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油鏡及熒光顯微鏡的原理及使用方法演示文稿本文檔共21頁;當(dāng)前第1頁;編輯于星期日\17點23分優(yōu)選油鏡及熒光顯微鏡的原理及使用方法本文檔共21頁;當(dāng)前第2頁;編輯于星期日\17點23分
光學(xué)顯微鏡的使用方法光學(xué)顯微鏡注意事項熒光顯微鏡的使用原理123本文檔共21頁;當(dāng)前第3頁;編輯于星期日\17點23分
光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡(OpticalMicroscope,簡寫OM)是利用光學(xué)原理,把人眼所不能分辨的微小物體放大成像,以供人們提取微細結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。本文檔共21頁;當(dāng)前第4頁;編輯于星期日\17點23分光學(xué)顯微鏡的使用方法低、高倍鏡觀察進一步放大的部分移到視野的中心本文檔共21頁;當(dāng)前第5頁;編輯于星期日\17點23分光學(xué)顯微鏡的使用方法集光器上升到最高位置光圈開到最大本文檔共21頁;當(dāng)前第6頁;編輯于星期日\17點23分光學(xué)顯微鏡的使用方法轉(zhuǎn)換油鏡時,從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離高倍鏡頭離開通光孔,在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油本文檔共21頁;當(dāng)前第7頁;編輯于星期日\17點23分光學(xué)顯微鏡的使用方法用左眼觀察目鏡,并慢慢轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。不出現(xiàn)物象目標(biāo)不理想加油區(qū)外加油區(qū)內(nèi)低倍→高倍→油鏡低倍→油鏡油鏡使用完畢,先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標(biāo)本上的香柏油擦去,然后再用干擦鏡紙擦干凈。本文檔共21頁;當(dāng)前第8頁;編輯于星期日\17點23分光學(xué)顯微鏡注意事項1.持鏡時必須是右手握臂、左手托座的姿勢;2.水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺,如果沾污應(yīng)立即擦凈;3.放置玻片標(biāo)本時要對準(zhǔn)通光孔中央,且不能反放玻片,防止壓壞玻片或碰壞物鏡;
4.不要隨意取下目鏡,以防止塵土落入物鏡,也不要任意拆卸各種零件,以防損壞;
5.使用完畢后,必須復(fù)原才能放回鏡箱內(nèi)。本文檔共21頁;當(dāng)前第9頁;編輯于星期日\17點23分
熒光顯微鏡的使用原理本文檔共21頁;當(dāng)前第10頁;編輯于星期日\17點23分什么是熒光?概念:物質(zhì)中的電子吸收光的能量由低能狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)楦吣軤顟B(tài),再回到低能狀態(tài)時釋放出的光。即:物質(zhì)吸收短波光,發(fā)射出的長波光。自發(fā)性熒光分類誘發(fā)性熒光細胞內(nèi)的成分經(jīng)短波長照射后,可以發(fā)出熒光細胞內(nèi)的成分經(jīng)紫外線照射后不發(fā)熒光,但與熒光染料結(jié)合后可呈現(xiàn)一定顏色的熒光一般很微弱,如葉綠素。如吖啶橙,能使細胞內(nèi)的DNA呈綠色熒光;RNA呈紅色熒光。本文檔共21頁;當(dāng)前第11頁;編輯于星期日\17點23分熒光顯微鏡熒光顯微鏡(Fluorescencemicroscope)是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一。本文檔共21頁;當(dāng)前第12頁;編輯于星期日\17點23分本文檔共21頁;當(dāng)前第13頁;編輯于星期日\17點23分多采用200W的超高壓汞燈作光源。原理:電極間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發(fā)射光量子的結(jié)果。作用:它發(fā)射很強的紫外和藍紫光,足以激發(fā)各類熒光物質(zhì),因此,為熒光顯微鏡普遍采用。注意:超高壓汞燈也散發(fā)大量熱能。因此,燈室必須有良好的散熱條件,工作環(huán)境溫度不宜太高。汞燈光源本文檔共21頁;當(dāng)前第14頁;編輯于星期日\17點23分激發(fā)濾板紫外光激發(fā)濾板紫外藍光激發(fā)濾板400nm紫外光紫藍光激發(fā)濾板400nm可見光300-450nm光350-490nm光根據(jù)光源和熒光色素的特點,可選用以下三類激發(fā)濾板,提供一定波長范圍的激發(fā)光。本文檔共21頁;當(dāng)前第15頁;編輯于星期日\17點23分
分光鏡分光鏡反射短波,透射長波。短波激發(fā)光在分光鏡處反射,由物鏡到熒光物質(zhì),產(chǎn)生的長波長發(fā)射光經(jīng)物鏡返回,并透過分光鏡。本文檔共21頁;當(dāng)前第16頁;編輯于星期日\17點23分壓制濾板壓制濾板的作用是完全阻擋激發(fā)光通過,提供相應(yīng)波長范圍的熒光。紫外光壓制濾板紫外藍光壓制濾板紫藍光壓制濾板可見光紫外光>510nm>460nm本文檔共21頁;當(dāng)前第17頁;編輯于星期日\17點23分
熒光顯微鏡的種類
落射式
透射式
本文檔共21頁;當(dāng)前第18頁;編輯于星期日\17點23分熒光顯微鏡的主要部件
透射式汞燈光源激發(fā)濾版暗場聚光鏡壓制濾版落射式汞燈光源激發(fā)濾版分光鏡壓制濾版本文檔共21頁;當(dāng)前第19頁;編輯于星期日\17點23分300-490nm>510nm520-560nm本文檔共21頁;當(dāng)前第20頁;編輯于星期日\17點23分熒光顯微鏡的使用方法1.打開燈源,超高壓汞燈要預(yù)熱幾分鐘才能達到最亮點。2.落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾版/分光鏡/壓制濾板。透射式熒光顯微鏡需在燈源與聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾
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