甾體激素類藥物的分析專題知識宣講課件

甾體激素類藥物的分析結(jié)構(gòu)分析結(jié)構(gòu)分析ABCD1234567891011121314151617母核：環(huán)戊烷并多氫菲環(huán)上雙鍵的表示方法用“△”表示，雙鍵的位置在△右上角?！麟p鍵位置△4△5△1,4△5(10)甾體分類腎上腺皮質(zhì)激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素結(jié)構(gòu)分析腎上腺皮質(zhì)激素皮質(zhì)酮的衍生物母核：環(huán)戊烷多氫菲取代基（供分析）3——酮基4——雙鍵11——OH17——α醇酮基△4△4-3-酮基結(jié)構(gòu)分析共軛吸收還原性21個碳原子人工合成典型藥物腎上腺皮質(zhì)激素結(jié)構(gòu)分析糖皮質(zhì)激素5抗5多和2少，神經(jīng)興奮骨疏松5抗：炎、熱、毒、免、休5多：紅、血紅、中、板、纖維蛋白原2少：淋巴、嗜酸凡炎皆抗！炎癥早期：減輕滲出、水腫、毛細血管擴張、白細胞浸潤及吞噬反應。從而改善炎癥的紅、腫、熱、痛等癥狀；炎癥后期：抑制毛細血管和成纖維母細胞的增生，延緩肉芽組織生成，防止粘連及瘢痕形成，減輕后遺癥?？寡撞豢咕寡撞豢挂颍螛瞬恢伪局皇翘岣吡藱C體對炎癥的反應性，但同時降低了機體的防御機能?？垢邿嵴T發(fā)或加重感染糖皮質(zhì)激素5抗5多和2少，神經(jīng)興奮骨疏松5抗：炎、熱、毒、免、休5多：紅、血紅、中、板、纖維蛋白原2少：淋巴、嗜酸注意：不是中和、也不是破壞細菌內(nèi)毒素能對抗細菌內(nèi)毒素對機體的刺激性反應，減輕細胞損傷，緩解毒血癥癥狀?？苟緳C制是能抑制NO合酶，降低NO水平。抗毒作用小細大體各種嚴重休克，尤其是中毒性休克反跳現(xiàn)象糖皮質(zhì)激素5抗5多和2少，神經(jīng)興奮骨疏松5抗：炎、熱、毒、免、休5多：紅、血紅、中、板、纖維蛋白原2少：淋巴、嗜酸刺激骨髓造血功能，使紅細胞、血紅蛋白、血小板、纖維蛋白原、中性粒細胞數(shù)目增多（但卻抑制中性粒細胞的游走、消化、吞噬等功能）。使淋巴細胞、嗜酸性粒細胞減少?！九c臨床應用密切相關】對血液成分的影響對骨骼的影響可出現(xiàn)骨質(zhì)疏松急性粒細胞性白血病貧血急性淋巴細胞性白血病X√糖皮質(zhì)激素5抗5多和2少，神經(jīng)興奮骨疏松5抗：炎、熱、毒、免、休5多：紅、血紅、中、板、纖維蛋白原2少：淋巴、嗜酸激素無抗菌作用，又可降低機體防御功能，故必須聯(lián)合抗菌素，以免感染灶擴散。注意：激素用于嚴重感染時，必須和有效而足量的抗菌藥物合用??？糖皮質(zhì)激素不良反應腎上腺皮質(zhì)功能亢進綜合征雄性激素及蛋白同化激素結(jié)構(gòu)分析睪丸素的衍生物母核：環(huán)戊烷多氫菲取代基（供分析）3——酮基4——雙鍵△4△4-3-酮基共軛吸收17——羥基或酯19個碳原子雄性激素及蛋白同化激素結(jié)構(gòu)分析典型藥物蛋白同化激素孕激素結(jié)構(gòu)分析黃體酮母核：環(huán)戊烷多氫菲取代基（供分析）3——酮基4——雙鍵△4△4-3-酮基共軛吸收17——甲酮基21個碳原子亞硝基鐵氰化鈉雌性激素結(jié)構(gòu)分析母核：環(huán)戊烷多氫菲取代基（供分析）A——酚羥基17——羥基、酮、炔18個碳原子紫外；與重氮鹽反應與AgNO3反應結(jié)構(gòu)分析甾體激素碳原子數(shù)A環(huán)17位取代基腎上腺皮質(zhì)激素21△4-3-酮基α-醇酮基雄性激素19△4-3-酮基-OH孕激素21△4-3-酮基甲酮基雌性激素18苯環(huán)C3—酚羥基-OH-C≡CH鑒別試驗物理常數(shù)的測定化學鑒別法制備衍生物測定熔點

UVIRTLCHPLC熔點、比旋度、吸收系數(shù)制劑分析鑒別試驗鑒別試驗紅外分光光度法峰形、峰強、峰位鑒別試驗紅外分光光度法νc-Hνc=cνc=oδc-Hγ=C-H黃體酮鑒別試驗化學鑒別法母核能與H2SO4、H3PO4、HClO4、HCl等呈色。最常用的是H2SO4甾體激素類藥物硫酸、磷酸、高氯酸、鹽酸呈色與強酸顯色鑒別試驗官能團1、C17-α-醇酮基呈色反應沉淀反應還原性化學鑒別法C17-α-醇酮基四氮唑鹽OH-呈色C17-α-醇酮基氨制硝酸銀銀鏡反應C17-α-醇酮基堿性酒石酸銅Cu2O↓鑒別試驗2、

