細(xì)菌性痢疾應(yīng)急處置技術(shù)方案(試行)

PAGE4-***細(xì)菌性痢疾應(yīng)急處置技術(shù)方案（試行）細(xì)菌性痢疾（BacillaryDysentery）簡(jiǎn)稱菌痢，是由志賀菌屬（Shigella）感染引起的一種常見(jiàn)傳染病，是《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》中規(guī)定報(bào)告的乙類傳染病。為加強(qiáng)對(duì)細(xì)菌性痢疾重大和突發(fā)疫情的快速反應(yīng)和應(yīng)急處理能力，保障廣大人民群眾的身體健康，維護(hù)社會(huì)穩(wěn)定和經(jīng)濟(jì)發(fā)展，特制定本方案。1疫情監(jiān)測(cè)報(bào)告和判定1.1疫情的監(jiān)測(cè)按照《浙江省細(xì)菌性痢疾監(jiān)測(cè)方案》（見(jiàn)附件）實(shí)施。沒(méi)有《浙江省細(xì)菌性痢疾監(jiān)測(cè)方案》改為按照《痢疾防治手冊(cè)》實(shí)施。1.2疫情的報(bào)告發(fā)現(xiàn)細(xì)菌性痢疾病例，在24小時(shí)內(nèi)填報(bào)傳染病報(bào)告卡，并進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)直報(bào)。發(fā)現(xiàn)細(xì)菌性痢疾暴發(fā)疫情，及時(shí)上報(bào)當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門和上級(jí)疾病預(yù)防控制中心。1.3疫情的判定1.3.1藍(lán)色疫情：同一學(xué)校、幼兒園、自然村、社區(qū)、企業(yè)、建筑工地等集體單位3天內(nèi)發(fā)生10例及以上病例，或縣（鄉(xiāng)鎮(zhèn)）范圍7天內(nèi)發(fā)現(xiàn)200例以內(nèi)病例1.3.2黃色疫情：縣（鄉(xiāng)鎮(zhèn)）范圍7天內(nèi)發(fā)現(xiàn)200例以上病例。1.3.3紅色疫情：縣（鄉(xiāng)鎮(zhèn)）范圍7天內(nèi)超過(guò)300例以上病例。（藍(lán)色疫情，黃色疫情，紅色疫情定為多少病例請(qǐng)省中心確定）2疫情的應(yīng)急響應(yīng)2.1藍(lán)色疫情的應(yīng)急響應(yīng)縣(鄉(xiāng)鎮(zhèn))疾病預(yù)防控制中心按《傳染病防治法》及相關(guān)法律、法規(guī)，在衛(wèi)生行政部門的領(lǐng)導(dǎo)下，負(fù)責(zé)細(xì)菌性痢疾疫情的處置，調(diào)集各類人員、物資、交通工具和相關(guān)設(shè)施、設(shè)備投入疫情處理工作。確定疫情嚴(yán)重程度，提出控制措施建議，立即向當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門和縣疾病預(yù)防控制中心報(bào)告。必要時(shí)請(qǐng)求縣級(jí)疾病預(yù)防控制中心提供技術(shù)支持。2.2黃色疫情的應(yīng)急響應(yīng)縣疾病預(yù)防控制中心參與細(xì)菌性痢疾應(yīng)急疫情的處置。根據(jù)實(shí)際工作需要，調(diào)集本中心各類人員、物資、交通工具和相關(guān)設(shè)施、設(shè)備投入應(yīng)急疫情處置工作。迅速準(zhǔn)確地了解疫情發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)、傳染源、發(fā)病情況，確定疫情的嚴(yán)重程度，分析疫情的發(fā)展趨勢(shì)，提出應(yīng)急技術(shù)措施建議，及時(shí)向縣衛(wèi)生局報(bào)告，同時(shí)報(bào)省疾病預(yù)防控制中心。必要時(shí)請(qǐng)求上級(jí)疾病預(yù)防控制中心提供技術(shù)支持。2.3紅色疫情的應(yīng)急響應(yīng)由省疾病預(yù)防控制中心組建應(yīng)急指揮部，組織協(xié)調(diào)各工作組參與細(xì)菌性痢疾重大疫情的處置。根據(jù)實(shí)際工作需要，調(diào)集本中心各類人員、物資、交通工具和相關(guān)設(shè)施、設(shè)備，投入重大疫情處置。并對(duì)疫情發(fā)生地疾病預(yù)防控制中心的疫情處理工作進(jìn)行技術(shù)指導(dǎo)、督查，迅速準(zhǔn)確地了解疫情發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)、傳染源、發(fā)病情況，確定疫情的嚴(yán)重程度，查明疫情發(fā)生的原因，分析疫情的發(fā)展趨勢(shì)，提出重大疫情應(yīng)急技術(shù)措施建議，及時(shí)向省衛(wèi)生廳報(bào)告，同時(shí)報(bào)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心。必要時(shí)請(qǐng)求國(guó)家CDC提供技術(shù)支持。3現(xiàn)場(chǎng)控制技術(shù)措施3.1流行病學(xué)調(diào)查3.1.1個(gè)案調(diào)查：對(duì)最早出現(xiàn)病人的地區(qū)和病人較集中的地區(qū)的病人進(jìn)行個(gè)案調(diào)查，（是否每例病人要進(jìn)行個(gè)案調(diào)查請(qǐng)省中心確定）根據(jù)病人的臨床癥狀、體征和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果以及流行病學(xué)特點(diǎn)，了解細(xì)菌性痢疾發(fā)病及疫源地現(xiàn)況，以便控制疫情蔓延，積累資料，作為當(dāng)?shù)亓餍胁W(xué)分析的基礎(chǔ)。3.1.2暴發(fā)調(diào)查：根據(jù)病人發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)和人群分布特點(diǎn)，把從現(xiàn)場(chǎng)獲得的資料加以對(duì)比，綜合分析暴發(fā)的影響因素和初步假設(shè)，制定針對(duì)性的控制方案。3.2病人和帶菌者隔離治療病人應(yīng)及時(shí)隔離治療，至臨床癥狀完全消失后，每天大便檢測(cè)一次，連續(xù)兩次檢測(cè)陰性方可解除隔離。帶菌者可以在家隔離治療，每日采便檢驗(yàn)一次，連續(xù)二次陰性解除隔離，重復(fù)陽(yáng)性者應(yīng)住院隔離治療，隔離治療期間嚴(yán)格執(zhí)行隨時(shí)消毒。3.3疑似病人處理醫(yī)療機(jī)構(gòu)診斷疑似病人立即留觀，在疫源搜索時(shí)發(fā)現(xiàn)疑似病人，應(yīng)立即送到指定醫(yī)療機(jī)構(gòu)隔離治療，未確診前暫按病人處理。排除菌痢診斷，按感染性腹瀉附件1細(xì)菌性痢疾暴發(fā)疫情調(diào)查指南附件2細(xì)菌性痢疾實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南附件3細(xì)菌性痢疾藥敏試驗(yàn)技術(shù)規(guī)范附件4細(xì)菌性痢疾菌種管理規(guī)范

