生理科學(xué)實(shí)驗(yàn)課件

121遠(yuǎn)曲小管和集合管對(duì)鈉離子的重吸收主要受ALD醛固酮-3160-4血液流經(jīng)腎小球時(shí)，促進(jìn)血漿濾出的直接動(dòng)力是5通過(guò)腎臟濾過(guò)的葡萄糖重吸收的部位：6NaCl和水絕大部分在何處重吸收：7遠(yuǎn)曲小管和集合管對(duì)水的重吸什么影響80.9%NaCl20ml,其尿量變化原因 的比10NaCl1112血液流經(jīng)腎小球時(shí)，促進(jìn)血血漿濾出的直接動(dòng)力是（1CO肝血顏色櫻紅用長(zhǎng)膠管增加無(wú)效腔，家兔呼吸會(huì)發(fā)生什么變化頻率—升--幅度-升4h,在固定間隔和劑量多次給藥后，達(dá)到血漿穩(wěn)態(tài)濃度的時(shí)間20h任氏 在觀察不同刺激強(qiáng)度刺激神經(jīng)對(duì)肌肉收響時(shí)，刺激模式為單210.01%NE0.3ml，使其亞硝酸鹽---小劑量美升高，原因：3S在家兔動(dòng)脈血壓調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)中，刺激主動(dòng)脈神經(jīng)中樞端，血壓的變化是降低0.3ml去甲血壓的變化是先升后降 190.65%NACL家兔左側(cè)心迷走神經(jīng)主要支配心臟的交界處的組啟動(dòng)骨骼肌發(fā)生Vd25腓腸肌肌腱與張力換能器間連線的張力對(duì)腓腸肌的收縮力量有影N2骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn) ACH，蛙心心率減慢收縮力減給家兔靜脈注射---缺氧實(shí)驗(yàn)中，會(huì)出現(xiàn)的是密閉瓶任氏液的組成成分與組織液相似，錯(cuò)誤的是相似的膠體滲透家兔酸模型是否制作成功，對(duì)照：同體對(duì)1%6.6ml25%animalreseach實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式及內(nèi)容1.實(shí)驗(yàn)報(bào)告題目2.作者署名3. 4.5.引言或背景6.材料和方法7.結(jié)果8.討論9.結(jié)論10.參考文獻(xiàn)1.Animal2.Equipment3.Information4.Reagent近交系近交系一般是指采用20代以上全同胞兄弟妹妹或親子（與年青的父母）進(jìn)行交配，而培養(yǎng)出來(lái)的遺傳純化的品系（F＝98.6%）雜交一代由兩個(gè)近交系雜交產(chǎn)生的子一代稱為雜交一代。它既有近交系動(dòng)物的特點(diǎn)，又封閉群在同一血緣品系內(nèi)，不以近交方式，而進(jìn)行隨機(jī)交配繁衍，經(jīng)五年以上育成的相突變品系在育種過(guò)程中由于單個(gè)的突變或?qū)⒛硞€(gè)導(dǎo)入或通過(guò)多次回交“留種”，而建立一個(gè)同類突變品系，此類中有具同樣遺傳缺陷或。非純系即一般任意交配繁殖的雜種動(dòng)物。雜種動(dòng)物具有旺盛的生命力，適應(yīng)性強(qiáng)，繁殖包含有最敏感的與最不敏感的兩種的。普通動(dòng)物（Conventionalanimals,CV）清潔動(dòng)物（CleananimalsCL）又稱二級(jí)動(dòng)物，除不帶有普通動(dòng)物應(yīng)排除的病原體外，還無(wú)特殊病原體動(dòng)物（Specificpathogensanimal，SPF動(dòng)物）SPF動(dòng)物又稱三級(jí)動(dòng)物，無(wú)菌動(dòng)物（Germanimals，GF）和悉生動(dòng)物（Gnotobioticanimals，GN）四級(jí)動(dòng)物。無(wú) 應(yīng)注意影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果的各種因素。醫(yī)學(xué)研究盡可能選擇其結(jié)故常用于發(fā)熱、熱原檢定、解熱藥和過(guò)熱的實(shí)驗(yàn)。狗、大鼠、家兔常用于高血壓的研究。 。