C3–酮基和C20–酮基甾酮類2,4-二硝基苯肼呈色異煙肼、硫酸苯肼黃體酮官能團化學鑒別法羰基化試劑異煙雙腙（黃色）鑒別試驗3、甲酮基或活潑亞甲基亞硝基鐵氰化鈉間二硝基酚/芳香醛呈色藍紫色黃體酮官能團化學鑒別法黃體酮的專屬性鑒別實驗鑒別試驗官能團化學鑒別法4、鹵素5、酚羥基雌激素類重氮苯磺酸紅色偶氮染料↓炔雌醇白6、乙炔基7、酯基水解有機破壞雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查1、有關物質(zhì)原料藥、中間體、副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物1、可能存在多個甾體雜質(zhì)2、結(jié)構(gòu)類似TLCHPLC特點方法雜質(zhì)檢查有關物質(zhì)CompanyLogoTLC地塞米松磷酸鈉中雜質(zhì)檢查高低濃度對比法氫化可的松中其他甾體檢查對照品60μg/ml供試品3.0mg/mlCHCl3-MeOH(9:1)溶劑硅膠GF254二氯甲烷-乙醚-甲醇-水

385:60:15:2展開后晾干，105℃干燥10min堿性四氮唑藍顯色雜質(zhì)檢查HPLCCompanyLogo對照溶液——0.02mg/ml供試液——1mg/ml黃體酮中有關物質(zhì)檢查供試品溶液的雜質(zhì)峰數(shù)不得超過1個，其面積不得大于對照液的主峰面積的3/4合成中用二氧化硒(SeO2)脫氫甲醇≤0.3%雜質(zhì)檢查2、硒的檢查劇毒3、溶劑殘留GC丙酮≦0.5%內(nèi)標法+校正因子磷鉬酸740nm，UV雜質(zhì)檢查4、游離磷酸鹽檢查地塞米松磷酸鈉氫化可的松磷酸鈉倍他米松磷酸鈉氫華潑尼松磷酸鈉鉬酸銨對照品法含量測定含量測定HPLC內(nèi)標法甾體激素類藥物常含有結(jié)構(gòu)相似的其他載體雜質(zhì)，對利用結(jié)構(gòu)特征設計的比色法有干擾特點用樣量少，靈敏度高，分離效果好，測定速度快USP、BP、JP外標法定量

配制一系列已知濃度的標樣要測什么配什么單點校正標準曲線內(nèi)標法定量1

配制一系列濃度的標樣，其中加有內(nèi)標樣內(nèi)標物的選擇化學結(jié)構(gòu)與待測組分相似(同系物、異構(gòu)體)在樣品中不存在不與樣品中組份發(fā)生任何化學反應保留值與待測組分接近濃度（響應值）與待測組分相當其色譜峰與其他色譜峰分離好單點校正標準曲線內(nèi)標法定量含量測定UVCompanyLogo醋酸地塞米松E值法含量測定比色法CompanyLogo四氮唑比色法異煙肼比色法Kober反應比色法原理、應用范圍、注意事項重點含量測定比色法四氮唑比色法原理OH-[還原]

腎上腺皮質(zhì)激素類含量測定比色法四氮唑比色法

腎上腺皮質(zhì)激素類四氮唑鹽紅四氮唑藍四氮唑2,3,5—三苯基氯化四氮唑3,3’—二甲氧基苯基—雙—4,4’—（3,5—二苯基）氯化四氮唑TTC或RTBT甲潛深紅色λmax480~490nmBT-雙甲潛藍色

λmax525nmCh.P.、JPUSP含量測定比色法四氮唑比色法

腎上腺皮質(zhì)激素類氧化還原含量測定比色法四氮唑比色法影響因素（1）官能團位置的影響1、C11：取代基＜2、C21-羥基酯化后較母體羥基反應速度慢即：游離體＞酯類即：可的松＞醋酸可的松簡單酯＞復雜酯即：醋酸酯＞磷酸酯＞琥珀酸酯＞三甲基醋酸酯空間位置含量測定比色法四氮唑比色法影響因素（2）溶劑的選擇無水、無醛含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10%含水30%→幾無反應—無水乙醇(無醛)與四氮唑反應（3）堿的種類及加入順序反應應在強堿性（pH13.75）條件下進行氫氧化四甲基銨種類順序含量測定比色法四氮唑比色法影響因素(5)溫度t℃↑→ν↑→甲瓚分解↑→%↓(4)O2與光線的影響反應過程反應產(chǎn)物怕光O2影響顏色強度和穩(wěn)定性避光、快速隔絕空氣、快速、充氮氣含量測定比色法四氮唑比色法影響因素氫化可的松軟膏的含量測定精密量取對照品溶液及供試品溶液各1ml，分別置干燥具塞試管中，各精密加無水乙醇9ml與氯化三苯四氮唑試液1ml，搖勻，各再精密加氫氧化四甲基銨試液1ml，搖勻，在25℃的暗處放置40min～45min，在485nm的波長處分別測定吸收度，計算，即得含量測定比色法異煙肼比色法C3——酮基及某些其他位置上的酮基能與羰基試劑異煙肼在酸性條件下形成黃色的異煙腙，在一定波長下有最大吸收，可用于定量原理-H2O含量測定比色法異煙肼比色法影響因素（1）反應速度(專屬性)C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反應（2）溶劑的選擇異煙肼鹽酸鹽→甲醇、乙醇無水（3）水分、O2與光線的影響含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓不揮發(fā)溶劑、不吸收水分時→O2與光線無影響含量測定比色法異煙肼比色法影響因素(4)酸、異煙肼的量鹽酸:異煙肼=2:1樣品:異煙肼=1:8→ν↑

(5)溫度t℃↑→ν↑重現(xiàn)性酸度↑→異煙肼鹽↓酸度↓→A↓含量測定比色法Kober比色法原理含量測定比色法Kober