附表1細(xì)菌性痢疾暴發(fā)疫情個(gè)案調(diào)查表地區(qū)國(guó)標(biāo)編碼□□□□□□□□病例編碼□□-□□□□1．一般情況1.1姓名，若為14歲以下兒童，家長(zhǎng)姓名1.2性別⑴男⑵女 □1.3年齡（歲、月） □□1.4職業(yè)□□⑴幼托兒童⑵散居兒童⑶學(xué)生⑷教師⑸保育員 ⑹餐飲食品人員⑺公共場(chǎng)所服務(wù)員⑻商務(wù)人員⑼醫(yī)務(wù)人員⑽工人⑾民工⑿農(nóng)民⒀牧民⒁漁（船）民（15）海員及長(zhǎng)途駕駛員（16）公務(wù)人員及職員⒄離退人員（18）家政、家務(wù)及待業(yè)（19）不詳（20）其他1.5文化程度□⑴學(xué)齡前兒童⑵文盲⑶小學(xué)⑷初中⑸高中⑹大學(xué)及以上⑺不詳1.6現(xiàn)住址戶口地1.7工作（學(xué)習(xí)）單位1.8聯(lián)系人聯(lián)系電話（辦）（宅）（手機(jī)）2．發(fā)病情況2.1發(fā)病日期年月日時(shí) □□□□□□□□2.2發(fā)病地點(diǎn)2.3首診時(shí)間年月日時(shí) □□□□□□□□2.4首診單位2.5診斷醫(yī)院2.6報(bào)告時(shí)間年月日時(shí) □□□□□□□□2.7住院時(shí)間年月日時(shí) □□□□□□□□2.8出院時(shí)間年月日時(shí) □□□□□□□□3．臨床資料3.1臨床癥狀3.1.1腹瀉⑴有⑵無(wú) □每天最多腹瀉次數(shù) □□3.1.2糞便性狀⑴水樣⑵粘液血便⑶膿血便⑷其他 □3.1.3里急后重：⑴有⑵無(wú) □3.1.4惡心⑴有⑵無(wú)□3.1.5嘔吐⑴有⑵無(wú) □3.1.6發(fā)熱⑴有⑵無(wú) □最高體溫℃ □□.□3.1.7嗜睡：⑴有⑵無(wú) □3.1.8昏迷：⑴有⑵無(wú)□3.1.9抽風(fēng)：⑴有⑵無(wú) □3.1.10其他癥狀：3.2診斷依據(jù)□3.2.1診斷依據(jù)⑴臨床⑵病原學(xué)⑶臨床+病原學(xué) 3.2.2糞便檢驗(yàn)結(jié)果日期鏡檢培養(yǎng)紅細(xì)胞白細(xì)胞志賀氏福氏鮑氏宋內(nèi)氏3.2.3病人轉(zhuǎn)歸⑴痊愈⑵帶菌⑶死亡 □4．流行病學(xué)調(diào)查（病前1周內(nèi)）4.1接觸過(guò)同樣病人⑴有⑵無(wú) □4.1.1接觸時(shí)間年月日時(shí) □□□□□□□□4.1.2接觸地點(diǎn)4.1.3接觸方式4.1.3.1同吃⑴有⑵無(wú) □4.1.3.2同?、庞孝茻o(wú) □4.1.3.3同玩⑴有⑵無(wú) □4.1.3.4同工作⑴有⑵無(wú) □4.1.3.5護(hù)理⑴有⑵無(wú) □4.1.3.6其他⑴有⑵無(wú) □4.2飲食情況4.2.1飲生水⑴有⑵無(wú) □4.2.1.1水源類型⑴井水⑵河水⑶塘水⑷自來(lái)水⑸其他 □4.2.2吃生冷食品⑴有⑵無(wú) □4.2.2.1生冷食品名稱購(gòu)買地點(diǎn)4.2.3熟食冷吃⑴有⑵無(wú) □4.2.3.1熟食品名稱購(gòu)買地點(diǎn)4.2.4其他可疑食品名稱購(gòu)買地點(diǎn)4.2.5在外就餐史⑴有⑵無(wú) □4.2.5.1就餐地點(diǎn)⑴排檔⑵個(gè)體餐館⑶賓館餐廳⑷其他 □就餐地點(diǎn)名稱4.2.6同餐者⑴有⑵無(wú)□4.2.6.1同餐人數(shù) □□□4.2.6.2同餐日期年月日時(shí) □□□□□□□□4.2.6.3同餐者發(fā)病：⑴有⑵無(wú) □同餐發(fā)病人數(shù)：4.2.7飯前洗手：⑴洗⑵不洗 □4.2.8便后洗手：⑴洗⑵不洗 □4.3.1小兒喂養(yǎng)方式：⑴母乳喂養(yǎng)⑵人工喂養(yǎng)⑶混合喂養(yǎng)□4.3.2母親衛(wèi)生習(xí)慣：⑴良好⑵一般⑶不好□5．控制措施5.1病人隔離⑴是⑵否 □5.2隔離地點(diǎn)⑴住院⑵家庭⑶其他 □5.3家庭隔離期間的消毒與治療5.3.1病人的飲食用具⑴分開(kāi)⑵未分 □5.3.2飲食用具消毒方法⑴煮沸⑵清洗⑶消毒液名稱 □5.3.3排泄物⑴未處理⑵處理處理方法 □5.3.4治療情況⑴連續(xù)服藥⑵間歇服藥⑶未服 □5．