紫外可見吸收光譜分析演示文稿

紫外可見吸收光譜分析演示文稿本文檔共91頁；當前第1頁；編輯于星期日\21點48分（優(yōu)選）紫外可見吸收光譜分析本文檔共91頁；當前第2頁；編輯于星期日\21點48分第一節(jié)概述

本文檔共91頁；當前第3頁；編輯于星期日\21點48分一、儀器分析方法分類（回顧）：電化學(xué)分析法光學(xué)分析法色譜分析法其它分析方法原子光譜法分子光譜法

X射線光譜法核磁波譜

紫外—可見光光譜法熒光光譜法紅外吸收光譜法拉曼光譜法

本文檔共91頁；當前第4頁；編輯于星期日\21點48分本章是儀器分析課程中光分析方法的第一章，光分析方法中的一些基本理論、基本概念、基本專業(yè)術(shù)語，在本章中首次出現(xiàn)并應(yīng)用。紫外－可見吸收光譜法歷史較久遠，應(yīng)用十分廣泛，與其它各種儀器分析方法相比，紫外－可見吸收光譜法所用的儀器簡單、價廉，分析操作也比較簡單，而且分析速率較快。在有機化合物的定性、定量分析方面，例如化合物的鑒定、結(jié)構(gòu)分析和純度檢查以及在藥物、天然產(chǎn)物化學(xué)中應(yīng)用較多。

本文檔共91頁；當前第5頁；編輯于星期日\21點48分光分析的基本過程：（1）能源提供能量；（2）能量與被測物之間的相互作用；（3）產(chǎn)生信號。基本特點：（1）所有光分析法均包含三個基本過程；（2）選擇性測量，不涉及混合物分離（不同于色譜分析）；（3）涉及大量光學(xué)元器件。本文檔共91頁；當前第6頁；編輯于星期日\21點48分電磁幅射的波長分布γ射線：5～140pm

X射線：10－3～10nm光學(xué)區(qū)：10～1000μm

遠紫外區(qū)：10～200nm

近紫外區(qū)：200～380nm

可見區(qū)：380～780nm近紅外區(qū)：0.78～2.5μm中紅外區(qū)：2.5～50μm遠紅外區(qū)：50～1000μm微波：0.1mm～1m無線電波：>1m紫外－可見吸收光譜是基于分子內(nèi)電子躍遷，是分子光譜。本文檔共91頁；當前第7頁；編輯于星期日\21點48分電磁輻射的基本性質(zhì)電磁輻射（電磁波）：以接近光速（真空中為光速）傳播的能量；

c=λν=ν/σ

E=hν=hc/λc：光速=2.998×1010cm·s；λ：波長；ν：頻率；σ：波數(shù)；E：能量；

h

：普朗克常數(shù)＝6.624×10-34J·s

電磁輻射具有波動性和微粒性；本文檔共91頁；當前第8頁；編輯于星期日\21點48分分子光譜（帶狀光譜）：基于分子中電子能級、振-轉(zhuǎn)能級躍遷；紫外光譜法（UV）；紅外光譜法（IR）；分子熒光光譜法（MFS）；分子磷光光譜法（MPS）；核磁共振與順磁共振波譜（N）；本文檔共91頁；當前第9頁；編輯于星期日\21點48分不同物質(zhì)具有不同的分子結(jié)構(gòu)，對不同波長的光會產(chǎn)生選擇性吸收，因而具有不同的吸收光譜。而各種化合物，無機化合物或有機化合物吸收光譜的產(chǎn)生在本質(zhì)上是相同的，都是外層電子躍遷的結(jié)果，但二者在電子躍遷類型上有一定區(qū)別。本文檔共91頁；當前第10頁；編輯于星期日\21點48分有機化合物吸收可見光或紫外光，σ、π和n電子就躍遷到高能態(tài)，可能產(chǎn)生的躍遷有σ→σ*、n→σ*、π→π*和n→π*。各種躍遷所需要的能量或吸收波長與有機化合物的基團、結(jié)構(gòu)有密切關(guān)系，根據(jù)此原理進行有機化合物的定性和結(jié)構(gòu)分析。

無機絡(luò)合物吸收帶主要是由電荷轉(zhuǎn)移躍遷和配位場躍遷而產(chǎn)生的。電荷轉(zhuǎn)移躍遷的摩爾吸收系數(shù)很大，根據(jù)朗伯－比爾定律，可以建立這些絡(luò)合物的定量分析方法。本文檔共91頁；當前第11頁；編輯于星期日\21點48分本文檔共91頁；當前第12頁；編輯于星期日\21點48分二、應(yīng)用：1．定量分析：

