xié)京助帶重有目膨的基攏因的T-勾DN考A導入罰植物息細胞閑，并造防止均植物壁細胞釀中__愁__客__舍__對T-圓DN胳A的降略解。(5穴)已知餓轉(zhuǎn)基肯因植掉物中頃毒素釘?shù)鞍籽踔唤Y(jié)昆合某腥些昆主蟲腸版上皮裳細胞腫表面搬的特陰異性奏受體菌，使醉細胞鋒膜穿炕孔，催腸細派胞裂損解，渴昆蟲造死亡航。而蓬該毒嘩素蛋腳白對仆人類及的風龜險相球?qū)^末小，碼原因圈是人致類腸堆上皮羅細胞__觀__引__合__歐__霉__惕__暫_。(6妹)生產(chǎn)起上常掀將上渠述轉(zhuǎn)嗎基因秒作物澆與非拌轉(zhuǎn)基焰因作敢物混廢合播蕉種，賢其目葵的是易降低揪害蟲哭種群膜中的__愉__理__基因浮頻率摔的增寇長速騙率。【解析】本題減考查殼基因記工程護的相拳關(guān)知鋸識。(1符)圖中①的DN葛A有1個Hi扣nd搶Ⅲ酶切諸位點確和2個Ba苗mHⅠ酶切黨位點陪，故鮮用Hi波nd毀Ⅲ、Ba不mHⅠ完全座酶切逃后，杯反應姿管中衰有4種DN稈A片段濤。(2關(guān))從圖公中①可知吊，Hi耀nd滅Ⅲ、Ba眨mHⅠ酶切界后有2種片因段有改相應弱的末殿端,可與換質(zhì)粒姨重組懂；而Bs逐tⅠ和Ba歡mHⅠ酶切寬后只畝有1種片跪段有璃相應晉的末托端，搞可與質(zhì)粒膛重組述。(3倡)質(zhì)粒碼要進遵行復謠制才繼能更把多的仿表達隱出產(chǎn)直物，出所以塘重組博之后粘要能醬復制資。(4國)酶具恥有專步一性，T-肆DN族A的降屆解酶污為DN舞A水解禍酶。(5仇)生物資的細蛇胞表主面的補受體摟具有裙特異仁性，伐人類驗腸上赤皮細進胞沒宏有昆棒蟲腸巾上皮釘細胞征表面棉的特蘋異性特受體支，所鉤以該記毒素滋蛋白婚對人參類的氣風險拼相對抄較小狗。(6站)自然趨選擇亡是普梳遍存雁在的張，純愈種種慌植自賞然選聽擇會買使害珍蟲抗銅性基降因頻脊率快拖速增阻長，召所以稿混合匹種植慣能降資低害肚蟲的障抗性塑基因居頻率煤的增善長速翁率。【答案】(1侮)4(2罰)21(3蓬)復制(4后)D弓NA水解辱酶(5糠)表面悶無相犬應的職特異菜性受荷體(6減)抗性【即時掀鞏固1】(2騾00豎8·山東煎理綜)為擴釘大可革耕地盛面積查，增誘加糧極食產(chǎn)券量，前黃河倒三角索洲等惕鹽堿館地的薯開發(fā)為利用鑄備受牢關(guān)注。我掘國科學家徐應用序耐鹽厘基因差培育運了耐道鹽水里稻新唐品系摔。(1救)獲得饞耐鹽佩基因杜后，保構(gòu)建為重組DN滔A分子勝所用桿的限疊制性叢內(nèi)切飲酶作祖用于紋圖中幣的__膨__扶__燙__處，DN稻A連接抓酶作給用于__村__腥__爛__處。(填“a”或“b”)(2晨)將重岸組DN蒸A分子賺導入杰水稻娛受體育細胞更的常央用方較法有首農(nóng)桿粥菌轉(zhuǎn)及化法崖和__差__穿__歸__。(3裕)由導莊入目職的基暑因的緣瑞水稻闖細胞呼培養(yǎng)濟成植厲株需戴要利堤用__梨__財_技術(shù)害，該白技術(shù)庸的核缸心是__止__蛋__莫__和__除__輔__鴿__。(4辮)為了貢確定趙耐鹽站轉(zhuǎn)基高因水墾稻是懷否培糕育成君功，橡既要想用放巾射性叫同位半素標綠記的__喊__敬__如__作探恩針進次行分刑子雜問交檢風測，莊又要類用__灣__輔__庫__方法被從個芹體水獄平鑒林定水漿稻植太株的提耐鹽堂性。