4患病期間暫時(shí)調(diào)離工作崗位⑴是⑵否 □5．5密切接觸者登記：姓名性別年齡與患者關(guān)系接觸方式發(fā)病日期6．小結(jié)調(diào)查者單位：調(diào)查者：審查者：調(diào)查日期：（填表說(shuō)明：病例編碼第一、二位填年號(hào)，后四位填流水號(hào)。）附表2細(xì)菌性痢疾糞便樣本采樣登記表監(jiān)測(cè)地區(qū)：縣縣（鄉(xiāng)鎮(zhèn)）省級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□縣級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□其他□病人編號(hào)姓名性別年齡家庭住址臨床癥狀發(fā)熱（℃）糞便性狀糞便鏡檢臨床診斷發(fā)病日期采樣日期病原分離及血清型鑒定結(jié)果備注ABCD未檢出注：①糞便性狀：1.鮮血樣便2.血便相混3.膿血便4.黑便5.粘液便6.米泔水樣便7.水樣便8.稀便臨床癥狀（可多選）：1腹瀉、2腹痛、3左下腹部壓痛4嘔吐5里急后重6腦水腫表現(xiàn)，如煩燥不安、驚厥7有感染性休克癥，如面色蒼白、四肢厥冷、脈細(xì)速8突然高熱發(fā)熱體溫填寫(xiě)病程中最高一次體溫糞便鏡檢參考國(guó)家診斷標(biāo)準(zhǔn)，填寫(xiě)陰性或陽(yáng)性填表單位：填表日期：附表3細(xì)菌性痢疾病原分離結(jié)果報(bào)表監(jiān)測(cè)地區(qū)：縣縣（鄉(xiāng)鎮(zhèn)）省級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□縣級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□其他□監(jiān)測(cè)點(diǎn)采樣數(shù)痢疾疑似病例病原分離及血清型鑒定結(jié)果痢疾臨床診斷病例（糞便鏡檢陽(yáng)性）其他腹瀉病例（糞便鏡檢陰性）ABCD實(shí)驗(yàn)室確診病例未檢出實(shí)驗(yàn)室確診病例未檢出填表單位：填表日期：附表4細(xì)菌性痢疾菌株鑒定表監(jiān)測(cè)地區(qū)：縣縣（鄉(xiāng)鎮(zhèn)）省級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□縣級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□其他□標(biāo)本編號(hào)患者姓名剛果紅平板菌落顏色SS平板菌落形態(tài)HE平板菌落形態(tài)生化試驗(yàn)四種多價(jià)群多價(jià)血清學(xué)分型分型結(jié)果檢測(cè)日期備注KIAMIUK/A產(chǎn)氣H2S動(dòng)力靛基質(zhì)尿素痢疾志賀菌福氏志賀菌鮑氏志賀菌宋內(nèi)志賀菌型抗原群抗原3、467檢測(cè)單位：檢測(cè)者：填表單位：填表日期：附表5細(xì)菌性痢疾菌株藥敏結(jié)果記錄表監(jiān)測(cè)地區(qū)：縣縣（鄉(xiāng)鎮(zhèn)）省級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□縣級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□其他□菌株號(hào)樣品名稱血清型菌株分離日期藥敏試驗(yàn)日期藥敏結(jié)果耐藥數(shù)中介數(shù)敏感數(shù)AMPAMCCFTCTXGENNALCIPTBTRFASMZ抑菌環(huán)結(jié)果抑菌環(huán)結(jié)果抑菌環(huán)結(jié)果抑菌環(huán)結(jié)果抑菌環(huán)結(jié)果抑菌環(huán)結(jié)果抑菌環(huán)結(jié)果抑菌環(huán)耐藥性抑菌環(huán)耐藥性抑菌環(huán)耐藥性說(shuō)明：每批藥敏試驗(yàn)必須同時(shí)做參比菌株大腸埃希菌ATCC25922，并將結(jié)果記錄在本表格內(nèi)。