甾體激素類藥物的分析詳解演示文稿

甾體激素類藥物的分析詳解演示文稿本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第1頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（優(yōu)選）甾體激素類藥物的分析本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第2頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分基本結(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷并多氫菲ABCD12345678910111213141516171819田巛本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第3頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分環(huán)上雙鍵的表示方法：用“”表示,雙鍵的位置寫在的右上角。雙鍵位置4

1,4

5

5(10)

本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第4頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分分類：甾體激素腎上腺皮質(zhì)激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌性激素本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第5頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分皮質(zhì)酮的衍生物

腎上腺皮質(zhì)激素本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第6頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分還原性UV、與羰基試劑反應(yīng)氫化可的松（天然型）腎上腺皮質(zhì)激素本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第7頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分醋酸地塞米松腎上腺皮質(zhì)激素本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第8頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分潑尼松腎上腺皮質(zhì)激素本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第9頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分雄性激素甲睪酮UV、與羰基試劑反應(yīng)可成酯本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第10頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分丙酸睪酮雄性激素本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第11頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分蛋白同化激素苯丙酸諾龍本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第12頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分孕激素黃體酮UV、與羰基試劑反應(yīng)可與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)(專屬鑒別)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第13頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分雌二醇雌性激素UV、與重氮苯磺酸鹽反應(yīng)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第14頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分炔雌醇可與硝酸銀反應(yīng)雌性激素本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第15頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分它屬于什么類型的激素？左炔諾孕酮Answer：睪酮類強(qiáng)效孕激素本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第16頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分米非司酮（孕激素受體拮抗劑）知識(shí)拓展：用途：與前列腺素醇合用→堿性（高氯酸滴定）藥流本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第17頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.腎上腺皮質(zhì)激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17

–

α–醇酮基還原性本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第18頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17–

β–羥基可成酯本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第19頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分3.孕激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)C17–甲酮基與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)C17–乙炔基與AgNO3反應(yīng)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第20頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分4.雌激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)A環(huán)為3–OH苯環(huán)UV、與重氮苯磺酸鹽反應(yīng)C17–乙炔基與AgNO3反應(yīng)C17–羥基可成酯本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第21頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分二、鑒別試驗(yàn)（一）物理常數(shù)的測(cè)定1、熔點(diǎn)2、比旋度3、吸收系數(shù)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第22頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（二）與強(qiáng)酸的呈色反應(yīng)甾體激素類藥物呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第23頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分與硫酸顯色反應(yīng)

顯色熒光加水稀釋潑尼松龍深紅

絮狀↓灰潑尼松橙

黃→藍(lán)綠炔雌醚橙紅

黃綠

↓紅色

炔雌醇橙紅

黃綠

絮狀↓玫紅醋酸可的松黃或微褪色并澄

帶橙清本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第24頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（三）官能團(tuán)的反應(yīng)1、C17

–

α–醇酮基有強(qiáng)還原性，與氧化劑作用，被氧化成水合醛。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第25頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（三）官能團(tuán)的反應(yīng)腎上腺皮質(zhì)激素藥物呈色四氮唑鹽OHˉ1、C17

–

α–醇酮基還原性A.呈色反應(yīng)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第26頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分腎上腺皮質(zhì)激素藥物Cu2O↓橙紅色堿性酒石酸銅B.沉淀反應(yīng)Ag↓黑色氨制硝酸銀本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第27頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分甾酮類激素藥物呈色羰基試劑2.C3–酮基和C20–酮基＃常用的羰基試劑：2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第28頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分異煙腙（黃色）睪酮本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第29頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分黃體酮異煙雙腙（黃色）本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第30頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分具有甲酮基或活潑亞甲基的甾體激素類藥物呈色亞硝基鐵氰化鈉間二硝基酚芳香醛3.甲酮基本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第31頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分黃體酮藍(lán)紫色亞硝基鐵氰化鈉其他甾體淡橙色不顯色本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第32頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分黃體酮本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第33頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分藍(lán)紫色本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第34頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分