有色物質(zhì)→可見光區(qū)：340~800nm

對紫外線有吸收的無色物質(zhì)→紫外光區(qū)：

200~340nm

靈敏度ppm，精密度RSD:0.5%本文檔共91頁；當前第13頁；編輯于星期日\21點48分二、應(yīng)用：2．定性分析：提供某些分子的部分結(jié)構(gòu)信息例：苯的B帶吸收（230~270nm間出現(xiàn)7個精細結(jié)構(gòu)的峰）本文檔共91頁；當前第14頁；編輯于星期日\21點48分

第二節(jié)吸收定律與光譜圖本文檔共91頁；當前第15頁；編輯于星期日\21點48分一、朗伯—比耳定律㈠吸光度(A)的定義I0It

當一束平行光通過均勻的溶液介質(zhì)時，光的一部分被吸收，一部分被器皿反射。設(shè)入射光強度為I0，透射光強度為It。則吸光度(A)表示物質(zhì)對光的吸收程度，其定義為:本文檔共91頁；當前第16頁；編輯于星期日\21點48分一、朗伯-比耳定律㈡朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律，俗稱光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。⒈當C采用重量單位時，吸收定律表達為:

A=abc

式中：a：吸光系數(shù)，L/g*cmb：光程，cmc：濃度，g/L

可知：A與c呈線形關(guān)系，為定量分析的理論依據(jù)本文檔共91頁；當前第17頁；編輯于星期日\21點48分一、朗伯—比耳定律2.當C采用摩爾濃度時，吸收定律表達為:

A=εbc

ε:摩爾吸光系數(shù)，L/mol·cmc:摩爾濃度，mol/L本文檔共91頁；當前第18頁；編輯于星期日\21點48分一、朗伯—比耳定律㈢透光率（T）

I0

It

定義為：

則：

應(yīng)用：儀器的調(diào)整

T（%）：0~100

（全吸收）

（無吸收）

A：∞

~0本文檔共91頁；當前第19頁；編輯于星期日\21點48分二、紫外-可見吸收光譜圖定義：固定試樣濃度和吸收池厚度，以吸收度（或透光率）對波長所作的曲線。

[例]0.001mol·L-1高錳酸鉀、重鉻酸鉀光譜圖。掃描本文檔共91頁；當前第20頁；編輯于星期日\21點48分-胡羅卜素咖啡因阿斯匹林丙酮幾種有機化合物的吸收光譜圖。本文檔共91頁；當前第21頁；編輯于星期日\21點48分濃度與吸收曲線本文檔共91頁；當前第22頁；編輯于星期日\21點48分紫外-可見吸收光譜圖的應(yīng)用

定量：一般總有一最大吸收峰，其對應(yīng)波長稱為最大吸收波長（λmax）,往往以λmax作為定量分析時的單色光波長，可最大限度地提高靈敏度。

簡單定性，回答“是不是”的問題。本文檔共91頁；當前第23頁；編輯于星期日\21點48分第三節(jié)紫外-可見光分光光度計

本文檔共91頁；當前第24頁；編輯于星期日\21點48分一、分類單光束分光光度計雙光束分光光度計

單波長分光光度計

雙波長分光光度計可見光分光光度計

紫外-可見光分光光度計本文檔共91頁；當前第25頁；編輯于星期日\21點48分本文檔共91頁；當前第26頁；編輯于星期日\21點48分本文檔共91頁；當前第27頁；編輯于星期日\21點48分二、基本光路圖本文檔共91頁；當前第28頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）

光源單色器樣品室檢測器顯示本文檔共91頁；當前第29頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）1.光源：提供穩(wěn)定的復(fù)合光

可見光區(qū)：鎢燈、碘鎢燈。其輻射波長范圍在320～2500nm。

紫外區(qū)：氫燈、氘燈。發(fā)射185～400nm的連續(xù)光譜。本文檔共91頁；當前第30頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）2.單色器

作用：從光源的復(fù)合光中分離出所需單色光。組成：由色散元件和狹縫組成。光源單色器樣品室檢測器顯示本文檔共91頁；當前第31頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）2.單色器①色散元件作用：將復(fù)合光分解成連續(xù)單色光。A.棱鏡（靠折射作用分光）可以得到波長非均勻分布的連續(xù)光譜，光強損失較大。400nm800nm本文檔共91頁；當前第32頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）