樣品名稱盡量詳細(xì)，如腹瀉者糞便，病人血液，生牡蠣，熟豬肉等?？股匦杞o出中英文全名及英文縮寫(xiě),表格中使用英文縮寫(xiě)。氨芐西林（AMP）、阿莫西林（AMC）、頭孢噻吩（CFT）、頭孢噻肟（CTX）、慶大霉素（GEN）、萘啶酸（NAL）、環(huán)丙沙星（CIR）、四環(huán)素（TBT）、利福平（RFA）、復(fù)方新諾明（SMZ）。藥敏結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：NCCLs手冊(cè)2005版。抑菌環(huán)記錄單位mm。藥敏結(jié)果記錄：S（敏感）、R（耐藥）、I（中介）。檢測(cè)單位：檢測(cè)者：填表單位：填表日期：附表6細(xì)菌性痢疾菌株藥敏結(jié)果匯總報(bào)表監(jiān)測(cè)地區(qū)：縣縣（鄉(xiāng)鎮(zhèn)）省級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□縣級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□其他□抗菌素名稱檢測(cè)菌株數(shù)耐藥菌株數(shù)耐藥率（%）敏感菌株數(shù)敏感率（%）備注氨芐西林（AMP）阿莫西林（AMC）頭孢噻吩（CFT）頭孢噻肟（CTX）慶大霉素（GEN）萘啶酸（NAL）環(huán)丙沙星（CIR）四環(huán)素（TBT）利福平（RFA）復(fù)方新諾明（SMZ）檢測(cè)單位：檢測(cè)者：填表單位：填表日期：附表7細(xì)菌性痢疾監(jiān)測(cè)菌株登記表監(jiān)測(cè)地區(qū)：縣縣（鄉(xiāng)鎮(zhèn)）省級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□縣級(jí)監(jiān)測(cè)點(diǎn)□其他□序號(hào)菌種號(hào)發(fā)病日期采樣日期分離日期保存日期菌株來(lái)源血清學(xué)分型保存基質(zhì)和溫度備注患者其他（環(huán)境、食品等）基質(zhì)溫度暴發(fā)來(lái)源散發(fā)來(lái)源姓名/年齡家庭地址暴發(fā)來(lái)源散發(fā)來(lái)源名稱上送單位：上送者：上送時(shí)間：接受單位：接受者：接收時(shí)間：附表8細(xì)菌性痢疾監(jiān)測(cè)防制工作檢查考核登記表被檢查單位檢查日期檢查人員檢查項(xiàng)目具體內(nèi)容檢查結(jié)果存在問(wèn)題備注組織管理機(jī)構(gòu)人員有無(wú)具體承擔(dān)監(jiān)測(cè)工作任務(wù)的科室有無(wú)明確負(fù)責(zé)人有無(wú)專職承擔(dān)監(jiān)測(cè)任務(wù)的專業(yè)人員培訓(xùn)有無(wú)開(kāi)展本級(jí)培訓(xùn)有無(wú)接受上級(jí)培訓(xùn)經(jīng)費(fèi)使用有無(wú)上級(jí)補(bǔ)助監(jiān)測(cè)經(jīng)費(fèi)經(jīng)費(fèi)使用情況（項(xiàng)目及額度）監(jiān)測(cè)工作開(kāi)展情況一般資料收集有無(wú)收集一般資料，資料是否完整疫情報(bào)告與調(diào)查報(bào)告及時(shí)性、調(diào)查處置及時(shí)性和規(guī)范性暴發(fā)疫情監(jiān)測(cè)有無(wú)按方案開(kāi)展病原學(xué)監(jiān)測(cè)有無(wú)按方案開(kāi)展監(jiān)測(cè)點(diǎn)監(jiān)測(cè)工作有無(wú)按方案開(kāi)展資料質(zhì)量資料完整性有無(wú)實(shí)施計(jì)劃和年度總結(jié)有無(wú)開(kāi)展各項(xiàng)工作的記錄和過(guò)程性材料（完整性）各類監(jiān)測(cè)報(bào)表是否齊全上報(bào