活潑亞甲基反應(yīng)（Zimmermann反應(yīng)）羰基鄰位的亞甲基叫活潑次甲基。

羰基C3、C11、C20亞甲基C2、C12、C21羰基C17亞甲基C16本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第35頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第36頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分有機(jī)氟Fˉ有機(jī)破壞有機(jī)氯Clˉ4.有機(jī)鹵素茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰硝酸—硝酸銀AgCl↓呈色本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第37頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分茜素氟藍(lán)藍(lán)紫色F-本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第38頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分雌激素類藥物紅色偶氮染料重氮苯磺酸5.酚羥基本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第39頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分含炔基的甾體激素銀鹽沉淀硝酸銀6.乙炔基↓本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第40頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分炔雌醇白本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第41頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分香（四）水解產(chǎn)物的反應(yīng)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第42頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分特臭特臭本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第43頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分△４-3-酮240nm苯環(huán)280nm（五）UV法本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第44頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分醋酸甲地孕酮(288nm)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第45頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第46頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分3300～3000cm-13000～2700cm-11900～1650cm-11650～1450cm-11000～650cm-1（七）IR法3750～3300cm-1ν本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第47頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分醋酸可的松結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC20–酮基、C11–酮基、醋酸酯本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第48頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分1630cm-1ν3420cm-1亞甲基、角甲基吸收帶1750cm-11232cm-11052cm-1本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第49頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC17–乙炔基炔諾酮H本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第50頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分1650cm-1ν3300cm-3270cm-1ν1615cm-1本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第51頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分結(jié)構(gòu)特征：酚羥基、C17–OHC17–乙炔基炔雌醇本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第52頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分1505cm-1ν3505cm-13300cm-1ν1590cm-13610cm-1ν酚羥基醇羥基1615cm-1苯環(huán)的骨架振動(dòng)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第53頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（八）TLC法主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別方法：對(duì)照品法要求供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的顏色和位置與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第54頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（九）HPLC法主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏）方法：對(duì)照品法要求在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品峰的tR與對(duì)照品峰的tR一致。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第55頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分三、雜質(zhì)檢查（一）有關(guān)物質(zhì)定義與標(biāo)示藥物結(jié)構(gòu)不同的甾體化合物都稱為“有關(guān)物質(zhì)”本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第56頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分Li/NH3C2H5OH弱酸雌二醇－3－甲醚苯丙酸諾龍的合成路線III本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第57頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分強(qiáng)酸苯丙酰氯HClIII本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第58頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分特點(diǎn)（1）可能存在多個(gè)甾體雜質(zhì)（2）結(jié)構(gòu)類似2.來源原料、中間體、異構(gòu)體、降解產(chǎn)物本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第59頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分4.方法（具有一定分離能力）TLC法（高低濃度對(duì)比法）HPLC法（類似高低濃度對(duì)比法）本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第60頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（1）TLC法（高低濃度對(duì)比法）判定方法：規(guī)定雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第61頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分醋酸去氧皮質(zhì)酮檢查有關(guān)物質(zhì)

取本品加氯仿-甲醇（9：1）制成10mg/ml作為供試液，精密量取適量，加上述溶劑稀釋成0.1mg/ml作為對(duì)照液（1）與0.2mg/ml的對(duì)照液（2）；照薄層色譜法，各取5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254板上，以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水（77:15:8:1.2）為展開劑，展開后晾干，在紫外光燈（254nm）下檢視。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液（1）所顯的主斑點(diǎn)比較，不得更深，如有1個(gè)斑點(diǎn)深于對(duì)照溶液（1）的主斑點(diǎn)，與對(duì)照液（2）所顯的主斑點(diǎn)比較，不得更深。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第62頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分特點(diǎn)：（1）簡(jiǎn)便易行，不需特殊的儀器；（2）不需對(duì)照品；（3）只能控制單個(gè)雜質(zhì)的限量；（4）要求雜質(zhì)與主成分的顯色靈敏度接近。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第63頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（2）HPLC法（高低濃度對(duì)比法）判定方法：規(guī)定雜質(zhì)峰數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)峰面積本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第64頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分醋酸可的松檢查其他甾體本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第65頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分特點(diǎn)：（1）需特殊的儀器；（2）不需對(duì)照品；（3）可以控制雜質(zhì)的總量；

