婦科感染常見病原菌及檢測方法

婦科感染常見病原菌及檢測方法本文檔共68頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期二\12點55分婦科感染常見疾病陰道病/陰道炎尿道炎子宮頸炎盆腔感染子宮內(nèi)膜炎輸卵管－卵巢膿腫輸卵管炎癥本文檔共68頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期二\12點55分婦科感染實驗室檢查的意義很多婦科感染癥狀、體征有很多相似之處。臨床診斷本身既不敏感，也不特異。

實驗室診斷可以：明確病原微生物，使治療更具針對性；提高患者治療依從性；使患者更有可能遵從性伴侶告知。本文檔共68頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期二\12點55分病例一患者，女性，24歲，已婚，孕25周。外陰瘙癢一周來就診。婦檢：宮高與妊娠月份相符,外陰潮紅、充血，見大量黃色膿性分泌物?？紤]什么??？進一步做什么檢查？本文檔共68頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期二\12點55分陰道炎正常情況下陰道內(nèi)寄居有大量需氧菌及厭氧菌，形成正常的陰道菌群。任何原因?qū)㈥幍谰荷鷳B(tài)平衡打破，可形成條件致病菌，引起陰道炎。陰道粘膜生態(tài)系統(tǒng)本文檔共68頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期二\12點55分陰道炎臨床常見有：細(xì)菌性陰道病、念珠菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎。吳文湘,廖秦平.陰道炎的診治進展[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志,2009(12):949-952.本文檔共68頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期二\12點55分陰道炎相關(guān)病原實驗室檢查常見病原因子診斷方法最優(yōu)標(biāo)本轉(zhuǎn)運要求及最佳時間酵母菌（pH<4.5）鹽水濕片和10％KOH

陰道分泌物拭子置于0.5mL生理鹽水或轉(zhuǎn)運拭子，室溫，2h培養(yǎng)陰道分泌物拭子轉(zhuǎn)運拭子送檢，室溫，12hDNA雜交探針

陰道分泌物拭子室溫，7d細(xì)菌性陰道?。╬H>4.5）鹽水濕片和

10％KOH

陰道分泌物拭子置于0.5mL生理鹽水或轉(zhuǎn)運拭子，室溫，2h定量革蘭染色

陰道分泌物拭子轉(zhuǎn)運拭子送檢，室溫，12hDNA雜交探針

陰道分泌物拭子室溫，7d毛滴蟲（pH>4.5）鹽水濕片

陰道分泌物拭子置于鹽水送檢，室溫，30min（最佳）－2h快速抗原檢查陰道上皮/分泌物拭子轉(zhuǎn)運拭子或鹽水送檢，室溫，24hDNA雜交探針陰道分泌物拭子室溫，7d培養(yǎng)陰道分泌物拭子直接放入InPouchTV培養(yǎng)系統(tǒng)送檢室溫，

48h核酸擴增實驗陰道拭子、宮頸拭子、尿液、液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本、尿道拭子、直腸拭子、咽拭子室溫，7d本文檔共68頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期二\12點55分病例1患者，女性，24歲，已婚，孕25周。外陰瘙癢一周來就診。婦檢：宮高與妊娠月份相符,外陰潮紅、充血，見大量黃色膿性分泌物。醫(yī)生：根據(jù)病史及臨床表現(xiàn)可初步診斷為陰道炎。取陰道分泌物拭子，囑病人立即送檢，以明確病原學(xué)診斷。本文檔共68頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期二\12點55分念珠菌性陰道炎主要病原菌為：

白色假絲酵母菌約占80%-90%

光滑假絲酵母菌

熱帶假絲酵母菌

近平滑假絲酵母菌約占10%-20%本文檔共68頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期二\12點55分念珠菌性陰道炎的實驗室診斷1.pH<4.52.鹽水濕片+10%KOH3.培養(yǎng)4.DNA雜交探針本文檔共68頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期二\12點55分鹽水濕片和10％KOH檢出孢子及假菌絲即可確診。本文檔共68頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期二\12點55分培養(yǎng)復(fù)發(fā)病例或有癥狀，但鹽水/KOH鏡檢陰性時考慮培養(yǎng)。本文檔共68頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期二\12點55分