【解析】本題腹以社雪會的士熱點燭和科足技新?lián)芜M展緊為背貸景，璃通過堂轉(zhuǎn)基晌因水覆稻的蔽培育腰綜合丙考查宰了基氧因工塵程的藏基本縱工具悅、基題本操食作程伍序和板植物杰細胞毛工程揭等知廳識，貢屬于識識記學內(nèi)容將，要櫻求簡縫單。(1硬)限制鮮性核盲酸內(nèi)瓶切酶帶破壞陪的是心相鄰戒兩個顛脫氧各核苷件酸之海間的抓化學怎鍵。DN簽A連接貿(mào)酶的肅作用謎部位久也是爛該處泉，但繁作用蛙與限樂制酶掉正好昏相反謠。(2悲)重組DN友A分子愈導入汽植物取細胞半常用剖的方莖法是杰農(nóng)桿覆菌轉(zhuǎn)呈化法劍，也弊可以舉使用庸基因護槍法重或花阿粉管理通道幻玉法。(3女)目的洽基因敢的受餃體細逃胞是虎植物威體細襖胞或謹受精忘卵，悲因此聚，要驗經(jīng)過姨植物淹組織濁培養(yǎng)利過程循才能睬成為植巾株。龜該過倉程的貼核心哀是脫災分化升和再伶分化社。(4掠)目的偵基因麻是否殺導入輩受體侍細胞頓，用DN風A分子諷雜交繪技術(shù)惹進行巖檢測漲，即癢以帶烤有放獻射性盒的目稱的基干因的其單鏈驚為探嫩針，彈檢測遙受體順細胞聲中是鞭否含敞有能真與探辣針進胖行配賠對雜基交的DN兵A(目的慈基因)。檢裕測目攤的基跑因是汗否表母達，井可以久用個別體檢阻驗的旅方法,將植吵物栽錄培到駕高濃伴度鹽唯的環(huán)巧境中(如鹽蹄堿地)，然郊后觀膨察其嗚生活宮狀況托。【答案】(1燥)aa(2車)基因萬槍法(花粉漸管通奇道法)(3替)植物憶組織憲培養(yǎng)川脫趟分化(去分噴化)再分饞化(4凈)耐鹽柳基因(目的園基因)一定梁濃度演鹽水葡澆灌(移栽框到鹽弟堿地峽中)考點漠二蛋白算質(zhì)工帆程與墓基因嫩工程鳳的比哀較

項目區(qū)別與聯(lián)系蛋白質(zhì)工程基因工程區(qū)別過程預期蛋白質(zhì)功能―→設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)―→推測應有的氨基酸序列―→找到相對應的脫氧核苷酸序列獲取目的基因―→構(gòu)建基因表達載體―→將目的基因?qū)胧荏w細胞―→目的基因的檢測與鑒定實質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品結(jié)果可生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)只能生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系(1)蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎上延伸出來的第二代基因工程(2)基因工程中所利用的某些酶需要通過蛋白質(zhì)工程進行修飾、改造【案例2】狹20冊08年諾乓貝爾鞠化學央獎授慰予了當三位捕在研慢究綠虹色熒殊光蛋南白(G厭FP舒)方面漁做出毫突出目貢獻霜的科線學家初。綠努色熒懸光蛋民白能斑在藍懼光或厭紫外固光的濟激發(fā)坐下發(fā)夫出熒而光。牛借助GF愛P發(fā)出團的熒詢光就隔可以屋跟蹤防蛋白獄質(zhì)在循細胞嫁內(nèi)部棄的移濟動情播況，視幫助墾推斷欺蛋白誰質(zhì)的保功能煎。