本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第66頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（二）游離磷酸地塞米松磷酸鈉氫化可的松磷酸鈉倍他米松磷酸鈉氫化潑尼松磷酸鈉對(duì)照品法本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第67頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分原理：方法：本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第68頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分檢查游離磷酸地塞米松磷酸鈉精密稱取本品20mg，置25ml量瓶中，加水15ml溶解，精密加鉬酸銨硫酸試液2.5ml與1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶液1ml，加水至刻度，搖勻，在20℃放置30～50分鐘，照分光光度法，在740nm處測(cè)定吸收度，與對(duì)照液4.0ml同法處理的吸收度比較，不得更大。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第69頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（對(duì)照液0.0035%KH2PO4）本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第70頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（三）甲醇和丙酮甲醇≤0.3%丙酮≤0.5%內(nèi)標(biāo)法+校正因子GC法本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第71頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分四、硒來源合成中用二氧化硒(SeO2)脫氫劇毒原理方法本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第72頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分規(guī)定A供＜A對(duì)。測(cè)定對(duì)象：醋酸氟輕松、醋酸地塞米松、曲安奈得、醋酸曲安奈得等本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第73頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分四、含量測(cè)定（一）UV法△４-3-酮240nm（±）腎上腺皮質(zhì)激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素苯環(huán)280nm（±）雌激素本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第74頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（二）反應(yīng)分光光度法（比色法）1.適用于非（弱）分光光度活性藥物2.使待測(cè)組分光譜位移，避免干擾，提高選擇性3.提高測(cè)定靈敏度弱、非分光光度活性藥物強(qiáng)分光光度活性藥物化學(xué)反應(yīng)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第75頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分