DNA雜交探針不需要活的微生物需要特殊轉(zhuǎn)運管僅針對白色假絲酵母菌FDA批準(zhǔn)僅用于有癥狀女性陰道分泌物

本文檔共68頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期二\12點55分細(xì)菌性陰道病(BV)陰道正常菌群（乳酸桿菌）減少，而其他條件致病菌大量繁殖。主要致病菌有：陰道加德納菌、動彎桿菌、普雷沃菌等厭氧菌和支原體等。FredricksDN,FiedlerTL,MarrazzoJM.Molecularidentificationofbacteriaassociatedwithbacterialvaginosis.[J].NewEnglandJournalofMedicine,2005,353(353):1899-911.本文檔共68頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期二\12點55分陰道加德納菌為革蘭陰性或染色不定的球桿菌，有細(xì)胞壁，無鞭毛，不形成莢膜和芽孢。兼性厭氧最適溫度：時35℃-37℃最適PH：本文檔共68頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期二\12點55分陰道加德納菌革蘭染色：大?。?.5μm×1.5-2.5μm形態(tài)：具有多形性，呈小桿狀或球狀排列：呈單個或成雙排列本文檔共68頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期二\12點55分動彎桿菌為厭氧菌革蘭陰性弧菌形態(tài)：呈弧形，兩端尖細(xì)排列：呈單個或呈雙排列本文檔共68頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期二\12點55分細(xì)菌性陰道病的實驗室診斷1.pH>4.52.鹽水濕片+10%KOH3.定量革蘭染色——Nugent評分4.DNA雜交探針線索細(xì)胞KOH氫氧化鉀本文檔共68頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期二\12點55分鹽水濕片線索細(xì)胞是診斷BV的最敏感特異的指標(biāo)。本文檔共68頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期二\12點55分胺試驗將一滴陰道分泌物滴于玻片上，再加一滴10％KOH，可聞到氨味或魚腥樣氣味，即胺試驗陽性。10%KOH氫氧化鉀本文檔共68頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期二\12點55分定量革蘭染色——Nugent評分定量革蘭染色是BV診斷最特異的檢查。形態(tài)類別每個油鏡視野菌體數(shù)/分值得分0≤11-55-30>30加德納菌/普雷沃菌(革蘭染色不定、球桿菌)01234動彎桿菌01234乳酸桿菌43210本文檔共68頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期二\12點55分定量革蘭染色——Nugent評分乳酸桿菌革蘭染色本文檔共68頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期二\12點55分定量革蘭染色——Nugent評分陰道加德納菌革蘭染色本文檔共68頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期二\12點55分定量革蘭染色——Nugent評分動彎桿菌革蘭染色本文檔共68頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期二\12點55分定量革蘭染色——Nugent評分線索細(xì)胞革蘭染色本文檔共68頁；當(dāng)前第25頁；編輯于星期二\12點55分定量革蘭染色——Nugent評分分?jǐn)?shù)解釋標(biāo)準(zhǔn)：0-3分正常4-7分中介