)及時(shí)性各類監(jiān)測(cè)報(bào)表、總結(jié)、調(diào)查報(bào)告是否及時(shí)上報(bào)（查上報(bào)記錄）PAGEPAGE21附件1細(xì)菌性痢疾暴發(fā)疫情調(diào)查指南1、調(diào)查準(zhǔn)備通過(guò)上報(bào)信息、電話交流對(duì)此次暴發(fā)的基本情況和分布特征做一般性了解，確定調(diào)查組人員，明確調(diào)查任務(wù)、內(nèi)容與方法，準(zhǔn)備使用的調(diào)查表格，相應(yīng)的檢驗(yàn)試劑和儀器、個(gè)人防護(hù)與消殺設(shè)備趕赴現(xiàn)場(chǎng)。2、核實(shí)診斷到達(dá)現(xiàn)場(chǎng)后首先通過(guò)訪視病人、醫(yī)生和能提供病人患病信息的人，檢查實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，對(duì)臨床標(biāo)本或獲得的分離菌株應(yīng)送平行的或上一級(jí)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室重復(fù)檢測(cè)，以進(jìn)行診斷的核實(shí)。3、調(diào)查暴發(fā)的基本情況（1）暴發(fā)開(kāi)始的時(shí)間，首發(fā)病例起始及發(fā)展過(guò)程。（2）波及范圍，病例數(shù)及三間分布。（3）發(fā)病地近期人群的生活和活動(dòng)等情況（飲食、水源，集會(huì)、外出交往活動(dòng)等），有無(wú)與本次暴發(fā)發(fā)生的因素。4、確定暴發(fā)，形成發(fā)病原因假設(shè)經(jīng)初步調(diào)查分析明確診斷，掌握病例的數(shù)量和分布及可能的原因。判定是否為暴發(fā)及嚴(yán)重程度，形成暴發(fā)原因假設(shè)。5、確定暴發(fā)病例（1）確定病例與密切接觸者定義：根據(jù)已知暴發(fā)病例的主要癥狀、有無(wú)接觸史、體征和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，結(jié)合本次暴發(fā)的時(shí)間、地點(diǎn)，參考痢疾的診斷標(biāo)準(zhǔn)確定疑似病例、診斷病例、密切接觸者的定義。（2）對(duì)發(fā)現(xiàn)的病例進(jìn)行甄別，確定是否為痢疾病例，是否為此次暴發(fā)的病例。6、初步分析（1）流行特征分析三間分布分析。（2）傳播方式分析找出共同的暴露因素及其他傳播方式。（3）暴發(fā)原因分析圍繞病人感染時(shí)間前后，追查并對(duì)比感染和未感染人群的生活、生產(chǎn)及活動(dòng)情況，找出與感染有關(guān)的因素，推斷出主要的傳播因素及傳染源。7、采取防治措施針對(duì)控制傳染源與切斷傳播途徑，采取綜合性防治措施，做好三管一滅（管水、管糞、管飲食、消滅蒼蠅），對(duì)疫點(diǎn)進(jìn)行消毒，對(duì)健康人群開(kāi)展針對(duì)性的健康教育。8、補(bǔ)充調(diào)查隨調(diào)查的深入、假設(shè)的提出和驗(yàn)證的需求、以及控制和預(yù)防工作的展開(kāi)，根據(jù)需要及時(shí)開(kāi)展補(bǔ)充調(diào)查，包括流行病學(xué)調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。確定暴發(fā)的來(lái)源、傳播因素，以及采取措施后的發(fā)病特點(diǎn)，驗(yàn)證有關(guān)暴發(fā)原因假設(shè)。9、調(diào)查報(bào)告報(bào)告內(nèi)容包括：疫情概況、首發(fā)病例或指示病例的描述、流行基本特征、臨床特征、傳播因素、傳播鏈和流行趨勢(shì)分析、菌株的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目和結(jié)果、感染譜的分析、控制措施和效果評(píng)估等。