例如：DBA／2小鼠100％的可發(fā)生聽源性癲癇發(fā)作；而C57BL小鼠根本不出現(xiàn)這種反應(yīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)的選擇 同一品系的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，對(duì)同一刺激物反應(yīng)存在著差異、體重、、生理狀態(tài)和健康情況不同，往往導(dǎo)致對(duì)同一刺激的不同結(jié)果。。同樣的藥對(duì)不同會(huì)造成完全相反的結(jié)（100mV干擾信號(hào)：50Hz交流電干擾信號(hào)，生物電信號(hào)的相互干擾ECG7mV，電極電位為直流成分，用直流放大器時(shí)，信號(hào)直流成分?jǐn)_，在高放大倍數(shù)時(shí)，使放大器飽和。電磁輻射干擾50Hz50Hz及生物電信號(hào)的相互干擾肌電、皮膚電干擾心電，心電、皮膚電干擾腦電等。 頻率高于轉(zhuǎn)折頻率（fL)的信號(hào)被放大，頻率低于fL的信號(hào)被衰減；高通濾波 8信號(hào)輸入方式雙端輸入方式：測(cè)定的是兩點(diǎn)之間的電位差；能力強(qiáng)單端輸入方式：測(cè)定的是對(duì)地電位；能力差雙端輸入方式信號(hào)（差分輸入9 血壓換能器定標(biāo)用水銀檢壓計(jì);呼吸流量換能器定標(biāo)用容積積分法;電信號(hào)定標(biāo)用信號(hào)發(fā)生器觸發(fā)（同步）概念???為達(dá)到目標(biāo)而設(shè)計(jì)方案和技術(shù)線 將實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果撰寫成實(shí)驗(yàn)報(bào)告 （一）動(dòng)物的種屬極其生理特點(diǎn)適合于穩(wěn)定可靠模型如：發(fā)熱模型：家兔；休克模型：狗；大鼠不能其它種系營(yíng)養(yǎng)健康體重主要因素（實(shí)驗(yàn)指標(biāo)性質(zhì)：機(jī)能學(xué)方法，形態(tài)學(xué)方法等。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)在實(shí)驗(yàn)觀察中用于反映研研對(duì)象中某些可被檢測(cè)儀器或研究者感知的特征①特異 高血壓~舒張 ④精確度重復(fù)性好①計(jì)量資 xstF②計(jì)數(shù)資 有或無(wú)（、陽(yáng)性實(shí)驗(yàn)效率較低，實(shí)驗(yàn)要求的例數(shù)較多，統(tǒng)計(jì)描述主要為率，統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)主要為2（二） () 相互對(duì)照歷史對(duì)照用以往的研究結(jié)果或歷史文獻(xiàn)資料為對(duì)照(齊同性問(wèn)題)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法：完全隨機(jī)化設(shè)計(jì)、配對(duì)設(shè)計(jì)、配伍組設(shè)計(jì)、均衡不完全配伍組設(shè)計(jì)、拉丁方設(shè)計(jì)、序貫實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、正交設(shè)計(jì)重現(xiàn) 表示差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著意義，不可重現(xiàn)的概率小于5%，重現(xiàn)性好。 表示差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著性意義，不可重現(xiàn)的概率小于等于1%,重現(xiàn)性 重復(fù)數(shù)過(guò)少不行，真實(shí)情況；重復(fù)數(shù)過(guò)多也不必要，浪費(fèi)（一）平均 標(biāo)準(zhǔn) 表示觀察值分布的離散程標(biāo)準(zhǔn) 抽樣誤差由于抽樣而引起的樣本均數(shù)與總體均數(shù)之間的差別，它的大小通常用樣本均數(shù) 如選擇t值為統(tǒng)計(jì)確定概率tP P>0.05差別無(wú)顯著性，0.05>P>0.01差別有顯著性，P<0.01差別有高度5.t（1）配對(duì)資料（實(shí)驗(yàn)前后）的比較（二）123.