GF年P(guān)基因霧可作攪為目刃的基似因用撈于培割育綠叫色熒磁光小供鼠，夾如圖鼻表示碗培育冷綠色斃熒光朝小鼠嶄的基交本流們程：請根辦據(jù)上頌述材嘆料回供答下誤列問位題：(1暖)用于絮培育餅綠色傻熒光逢小鼠東的基仆因表臭達載汗體的恰組成剩必須圾有啟胃動子通、__憶__伐__增__、__津__雄__隸__和__楊__時__古__等。貓圖中蠶過程煩②常憲用的砍方法休是__敞__刺__勵__；過鐘程③頭利用捎的生魚物技賓術(shù)是__石__關(guān)__殖__；在快進行雞過程摔④前級，利菌用__狗__四__各__可以雀獲得爺數(shù)目平更多廟且基魄因型彎相同槐的綠赴色熒端光小昨鼠。(2咐)G算FP基因帖與目嬸的基噴因一非起構(gòu)墾建到狐載體短上不房誠影響美目的潔基因林的表桶達，疏也不爹影響棒由目率的基辦因控痛制合羅成的艙蛋白魚質(zhì)的僚結(jié)構(gòu)詢與功亮能，歌且對挨細胞說無毒吵性，臉因此GF勝P基因義可以泊作為盾基因縮慧表達霞載體遺上的__爽__貍__踩__。(3割)目前譽科學致家們碎通過__頑__江__工程駕制造著出了羊藍色鼠熒光槍蛋白療、黃牲色熒左光蛋粥白等券，該贈工程遠是直諒接改稠造GF酒P分子繭，還海是改秩造GF伙P基因協(xié)？__趴__鋤__刃__。該破工程俯的基峽本流模程是__掏__如__習__緞__召__鑰__?！窘馕觥炕驌伪磉_鍵載體恒由4部分禮組成脊，分地別是霧目的貫基因迷、啟爪動子并、終狀止子嶺、標僅記基止因。坡把目閑的基令因?qū)Ч嗜雱佑锸芡绑w細叛胞的梁常用銹方法禿是顯若微注嚇射技住術(shù)。準由受應精卵煎培養(yǎng)壁得到田早期孟胚胎西，這殲屬于求細胞政培養(yǎng)剪技術(shù)娛，可綢以利隆用胚居胎分慨割技國術(shù)由金一個親胚胎喉獲得拉多個棵胚胎膝。GF菜P基因凈不影破響目邀的基侮因控疲制合剝成的縮慧蛋白遮質(zhì)的蜻結(jié)構(gòu)描與功續(xù)能，巧且對艘細胞獻無毒慎性，釘又可蔑以發(fā)央出熒溜光，籃因此鼻可以抄作為靈標記職基因嚴。蛋帶白質(zhì)注工程傷是指講通過煌基因道修飾窩或基皂因合碑成，濟對現(xiàn)桌有蛋敵白質(zhì)端進行心改造賤，獲衛(wèi)得各盯種各喜樣的星自然孤界中亮沒有鍬的蛋祥白質(zhì)廚。蛋雹白質(zhì)油工程喚的基本繞流程讀：預帝期蛋憐白質(zhì)降功能→設計隱預期爆的蛋梳白質(zhì)券結(jié)構(gòu)→推測左應有壩的氨萬基酸率序列→找到潛相對托應基聞因的柜脫氧殃核苷潛酸序鍵列→修飾(合成)相應忍的基鼠因→表達舌出相獅應蛋麻白質(zhì)歸?！敬鸢浮?1貸)G守FP基因救終煌止子村標毫記基剝因?qū)W顯微騎注射裝法釀早期史胚胎激培養(yǎng)惠技術(shù)月胚魔胎分蓬割(2享)標記泰基因(3翻)蛋白桶質(zhì)GF截P基因殖預響期蛋顏白質(zhì)堅功能→設計謝預期皇的蛋千白質(zhì)界結(jié)構(gòu)→推測沈應有混的氨蛾基酸候序列→找到牲相對環(huán)應基椅因的象脫氧癥核苷腔酸序柔列→修飾(合成)相應新的基存因→表達肝出相棉應蛋畫白質(zhì)【即時悄鞏固2】胰島幕素可指以用全于治搶療糖會尿病俘，但憶是胰響島素春被注萄射到墾人體跡后，襲會