附件2細(xì)菌性痢疾實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南一、標(biāo)本采集、運(yùn)送、包裝、保存、接收可采用便盒留便、肛拭或采便管采便。便盒留便：留取糞便時(shí)應(yīng)采集新鮮糞便的膿血部分、粘液部分、水樣便或稀便。便量1～5g。

集體腹瀉或食源性暴發(fā)患者糞便采集的數(shù)額，應(yīng)根據(jù)患者人數(shù)的多少，決定采取標(biāo)本的數(shù)量。當(dāng)懷疑患者為菌血癥時(shí)，應(yīng)以無(wú)菌操作，從靜脈血管采取10～15mL血液，放入加有EDTA抗凝劑瓶中送檢。所采取的糞便標(biāo)本應(yīng)盡快送檢，不得超過(guò)2h送到化驗(yàn)室，否則標(biāo)本應(yīng)放入Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基中，運(yùn)送時(shí)間超過(guò)2h者，應(yīng)在冰浴條件下送檢。送交分型分析菌株的接收要求：1)經(jīng)過(guò)分純的沒(méi)有污染的菌株;2)分離菌株應(yīng)該用甘油半固體保存；3)與分離菌株相對(duì)應(yīng)的患者的臨床癥狀和流行病學(xué)資料；4)經(jīng)血清和生化證實(shí)為志賀菌。二、糞便標(biāo)本志賀菌的分離方法1、分離方法（1）用接種環(huán)多點(diǎn)沾取標(biāo)本病變部分，直接劃線分離于SS、EMB（或HE、麥康凱）瓊脂平板。37℃培養(yǎng)24h。