腎上腺皮質(zhì)激素類C17-α－醇酮基強(qiáng)還原性1.原理OH-[還原]四氮唑比色法本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第76頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分[O]OH-分子重排本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第77頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分三苯甲瓚↓深紅氯化三苯四氮唑（TTC）紅四氮唑（RT）本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第78頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分藍(lán)四氮唑（BT）本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第79頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分雙甲瓚（暗藍(lán)）本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第80頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分2.方法ChPTTC（RT）BPTTC（RT）USPBT對(duì)照品法40～45′暗本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第81頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分醋酸潑尼松龍軟膏含量測(cè)定對(duì)照液：精密稱取醋酸潑尼松龍對(duì)照品20mg，置100ml量瓶中，加無水乙醇振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得。供試液：精密稱取本品4g（約相當(dāng)于醋酸潑尼松龍20mg），置燒杯中，加無水乙醇約30ml，置水浴上加熱，充分?jǐn)嚢?，使醋酸潑尼松龍溶解，再置冰浴中冷卻，濾過，濾液置100ml量瓶中，同法提取本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第82頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分三次，濾液并入量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。測(cè)定法：精密量取上述溶液各1ml，分別置干燥具塞試管中，各精密加無水乙醇9ml與氯化三苯四氮唑試液2ml，搖勻，再各精密加氫氧化四甲基銨試液1ml，搖勻，在25℃暗處放置40～50分鐘，照分光光度法，在485nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得。操作應(yīng)避光。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第83頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分3.討論（1）基團(tuán)對(duì)反應(yīng)速度的影響C11=O＞C11－OHC21－OH＞C21-酯C16無論何種取代基ν↓本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第84頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（2）溶劑、水分的影響含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10%含水30%→幾無反應(yīng)—無醛無水乙醇醛→A↑—無水乙醇還原性本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第85頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（3）O2與光線的影響反應(yīng)過程反應(yīng)產(chǎn)物怕光→避光、快速O2影響顏色強(qiáng)度和穩(wěn)定性→隔絕空氣、快速、充N2本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第86頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（4）堿的種類及加入順序反應(yīng)應(yīng)在強(qiáng)堿性（pH13.75）條件下進(jìn)行以氫氧化四甲基銨的結(jié)果最佳加入順序：避免皮質(zhì)激素分解本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第87頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（5）溫度與時(shí)間t℃↑→ν↑→甲瓚分解↑→%↓ChP25℃40～45′BP30℃1h本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第88頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分4.特點(diǎn)：缺點(diǎn)影響因素太多優(yōu)點(diǎn)測(cè)定結(jié)果能指示藥品的穩(wěn)定性（氧化及降解產(chǎn)物無此反應(yīng)）本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第89頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分腎上腺皮質(zhì)激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基1.原理HCl（縮合）異煙肼比色法本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第90頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分異煙腙（黃色）本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第91頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分3.討論(1)反應(yīng)速度C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反應(yīng)反應(yīng)專屬性C3－酮基本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第92頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（2）溶劑的選擇異煙肼鹽酸鹽→甲醇、乙醇無水甲醇無水乙醇-植物油存在時(shí)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第93頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（3）水分、O2與光線的影響含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓不揮發(fā)溶劑、不吸收水分時(shí)→O2與光線無影響本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第94頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分酸、異煙肼的量(4)鹽酸:異煙肼=2:1樣品:異煙肼=1:8→ν↑酸度↑→異煙肼鹽↓酸度↓→A↓溫度(5)t℃↑→ν↑*該法由于影響因素多，已被HPLC法取代本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第95頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分1.原理λmax=465λmax=515雌激素Kober反應(yīng)比色法△△本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第96頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第97頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分雌二醇-3-甲醚λmax=465λmax=515本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第98頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分

Kober反應(yīng)缺點(diǎn)：（1）條件較難控制，易出雙色→黃+紅（2）重現(xiàn)性較差：①呈色強(qiáng)度和穩(wěn)定性受試劑濃度、組成、反應(yīng)時(shí)間和溫度的影響。②甾體激素提取物中其他物質(zhì)及制劑中穩(wěn)定劑、賦形劑、溶劑對(duì)測(cè)定有干擾。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第99頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分鐵－酚試劑[(NH4)2Fe(SO4)2

+H2SO4+H2O2+苯酚]Iron-phenolReagent濃硫酸和過氧化氫的作用：濃硫酸和過氧化氫將2價(jià)鐵氧化成3價(jià)鐵本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第100頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分鐵－酚試劑[(NH4)2Fe(SO4)2

+H2SO4+H2O2+苯酚]*鐵鹽的作用加快黃色產(chǎn)物的形成、促進(jìn)黃色向紅色的轉(zhuǎn)變、加強(qiáng)紅色產(chǎn)物的穩(wěn)定性*酚的作用加快紅色產(chǎn)物的形成消除反應(yīng)產(chǎn)生的熒光Iron-phenolReagent本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第101頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分2.特點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)較高的靈敏度具有一定的選擇性缺點(diǎn)非化學(xué)計(jì)量反應(yīng)反應(yīng)應(yīng)控制條件、注意平行原則本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第102頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分（三）HPLC法USP、BP、JP均采用RP－HPLC（大多內(nèi)標(biāo)法）特點(diǎn)用樣量少，靈敏度高，分離效果好，測(cè)定速度快（甾體激素類藥物常含有結(jié)構(gòu)相似的其他甾體雜質(zhì)，對(duì)利用結(jié)構(gòu)特征設(shè)計(jì)的比色法有干擾）本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第103頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分應(yīng)用示例-1氫化可的松