7-10分細(xì)菌性陰道炎本文檔共68頁；當(dāng)前第26頁；編輯于星期二\12點55分定量革蘭染色——Nugent評分乳酸桿菌0分，上皮細(xì)胞周圍非常清楚。評分：0分本文檔共68頁；當(dāng)前第27頁；編輯于星期二\12點55分定量革蘭染色——Nugent評分乳酸桿菌0分，少量雜菌，見白細(xì)胞和菌絲。評分：1分診斷：BV陰性，但診斷為VVC本文檔共68頁；當(dāng)前第28頁；編輯于星期二\12點55分定量革蘭染色——Nugent評分乳酸桿菌2分，加德納菌/普雷沃菌等3分，動彎桿菌1分。評分：6分診斷：BV中間型本文檔共68頁；當(dāng)前第29頁；編輯于星期二\12點55分定量革蘭染色——Nugent評分乳酸桿菌3分，加德納菌/普雷沃菌等3分，動彎桿菌4分。評分：10分診斷：BV本文檔共68頁；當(dāng)前第30頁；編輯于星期二\12點55分陰道毛滴蟲陰道的致病性厭氧寄生原蟲，蟲體為8-45μm，呈梨形或橢圓形，無色透明，大小為白細(xì)胞的2-3倍。本文檔共68頁；當(dāng)前第31頁；編輯于星期二\12點55分毛滴蟲性陰道炎的實驗室診斷1.pH>4.52.鹽水濕片3.快速抗原檢查4.DNA雜交探針5.培養(yǎng)6.核酸擴增實驗本文檔共68頁；當(dāng)前第32頁；編輯于星期二\12點55分鹽水濕片本文檔共68頁；當(dāng)前第33頁；編輯于星期二\12點55分革蘭染色本文檔共68頁；當(dāng)前第34頁；編輯于星期二\12點55分快速抗原檢查檢測陰道毛滴蟲特定的抗原已有商品化試劑最優(yōu)試驗條件并不需要活的微生物本文檔共68頁；當(dāng)前第35頁；編輯于星期二\12點55分培養(yǎng)本文檔共68頁；當(dāng)前第36頁；編輯于星期二\12點55分核酸擴增試驗APTIMATrichomonasvaginalis(ATV)test（Gen-Probe,Inc.SanDiego,CA）是近期FDA批準(zhǔn)的檢查，既可用于女性TV的篩檢，也可用于診斷?？梢允褂枚喾N標(biāo)本類型。一些實驗室也可通過比對，驗證自己的PCR方法。本文檔共68頁；當(dāng)前第37頁；編輯于星期二\12點55分病例二患者，女性，40歲，已婚，陰道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血2年。檢查外陰正常，宮頸肥大，Ⅲ度糜爛，接觸性出血?？紤]什么??？進一步做什么檢查？本文檔共68頁；當(dāng)前第38頁；編輯于星期二\12點55分子宮頸炎子宮頸可因各種致病因素的侵襲而發(fā)生炎癥，有急性和慢性兩種。疾病致病菌急性宮頸炎沙眼衣原體、淋病奈瑟菌慢性宮頸炎性傳播病原體：沙眼衣原體、淋病奈瑟菌、單純皰疹病毒內(nèi)源性病原體：葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌等；部分與引起陰道炎的病原菌相同本文檔共68頁；當(dāng)前第39頁；編輯于星期二\12點55分尿道炎是指尿道黏膜的炎癥。多為致病菌逆行侵入尿道引起。疾病致病菌淋病性尿道炎淋病奈瑟菌非淋病性尿道炎沙眼衣原體、解脲支原體、陰道毛滴蟲、嗜血短桿菌、單純皰疹病毒最常見非特異性尿道炎大腸埃希桿菌、鏈球菌屬及葡萄球菌屬本文檔共68頁；當(dāng)前第40頁；編輯于星期二\12點55分尿道炎/宮頸炎相關(guān)病原實驗室檢查常見病原因子診斷方法最優(yōu)標(biāo)本轉(zhuǎn)運要求及最佳時間沙眼衣原體

核酸擴增實驗?zāi)蛞?、宮頸內(nèi)、陰道和/或尿道拭子（直腸、咽部、結(jié)膜、液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本）實驗室提供轉(zhuǎn)運裝置，室溫，2d

雜交探針宮頸內(nèi)或尿道拭子實驗室提供轉(zhuǎn)運裝置，室溫，2d

培養(yǎng)宮頸內(nèi)、尿道、結(jié)膜、NP、咽、直腸拭子實驗室提供轉(zhuǎn)運裝置，4℃冷藏；<

2h

直接免疫熒光染色結(jié)膜拭子轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基，室溫，2h淋病奈瑟菌

革蘭染色

尿道分泌物直接涂片或?qū)⑹米又糜谵D(zhuǎn)運培養(yǎng)基，室溫，立即核酸擴增實驗?zāi)蛞骸m頸內(nèi)、陰道和/或尿道拭子（直腸、咽部、結(jié)膜、液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本）實驗室提供轉(zhuǎn)運裝置，室溫，2d

雜交探針宮頸內(nèi)或尿道拭子實驗室提供轉(zhuǎn)運裝置，室溫，2d

培養(yǎng)宮頸內(nèi)、尿道、結(jié)膜、NP、咽、直腸拭子轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基，室溫，≤