（2）血液培養(yǎng)

將采取的抗凝血液標(biāo)本，放入葡萄糖肉湯，37℃培養(yǎng)，逐日觀察結(jié)果。一般1～3d內(nèi)陽(yáng)性較高。為提高陽(yáng)性檢出率，可以在標(biāo)本中加入0.5mLOP乳化劑（聚乙二醇辛基苯基醚），使血球溶解，以提高陽(yáng)性檢出率。

（3）挑選可疑菌落

從37℃培養(yǎng)16～24h的分離培養(yǎng)基上，觀察挑選可疑菌落，其形態(tài)為無(wú)色，半透明，圓形，濕潤(rùn)、光滑、突起，大小為1～2mm；挑選可疑菌落，接種TSI和葡萄糖半固體或綜合培養(yǎng)基，先劃線后穿刺，做好標(biāo)記，放37℃培養(yǎng)16h以上，觀察結(jié)果。

2、初步生化反應(yīng)

志賀菌屬在TSI上的生化反應(yīng)為：斜面紅色，底層產(chǎn)酸黃色，不產(chǎn)氣。在葡萄糖半固體管內(nèi)產(chǎn)酸為黃色，不產(chǎn)氣，無(wú)動(dòng)力。在綜合培養(yǎng)基上為：斜面紅色中立段產(chǎn)酸黃色，底層綠色，無(wú)動(dòng)力，福氏志賀菌6型在上述三種培養(yǎng)基中，有時(shí)可產(chǎn)生少量氣體。