鑒別:（1）取本品約0.1mg，加乙醇1ml溶解后，加臨用新制的硫酸苯肼試液8ml，在70℃加熱15分鐘，即顯黃色。（2）取本品約2mg，加硫酸2ml使溶解，放置5分鐘，顯棕黃色至紅色，并顯綠色熒光；將此溶液傾入10ml水中，即變成黃色至橙黃色，并微帶綠色熒光，同時(shí)生成少量絮狀沉淀。（3）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集283圖）一致。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第104頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分應(yīng)用示例-1氫化可的松

檢查:有關(guān)物質(zhì)照高效液相色譜法（附錄VD）測(cè)定。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，量取與對(duì)照溶液中潑尼松龍峰相應(yīng)的雜質(zhì)峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算，其含量不得過0.5%，其他單個(gè)雜質(zhì)的峰面積不得大于對(duì)照溶液中氫化可的松峰面積的1/2倍，未知各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液中氫化可的松峰面積的1.5倍。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第105頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分應(yīng)用示例-1氫化可的松

含量測(cè)定:照高效液相色譜法（附錄VD）測(cè)定。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（28：72)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為245nm。取氫化可的松與潑尼松龍，加甲醇溶解并稀釋制成每lml中約含5μg的溶液，取20μ1注人液相色譜儀，記錄色譜圖，出峰順序依次為潑尼松龍與氫化可的松，潑尼松龍峰與氫化可的松峰的分離度應(yīng)符合要求。取本品適量，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每lml中約含0.lmg的溶液，精密量取20μl注人液相色譜儀，記錄色譜圖；另取氫化可的松對(duì)照品，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)箅，即得。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第106頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分應(yīng)用示例-2醋酸地塞米松鑒別:（1）取本品約10mg，加甲醇1ml，微溫溶解后，加熱的堿性酒石酸銅試液1ml，即生成紅色沉淀。（2）取本品50mg，加乙醇制氫氧化鉀試液2ml，置水浴中加熱5分鐘，放冷，加硫酸溶液（1→2）2ml，緩緩煮沸1分鐘，即發(fā)生乙酸乙酯的香氣。（3）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集546圖）一致。（4）本品顯有機(jī)氟化物的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第107頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分應(yīng)用示例-3醋酸潑尼松鑒別:（1）取本品約1mg，加乙醇2ml使溶解，加10％氫氧化鈉溶液2滴與氯化三苯四氮唑試液1ml，即顯紅色。（2）取本品約5mg，加硫酸1ml使溶解，放置5分鐘，即顯橙色；將此溶液傾入10ml水中，即變成黃色，漸漸變?yōu)樗{(lán)綠色。（3）在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。（4）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集549圖）一致。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第108頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分應(yīng)用示例-3醋酸潑尼松檢查:有關(guān)物質(zhì)取本品，加三氯甲烷-甲醇（9:1）制成每1ml中約含4mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置50ml量瓶中，加三氯甲烷-甲醇（9:1）稀釋至刻度．搖勻，作為對(duì)照溶液。照薄層色譜法（附錄ⅤB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水（385:60:15:2）為展開劑，展開，晾干，在105℃干燥10分鐘，放冷，噴以堿性四氮唑藍(lán)試液，立即檢視。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第109頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分應(yīng)用示例-4甲睪酮鑒別:（1）取本品數(shù)毫克，加硫酸-乙醇（2:1）1ml使溶解，即顯黃色并帶有黃綠色熒光。（2）在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液的下峰保留時(shí)間一致。（3）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集120圖）一致。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第110頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分應(yīng)用示例-5黃體酮鑒別:（1）取本品約5mg，置小試管中，加甲醇0.2ml溶解后，加亞硝基鐵氰化鈉的細(xì)粉約3mg、碳酸鈉及醋酸銨各約50mg，搖勻，放置10-30分鐘，應(yīng)顯藍(lán)紫色。（2）取本品約0.5mg，置小試管中，加異煙肼約1mg與甲醇1ml溶解后，加稀鹽酸1滴，即顯黃色。（3）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集434圖）一致。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第111頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分應(yīng)用示例-6炔雌醇鑒別:（1）取本品2mg，加硫酸2ml溶解后，溶液顯橙紅色，在反射光線下出現(xiàn)黃綠色熒光；將此溶液傾入水4ml中，即生成玫瑰紅色絮狀沉淀。（2）取本品10mg，加乙醇1ml溶解后，加硝酸銀試液5-6滴，即生成白色沉淀。（3）在含量測(cè)定項(xiàng)不記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。（4）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集259圖）一致。本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第112頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