1h，不要冷藏標(biāo)本本文檔共68頁；當(dāng)前第41頁；編輯于星期二\12點55分尿道炎/宮頸炎相關(guān)病原實驗室檢查常見病原因子診斷實驗最優(yōu)標(biāo)本轉(zhuǎn)運要求及最佳時間陰道毛滴蟲鹽水濕片

宮頸內(nèi)或尿道拭子置于0.5mL鹽水，30min-2h

快速抗原檢查宮頸內(nèi)拭子實驗室提供轉(zhuǎn)運裝置，室溫，24h

雜交探針宮頸內(nèi)或陰道拭子實驗室提供轉(zhuǎn)運裝置，室溫，7d

培養(yǎng)宮頸內(nèi)或尿道拭子直接接種在InPouchTV培養(yǎng)系統(tǒng)，2-5d核酸擴增實驗陰道、宮頸內(nèi)拭子，尿，液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本，尿道、直腸、咽部拭子實驗室提供轉(zhuǎn)運裝置，室溫，2d

HSV直接免疫熒光染色病變基底部刮取床邊制片，室溫，24h培養(yǎng)病變基底部刮取置于VTM/UTM，室溫或置于冰上，2h核酸擴增實驗病變基底部刮取或分泌物拭子實驗室提供轉(zhuǎn)運裝置本文檔共68頁；當(dāng)前第42頁；編輯于星期二\12點55分病例二患者，女性，40歲，已婚，陰道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血2年。檢查外陰正常，宮頸肥大，Ⅲ度糜爛，接觸性出血。醫(yī)生：根據(jù)臨床表現(xiàn)初步診斷為宮頸炎。取宮頸內(nèi)拭子，囑病人立即送檢（注意保溫），以明確感染病原體。本文檔共68頁；當(dāng)前第43頁；編輯于星期二\12點55分淋病奈瑟菌革蘭染色

為革蘭陰性雙球菌，似腎形或咖啡豆?fàn)睿３呻p排列，凹面相對。

急性淋病患者的淋球菌常被吞噬于中性粒細(xì)胞內(nèi)；慢性淋病患者的淋球菌多分布在細(xì)胞外。

簡便、快速，可做出初步診斷。僅對男性患者進行涂片革蘭染色。

本文檔共68頁；當(dāng)前第44頁；編輯于星期二\12點55分淋病奈瑟菌細(xì)胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌——對GC特異性達(dá)95％細(xì)胞外革蘭陰性雙球菌——對GC特異性達(dá)10-29％本文檔共68頁；當(dāng)前第45頁；編輯于星期二\12點55分培養(yǎng)診斷淋病的重要手段接種到選擇培養(yǎng)基，置于36℃、含5-10%CO2

，濕潤環(huán)境中培養(yǎng)。如果床邊直接接種標(biāo)本到選擇培養(yǎng)基，加CO2

藥片形成氣體環(huán)境，培養(yǎng)敏感性會更好。本文檔共68頁；當(dāng)前第46頁；編輯于星期二\12點55分培養(yǎng)初代培養(yǎng)生長緩慢，24小時后可形成灰色/濕潤、半透明的小菌落（直徑0.5-1mm）。氧化酶陽性、觸酶陽性、葡萄糖產(chǎn)酸試驗陽性且僅分解利用葡萄糖。圖片by陳東科本文檔共68頁；當(dāng)前第47頁；編輯于星期二\12點55分核酸擴增試驗已有商品化試劑盒。優(yōu)點是快速、準(zhǔn)確，缺點是試驗設(shè)備要求高。淋病奈瑟菌DNA在感染成功治療后，在標(biāo)本中仍可保留3周之久，所以不能作為治療評估指標(biāo)。本文檔共68頁；當(dāng)前第48頁；編輯于星期二\12點55分雜交探針目前FDA已有批準(zhǔn)的GC的雜交試驗試劑盒。不可針對尿標(biāo)本。本文檔共68頁；當(dāng)前第49頁；編輯于星期二\12點55分病例三病人，女，24歲，主訴為持續(xù)3天的輕度排尿困難，化膿性陰道分泌物，發(fā)熱，并伴有中度的雙側(cè)下腹痛。查體：子宮和附件壓痛，化膿性宮頸分泌物?？紤]什么??？進一步做什么檢查？本文檔共68頁；當(dāng)前第50頁；編輯于星期二\12點55分盆腔炎盆腔炎癥性疾病是女性上生殖道一系列疾病的總稱。包括：