3、生化學(xué)鑒定

（1）凡屬志賀氏菌屬的培養(yǎng)物，應(yīng)符合表Al所列的生化特性。

（2）志賀菌屬分為四個(gè)生化群。血清學(xué)分型與生化反應(yīng)不一致者，均為非志賀菌。

（3）生化反應(yīng)或血清學(xué)反應(yīng)可疑的培養(yǎng)物，均應(yīng)做革蘭氏染色鏡檢，并加做V.P、苯丙氨酸、西蒙氏檸檬酸鹽、賴氨酸和葡萄糖n銨試驗(yàn),與有關(guān)的細(xì)菌相鑒別。表Al志賀氏菌屬系統(tǒng)生化反應(yīng)項(xiàng)目ABCD項(xiàng)目ABCD靛基質(zhì)dd(-)-水揚(yáng)素甲基紅++++D-側(cè)金盞花醇V.P.+肌醇Simmon’s檸檬酸鹽D-山梨醇ddd-硫化氫L-阿拉伯糖dd++尿素棉子糖-d--苯丙氨酸L-鼠李糖d--(+)賴氨酸麥牙糖(-)d（-)(+)精氨酸--(-)-D-木膠糖--(-)-鳥(niǎo)氨酸覃糖(+）d(+)+動(dòng)力纖維二糖明膠α-甲基-D-葡萄糖苷KCN七葉靈丙二酸鹽密二糖-d(-)(-)D-葡萄糖產(chǎn)酸++++D-阿拉伯糖D-葡萄糖產(chǎn)氣ONPGd--+乳糖(d)D-苷露糖++++蔗糖D-苷露醇-+++衛(wèi)矛醇注：十,90％～100％陽(yáng)性；（＋），76％～89％陽(yáng)性；

d,26／～75％陰性；（d），遲緩陽(yáng)性，72h以上。

-，0～10％陰性；（-），11％～25％陰性；

附件3細(xì)菌性痢疾藥敏試驗(yàn)技術(shù)規(guī)范藥敏試驗(yàn)根據(jù)美國(guó)臨床標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS）推薦的K-B瓊脂法進(jìn)行，藥敏紙片選擇中國(guó)生物制品鑒定所藥敏紙片，試驗(yàn)所選擇藥物必須包括下列抗生素：氨芐西林（AMP），阿莫西林/克拉維酸（AMC），頭孢噻吩（CFT），頭孢噻肟（CTX），慶大霉素（GEN），萘啶酸（NAL），諾氟沙星（NOR），四環(huán)素（TBT），利福平（RFA），復(fù)方新喏明（SMZ）。1操作方法：（1）將待檢菌接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，37℃培養(yǎng)16～18小時(shí)，然后挑取普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上的純培養(yǎng)菌落，懸于3ml生理鹽水中，混勻后與菌液比濁管比濁。以有黑字的白紙為背景，調(diào)整濁度與比濁管（0.5麥?zhǔn)蠁挝唬┫嗤?。?）用無(wú)菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上擠壓去掉多余菌液。用棉拭子涂布整個(gè)M-H培養(yǎng)基表面，反復(fù)幾次，每次將平板旋轉(zhuǎn)60度，最后沿周邊繞兩圈，保證涂均勻。（3）待平板上的水分被瓊脂完全吸收后再貼紙片。用無(wú)菌鑷子取藥敏紙片貼在平板表面，紙片一貼就不可再拿起。每個(gè)平板貼5張紙片，每張紙片間距不少于24mm，紙片中心距平皿邊緣不少于15mm。在菌接種后15分鐘內(nèi)貼完紙片。（4）將平板反轉(zhuǎn)，孵育18～24小時(shí)后取出，用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈直徑，從平板背面測(cè)量最接近的整數(shù)毫米數(shù)并記錄（附表5）。抑菌環(huán)的邊緣以肉眼見(jiàn)不到細(xì)菌明顯生長(zhǎng)為限。有的菌株可出現(xiàn)蔓延生長(zhǎng)，進(jìn)入抑菌環(huán)，磺胺藥在抑菌環(huán)內(nèi)出現(xiàn)輕微生長(zhǎng)，這些都不作為抑菌環(huán)的邊緣。結(jié)果判斷依據(jù)鑒定所藥敏紙片判定標(biāo)準(zhǔn)。（5）每次藥敏試驗(yàn)必須用ATCC25922大腸桿菌做質(zhì)控。只有當(dāng)質(zhì)控菌株的抑菌圈直徑在允許范圍內(nèi)測(cè)試菌株的結(jié)果才可以報(bào)告。0.5麥?zhǔn)媳葷峁芘渲品椒ǎ?.048MBaCL2(1.17%W/VBaCL2.2H2O)0.5ml0.36NH2SO4(1%,V/V)99.5ml將二液混合，置螺口試管中，放室溫暗處保存。用前混勻。有效期為6個(gè)月。2注意事項(xiàng)：(1)制備MH瓊脂平板應(yīng)用直徑90mm平皿，在水平的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上傾注。瓊脂厚為4±0.5mm（約