兩樣本率差異的顯著性檢驗(yàn)第一部分：缺氧動(dòng)物模型及中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能抑制和低溫對(duì)缺氧的影響Hypoxia：當(dāng)組織得不到充足的氧（供氧不足）或不能充分利用氧（利用氧）時(shí)，引起氧分壓（PartialPressureofOxygen氧容量（OxygenCapacityCO2氧含量（OxygenContent,CO2氧飽和度（OxygenSaturationSO21實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停簝煞N缺氧動(dòng)物模型的1）低缺氧2）血液性缺氧a.一氧化碳性缺氧b.亞硝酸鹽性缺氧2特殊藥物使用和需要注意的地方為中樞多巴胺受體的阻斷劑抑制作用：抗、鎮(zhèn)吐、能增強(qiáng)、麻醉、作用、阻斷外周α-腎上腺素受體鈉石灰（sodalime)0.1ml/10（0.25%乏氧性、血液性缺氧動(dòng)物模型及NaNO2的方法。PaCO2>60mmHg=>化學(xué)感受器＋（頸動(dòng)脈體＋主動(dòng)脈體）=>呼吸加深加快CO2%CO=>每5分鐘記錄呼吸頻率；小鼠行為、皮膚黏膜顏色、時(shí)間5%NaNO20.2ml10.2ml人工合成的鎮(zhèn)痛藥：哌替啶（pethidineorDolantinPRotundineDAmRNA的0.25%dolantin0.1ml/10g，0.25%rotundine 測(cè)痛閾值(painthreshold)0min、15min、30min、60min各測(cè)痛閾值一dolantindolantinrotundinedolantin、rotundine((M膽堿受體激動(dòng)作用。AchM-Ca2+通道開放，Ca2+內(nèi)流↑，肌漿[Ca2+]↑，平滑肌收縮幅度增高。大劑量時(shí)也有.N膽堿受體激動(dòng)作阿托品：MM-M-受M-受體的激動(dòng)作用。組胺:H1G蛋白-：H1H1受體的激動(dòng)作用。一方面BaCl2興奮膽堿能N受體，N受體有神經(jīng)型和肌肉型，NNa+、K+、（1g1-1.5cm的小段。Ach、阿托品、His抗癜癇藥sodiumphenobarbital（比妥鈉）預(yù)防性對(duì)抗電刺激引起的小鼠驚厥作藥物。目前最常用的方法是最大電休克發(fā)作實(shí)驗(yàn)(alelectroshockseizuretest,MES)。一涉及的藥物特性：比妥（sodiumphenobarbital)的作用機(jī)制試劑：0.5%sodiumphenobarbital0.1ml/10g意大利學(xué)者伽爾伐尼L.Galvani(1737～1798年) N奮，肌肉的收縮反應(yīng)也相應(yīng)逐步增大，強(qiáng)度超過(guò)閾值的刺激叫閾上刺激(suprathresholdcontraction)的最小刺激強(qiáng)度的刺激稱為最大刺激(alstimulus)。。時(shí)間間隔超過(guò)肌肉單次收縮的持續(xù)時(shí)間，則肌肉的反應(yīng)表現(xiàn)為一連串的單收縮 pletetetanus)，以后成為完全強(qiáng)直收縮(completetetanus)。“實(shí)驗(yàn)”菜單中選擇生理科學(xué)實(shí)驗(yàn)中的“不應(yīng)期觀察”進(jìn)入實(shí)驗(yàn)狀態(tài)。儀器參數(shù)：1通道時(shí)間常1ms0.5、2、20ms，同步觸發(fā)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果刺激頻率為Ficts±sHz至Ficte±sHz、完全強(qiáng)直收縮的刺激頻率為Fcts±sHz至±sHz。不完全強(qiáng)直最大收縮力Tict±s(g)和完全強(qiáng)直最大收縮力Tct±s(g)顯著高于單收縮的最大收縮力為Tt±s(g)（p<0.05。有效不應(yīng) 很大差異，其閾值也有較大差異。單個(gè)恒定時(shí)間的電壓刺激坐骨神經(jīng)干，電壓低于閾值刺激偽跡(Stimulusartifact)刺激電流通過(guò)導(dǎo)電介質(zhì)擴(kuò)散至兩引導(dǎo)電極而形成的電位差信號(hào)。