第三節(jié) 顯色反應(yīng)及測定條件的選擇

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測定條件的選擇第一頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測量條件選擇1、影響顯色反應(yīng)的因素顯色劑發(fā)生顯色反應(yīng)的要求：（1）選擇性好：一種顯色劑只與一種被測組分顯色。（2）靈敏度高。（3）有色化合物組成恒定，性質(zhì)穩(wěn)定。（4）若顯色劑本身有色，應(yīng)與生成的有色化合物顏色差別大。（5）重現(xiàn)性好。

第二章分光光度計第二頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測量條件選擇1、影響顯色反應(yīng)的因素顯色劑分類：（1）無機(jī)顯色劑：靈敏度、選擇性不高；（2）有機(jī)顯色劑：顏色鮮明，選擇性，靈敏度高，種類多，應(yīng)用廣。

第二章分光光度計第三頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測量條件選擇1、影響顯色反應(yīng)的因素影響顯色反應(yīng)因素：（1）用量：總原則遵循顯色反應(yīng)盡量完全，一般需要加入過量顯色劑；（2）酸度：顯色劑大多數(shù)是有機(jī)弱酸，酸度變化，顯色劑的顏色也會發(fā)生變化。（3）溫度：顯色反應(yīng)一般在室溫條件下進(jìn)行，有時需要加熱以促進(jìn)顯色反應(yīng)。

第二章分光光度計第四頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測量條件選擇1、影響顯色反應(yīng)的因素影響顯色反應(yīng)因素：（4）顯色時間：顯色時間即顯色反應(yīng)完成所需時間；穩(wěn)定時間：顯色后物質(zhì)保持穩(wěn)定時間。（5）溶劑：溶劑類型不同，生成的顯色物質(zhì)不同，物質(zhì)顏色也不同。

第二章分光光度計第五頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四第六頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測量條件選擇2、共存離子干擾及消除方法（1）干擾原因①共存離子本身有顏色；②共存離子與顯色劑或被測組分反應(yīng)，使顯色劑和被測組分降低，結(jié)果偏低；③共存離子與顯色劑生成有色化合物或沉淀，結(jié)果偏高；④雖然生成無色化合物，但大量消耗顯色劑，干擾測定。

第二章分光光度計第七頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測量條件選擇2、共存離子干擾及消除方法（2）消除方法①控制酸度，只使被測離子顯色，干擾離子不顯色；②加入掩蔽劑（注意使用的掩蔽劑的pH值）；③改變干擾離子價態(tài)；④選擇適當(dāng)波長：吸光度最大，干擾最小。⑤選擇合適的參比溶液。⑥分離干擾離子：電解法、沉淀法、溶劑萃取法、離子交換法分離干擾離子

第二章分光光度計第八頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測量條件選擇3、測量條件選擇（1）選擇合適的測定波長：

利用光譜掃描，兼顧“吸光度最大，干擾最小”的選擇，選擇物質(zhì)的最大吸收波長

作為測定波長。

第二章分光光度計第九頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四怎樣選擇合適波長通過測定被測物質(zhì)對不同波長的光的吸收強(qiáng)度（吸光度），以波長為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，得出該物質(zhì)在測定波長范圍的吸收曲線，在吸收曲線中，通常選用最大吸收波長進(jìn)行物質(zhì)含量的測定。第十頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測量條件選擇3、測量條件選擇（2）吸光度范圍

吸光度應(yīng)控制在0.2-0.8之間，以保證較高的準(zhǔn)確度。

控制方法可采用：

①改變?nèi)恿?，稀釋、改變或控制待測溶液濃度；

②選擇不同厚度的吸收池，以調(diào)節(jié)吸光度A的大小。

第二章分光光度計第十一頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測量條件選擇3、測量條件選擇（3）參比溶液的選擇

選擇合適的參比溶液調(diào)節(jié)儀器零點，消除溶劑、試劑對入射光的吸收，造成誤差。

溶劑參比：共存組分對測定波長的光無吸收，只是溶劑對測定波長的光有吸收。

試劑參比：顯色劑或其它試劑對測定波長的光有吸收，應(yīng)使用試劑參比，與試樣做平行操作，以消除試劑干擾。

第二章分光光度計第十二頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四

第三節(jié)顯色反應(yīng)及測量條件選擇3、測量條件選擇（3）參比溶液的選擇

試樣參比：如果試