子宮內(nèi)膜炎

輸卵管－卵巢膿腫

輸卵管炎癥

盆腔腹膜炎

本文檔共68頁；當(dāng)前第51頁；編輯于星期二\12點55分盆腔炎致病菌盆腔炎外源性病原體內(nèi)源性病原體主要為性傳播疾病病原體：淋病奈瑟菌、沙眼衣原體、支原體等來自于原寄生于陰道的正常菌群，包括：需氧菌和厭氧菌本文檔共68頁；當(dāng)前第52頁；編輯于星期二\12點55分內(nèi)源性病原體需氧菌及兼性厭氧菌：

金黃色葡萄球菌、鏈球菌、大腸埃希菌、

陰道加德納菌等厭氧菌：

脆弱擬桿菌、消化鏈球菌、普雷沃菌、真桿菌等感染特點：容易形成盆腔膿腫、感染性血栓靜脈炎，膿液有糞臭并有氣泡本文檔共68頁；當(dāng)前第53頁；編輯于星期二\12點55分盆腔炎相關(guān)病原實驗室檢查常見病原因子診斷方法最優(yōu)標(biāo)本轉(zhuǎn)運要求及最佳時間混合厭氧菌陰道菌從腸桿菌科、鏈球菌、支原體血培養(yǎng)和AST來評估少見病原血，20mL注入2瓶，靜脈穿刺采集床邊注入血培養(yǎng)瓶，室溫，1h革蘭染色需氧和厭氧培養(yǎng)子宮內(nèi)膜，輸卵管-卵巢膿腫和/或輸卵管內(nèi)容物置入或注入無菌厭氧容器，室溫，30min子宮內(nèi)膜炎組織學(xué)證據(jù)子宮內(nèi)膜活檢無菌容器，室溫，30min福爾馬林容器，室溫，30min-4h淋病奈瑟菌沙眼衣原體陰道毛滴蟲核酸擴增試驗?zāi)蛞海瑢m頸內(nèi)拭子實驗室提供轉(zhuǎn)運裝置，室溫，2dHIVHIVEIA抗體血清促凝管，室溫，2h本文檔共68頁；當(dāng)前第54頁；編輯于星期二\12點55分病例三病人，女，24歲，主訴為持續(xù)3天的輕度排尿困難，化膿性陰道分泌物，發(fā)熱，并伴有中度的雙側(cè)下腹痛。查體：子宮和附件壓痛，化膿性宮頸分泌物。醫(yī)生：根據(jù)臨床表現(xiàn)初步診斷為急性盆腔炎。進一步送檢至少一套血培養(yǎng)，抽取膿腫置于厭氧容器盡快送檢，并取宮頸內(nèi)拭子送檢，必要時取子宮內(nèi)膜活檢，以明確感染病原體。本文檔共68頁；當(dāng)前第55頁；編輯于星期二\12點55分盆腔炎相關(guān)厭氧菌培養(yǎng)流程分離培養(yǎng)挑取菌落需氧培養(yǎng)厭氧培養(yǎng)厭氧培養(yǎng)生長不生長生長專性厭氧菌：做第二次耐氧試驗形態(tài)染色菌落特征生化反應(yīng)藥敏鑒定氣相色譜厭氧（+）需氧（-）兼性厭氧菌標(biāo)本肉眼觀察染色鏡檢本文檔共68頁；當(dāng)前第56頁；編輯于星期二\12點55分直接涂片染色鏡檢在接種時做涂片，革蘭染色并鏡檢：觀察膿細(xì)胞的有無及特殊情況，細(xì)菌與細(xì)胞之間的相關(guān)性。觀察有無細(xì)菌，微生物的類型和大概的數(shù)量以及有無芽孢、形狀和位置、著色及菌體特征。