藥品：任氏液、（與Na+通道內(nèi)側(cè)受體結(jié)合，使通道蛋白質(zhì)構(gòu)象變化，促使Na+通道失活狀態(tài)關(guān)閉 用1.0V電壓，波寬0.1ms的單個(gè)激刺激神經(jīng)干末梢端，測(cè)定中樞端BAP正、負(fù)向振 用1.0V電壓，波寬0.1ms的單個(gè)激刺激神經(jīng)干中樞端測(cè)定第1對(duì)引導(dǎo)電極間距為102030mm時(shí)的BAP正相振幅和時(shí)程。 用1.0V電壓，波寬0.1ms的單個(gè)激刺激神經(jīng)干中樞端，測(cè)定末梢端BAP正、負(fù)相振幅和時(shí)程。興奮傳導(dǎo)速度的測(cè)定用1.0V電壓，波寬0.1ms的單個(gè)激刺激神經(jīng)干中樞端，測(cè)定12CAP起點(diǎn)的時(shí)間差Δt，根據(jù)υ＝SR1R2-/ΔtAP測(cè)定單相動(dòng)作電位（monophasicactionpotential，MAP）用鑷子夾傷對(duì)1對(duì)引導(dǎo)電極間的神經(jīng)干，然后用1.0V電壓，波寬0.1ms的單個(gè)激刺激神經(jīng)干中樞端，測(cè)定末梢端MAP振幅和時(shí)程。 步長(zhǎng)0.01V增加，刺激電壓每增加一次刺激神經(jīng)干一次，并記錄刺激電壓和MAP振幅。神經(jīng)干引導(dǎo)所獲得復(fù)合動(dòng)作電位（compoundactionpotential(CAP）與單神經(jīng)纖維引導(dǎo)的測(cè)定KCl處理前后MAP振幅 刺激電壓1.0V，刺激波寬0.1ms，記錄3mol/L KCl處理前，處理后2′時(shí)MAP的振幅。procaine處理前后BAP振幅1.0V0.1ms45BAP結(jié)論：3.21.0V0.1ms時(shí)，中樞端引導(dǎo)的動(dòng)作電位正相和負(fù)相振幅分別為Ac1±smV和Ac2±smV，Ac1大于Ac2，兩者有（或無(wú)）顯著性差異（p<0.05p>0.05)；動(dòng)作電位正相時(shí)程Dc1±sms顯著短于負(fù)相時(shí)程Dc2±sms，兩者有（或無(wú)）顯著性差異（p<0.05p>0.05)，末梢端引導(dǎo)的動(dòng)作電位正相振幅Ap1±smV大于負(fù)相振幅Ap2±smV（或無(wú)）顯著性差異（p<0.05p>0.05)；動(dòng)作電位正相時(shí)程±sms顯著短于負(fù)相時(shí)程Dp2±sms，兩者有（或無(wú)）顯著性差異（p<0.051.0VAm±smV（小)于雙相動(dòng)作電位正相振幅±smV，兩者有（或無(wú)）顯著性差異（p<0.05p>0.05)；單相動(dòng)作時(shí)程Dm±sms顯著長(zhǎng)于雙相動(dòng)作電位正相Dp1±sms，兩者有（或無(wú)）顯著性差異（p<0.05p>0.05)正波，于此可見，雙相動(dòng)作電位是神經(jīng)沖動(dòng)先后通過(guò)兩個(gè)引導(dǎo)電極形成的，沖動(dòng)通過(guò)第2BAP和刺激神經(jīng)干末梢端在其中樞端引導(dǎo)所得APBAP正相振幅大于負(fù)相振幅和正相在兩引導(dǎo)電極間夾傷神經(jīng)，神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)被阻斷，雙相動(dòng)作電位負(fù)相波，形成的單正相波與負(fù)相波在時(shí)間軸上，正相波和負(fù)相波疊加。神經(jīng)纖維的直徑、有無(wú)髓鞘、物種、溫度、藥物（如、離子（K＋）等的影靜脈注射給藥、肌肉注射和皮射、呼吸道吸入給藥、經(jīng)皮給分布：藥物從血循到達(dá)作用、、代謝、排泄等部N膠質(zhì)細(xì)胞構(gòu)成可變：炎癥時(shí)，通透性↑，大劑量青霉素有胎盤屏障：大多數(shù)藥物均能進(jìn)入；簡(jiǎn)單擴(kuò)散；母血pH=7.44;胎血pH=7.30。