1、甾體激素類藥物的結(jié)構(gòu)中能和四氮唑鹽發(fā)生顯色反應(yīng)的基團(tuán)A.酚羥基B.活潑次甲基C.甲酮基D.C17-α-醇酮基E.酮基本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第113頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

2、用異煙肼比色法測(cè)定甾體激素藥物含量時(shí)，其溶液的環(huán)境是A．強(qiáng)酸性B．中性C．強(qiáng)堿性D．弱堿性E．以上都不對(duì)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第114頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

3、能與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)生成藍(lán)紫色的藥物是A．雌二醇B．黃體酮C．醋酸可的松D．苯丙酸諾龍E．以上都不對(duì)本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第115頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

4、異煙肼比色法測(cè)定甾體激素類藥物時(shí)，藥物的呈色基團(tuán)是A.酮基B.酚羥基C.活潑次甲基D.炔基E.甾體母核本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第116頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

5、四氮唑比色法可用于下列哪個(gè)藥物的含量測(cè)定A.氫化可的松B.苯丙酸諾龍C.雌二醇D.炔雌醇E.黃體酮本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第117頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

6、Kober反應(yīng)適用于哪一藥物的含量測(cè)定A.黃體酮B.雌二醇C.甲基睪丸素D.甲基炔諾酮E.氫化可的松本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第118頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

7、紅外吸收光譜圖中，羥基的伸縮振動(dòng)范圍約為：A.3600-3300cm-1

B.3300-3000cm-1C.3000-2700cm-1D.2400-2100cm-1

E.1900-1650cm-1本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第119頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

8、紅外吸收光譜圖中，羰基的伸縮振動(dòng)波數(shù)為：A.3600-3300cm-1

B.3300-3000cm-1C.3000-2700cm-1D.2400-2100cm-1

E.1900-1650cm-1本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第120頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

9、用四氮唑比色法測(cè)定皮質(zhì)激素類藥物，是利用C17–α醇酮基的何種性質(zhì)A．氧化性B．還原性C．可加成性D．酸性E．堿性本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第121頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

10、可與重氮苯磺酸作用生成紅色偶氮染料的甾體激素類藥物是A.醋酸可的松B.睪酮C.黃體酮D.雌二醇E.炔諾酮本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第122頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

11、醋酸地塞米松的有機(jī)氟化物反應(yīng)中，與氟離子形成藍(lán)紫色配位化合物的試液是A.溴酚藍(lán)試液B.甲基紫試液C.茜素氟藍(lán)試液D.淀粉-碘化鉀試液E.酚酞試液本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第123頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

12、不能與黃體酮反應(yīng)顯色的是A.三氯化鐵B.硫酸苯肼C.異煙肼D.亞硝基鐵氰化鈉E.2,4-二硝基苯肼本文檔共134頁(yè)；當(dāng)前第124頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)19點(diǎn)48分練習(xí)與思考[A型題]

13、甾體激素類藥物上的酮基能與常用的羰基試劑異煙肼起縮合反應(yīng)，該反應(yīng)最適合A．△4-3-酮基D．C17上的酮基B．C20上的