弱堿性藥期反應(yīng)（Phase期反應(yīng)（PhaseP450單氧化酶系藥酶誘導(dǎo)(Induction)：比妥、，環(huán)境污染物，如苯丙芘等(Inhibition)：西米替丁、普羅地芬等競(jìng)爭(zhēng)酶的代謝途徑4排泄新概念：模視身體為一系統(tǒng)，按動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)分若干轉(zhuǎn)運(yùn)速率相同的部位均視為同一因藥物可進(jìn)、出，故稱開放性系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)有一速率過(guò)程，但彼此近似，前者被歸并為室，后者則歸并成為外三模型：轉(zhuǎn)運(yùn)到外的速率過(guò)程有較明顯快慢之KaK12K21一級(jí)消除動(dòng)力學(xué)：轉(zhuǎn)運(yùn)（消除）給藥后濃度的時(shí)間,多為2（1-多次給藥(Constantrepeatedadministrationof（1）(Steady-state4-5一、消除半衰期（Half-life,T1/2）血漿藥物濃度消除一半所需時(shí)間一級(jí)消除動(dòng)力學(xué)：T1/2=0.693/k；T1/2與濃度無(wú)關(guān)，為恒定值=Vd非體內(nèi)生理空間AUC（Cl四、清除率(Clearance)單位：L/hml/minCL=CL腎臟＋CL肝臟＋CL計(jì)算 CL=D（藥物總量（REClVd，故不是獨(dú)立的藥動(dòng)學(xué)指標(biāo)。有效而不產(chǎn)生毒性反應(yīng)的穩(wěn)態(tài)血漿藥物濃度Css-maxMTC、Css-min給藥速度色譜和質(zhì)譜聯(lián)合：在需要同時(shí)測(cè)定生物樣品中多種化合物的情況下，LC-MS/MSGC-MS/MS聯(lián)用法在特異性、靈敏度和分析速度方面有的優(yōu)勢(shì)立方法時(shí)必須考慮是否能同時(shí)測(cè)定原型藥和代謝物，解決物料平衡（MassBalance）問(wèn)題，52363-5個(gè)12外給藥，除上述藥代參數(shù),Cmax,TmaxKa藥代參數(shù),以反應(yīng)藥物吸收的規(guī)律?？刹捎皿w外吸收模型（Caco-2細(xì)胞模型）研究藥物吸收機(jī)理及影響吸收的因素。3個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別代表分布相（或吸收相、平衡相和消除相的藥物分對(duì)主要在體內(nèi)以代謝消除為主的藥物(藥排泄<50%)可分為兩個(gè)階段研究：1.臨床前可方法初步推測(cè)其結(jié)構(gòu)。2.II期臨床研究主要代謝產(chǎn)物的可能代謝途徑及其結(jié)構(gòu)。對(duì)前藥的研究,除對(duì)其代謝途徑和主要活性代謝物結(jié)構(gòu)確證外,尚應(yīng)對(duì)原藥和活性代謝物進(jìn)P450P450（最好是人肝細(xì)胞）P450酶活性的變化。研究藥物從尿或糞中開始排泄、排泄及排泄基本結(jié)束的全過(guò)程。作膽管插管待動(dòng)物清醒后以各種途徑給藥并以合適的時(shí)間間隔分段收集膽汁，記錄藥物自糞、尿、膽汁排出的速度及總排出量（占總給藥量的百分比SodiumThiopental溶液（4g/L）0.10ml/10g體重模型制作：24h前10%四氯化碳0.2ml/10g皮射觀察指標(biāo)：記錄進(jìn)入翻正反射的時(shí)間、記錄翻正反射的到恢復(fù)的時(shí)PSP的藥動(dòng)學(xué)試驗(yàn)（了解腎臟在藥物消除中的重要性）實(shí)驗(yàn)藥品：PSP苯酚磺肽(0.5ml/kg)5ml/kg(iv)模型制作：60g/L升溶液重要代謝排泄損傷對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)的影響如何？臨床給藥方案的制定應(yīng)該注意哪些方面？Straub藥劑：腎上腺素，乙酰膽堿，，阿托品，氯化鉀，氯化鈣，任氏液注意的細(xì)節(jié)：將插管插入動(dòng)脈圓錐，在心室收縮時(shí)將插管插入心室蛙心夾在心室舒張期心尖，調(diào)節(jié)微調(diào)使心臟舒張期至1gEDT)、心臟收縮末期張力(endsystolictension，EST)。離體心臟活動(dòng)能維持多長(zhǎng)時(shí)間？Renger’ssolution灌流心臟