棱鏡（Prism）：棱鏡的色散作用是基于構(gòu)成棱鏡的光學(xué)材料對不同波長的光具有不同的折射率。波長大的折射率小，波長小的折射率大。Cornu棱鏡bLittrow棱鏡本文檔共91頁；當前第33頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）棱鏡：依據(jù)不同波長光通過棱鏡時折射率不同入射狹縫準直透鏡棱鏡聚焦透鏡出射狹縫白光紅紫λ1λ2800400500

600本文檔共91頁；當前第34頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）光柵：在鍍鋁的玻璃表面刻有數(shù)量很大的等寬度等間距條痕(600、1200、2400條/mm)。提供波長均勻分布的連續(xù)光譜，可用于吸收光譜的自動掃描。原理：

利用光通過光柵時發(fā)生衍射和干涉現(xiàn)象而分光.。光柵衍射示意圖M1光屏透鏡平面透射光柵出射狹縫M2本文檔共91頁；當前第35頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）ABCDdP0距離相對強度P’112光柵例：7530型紫外—可見光分光光度計。步進馬達帶動光柵，得到勻速變化的單色光。光柵制作：機刻600～2880條/mm復(fù)制光柵（照相，化學(xué)腐蝕）本文檔共91頁；當前第36頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）2.單色器②狹縫

由銳邊金屬片組成A.入射狹縫：位于光源與色散元件之間。作用：是限制雜散光進入色散元件。B.出口狹縫：位于色散元件與吸收池之間。作用：把額定波長單色光分離出單色器。光源樣品室檢測器顯示本文檔共91頁；當前第37頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）2.單色器②狹縫

狹縫寬度可調(diào)

定性分析時，窄一點，單色光純，但光強弱。

定量分析時，寬一點，靈敏度高。

例：7530型分光光度計0.2nm，1.0nm，2.0nm本文檔共91頁；當前第38頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）3.

吸收池（也可稱為比色皿、樣品池）

作用：盛放試液。①材料

A.普通光學(xué)玻璃：用于可見光區(qū)，因為它吸收紫外光。

B.石英玻璃：用于紫外光區(qū)，亦可用于可見光區(qū)。本文檔共91頁；當前第39頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）3.

吸收池（也可稱為比色皿、樣品池）

②寬度：0.5cm，1cm，2cm③使用注意事項固定使用同一比色皿，因為每個比色皿的壁厚、光程、吸光特性等不盡相同。本文檔共91頁；當前第40頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）4.檢測器一類光電轉(zhuǎn)換元件。

常用類型有：①光電池②光電管③光電倍增管本文檔共91頁；當前第41頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）4.檢測器①光電池

SeFe(Cu)h玻璃Ag(Au)透明膜-收集極塑料--對500~600nm光靈敏，用于可見光區(qū)。容易產(chǎn)生疲勞效應(yīng)，便易。72G型光電比色計。

本文檔共91頁；當前第42頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）4.檢測器②光電管90VDC直流放大陰極R-+光束e陽極絲（Ni）抽真空靈敏度比光電池大例：721型可見光分光光度計本文檔共91頁；當前第43頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）4.檢測器③光電倍增管1個光子產(chǎn)生106~107個電子石英套光束柵極，Grill陽極屏蔽對光特別敏感，靈敏度比光電管高200倍。對供電量要求高，需要達到0.01～0.05%的穩(wěn)定性。本文檔共91頁；當前第44頁；編輯于星期日\21點48分一種新型檢測器：光電二極管陣列，PDASiO2窗p

型硅n型硅基pnpnpnpnpnpn0.025mm2.5mm側(cè)視(crosssection)頂視(topview)光束512個1024個本文檔共91頁；當前第45頁；編輯于星期日\21點48分三、主要部件（以單光束分光光度計為例）5.顯示器將檢測器產(chǎn)生的光電流用直觀的形式顯示出來。例：72G型722型7530型

電表指針顯示數(shù)字形式顯示屏幕形式顯示本文檔共91頁；當前第46頁；編輯于星期日\21點48分第四節(jié)測試條件本文檔共91頁；當前第47頁；編輯于星期日\21點48分一、分析波長1.一般情況下，選λmax作分析波長，以便獲得最高的靈敏度。2.對于高濃度樣品，為保證足夠的工作直線的線形范圍，可選用靈敏度較低的吸收峰波長。3.λmax受到其它波峰干擾時，可選用別的吸收峰波長。本文檔共91頁；當前第48頁；編輯于星期日\21點48分二、出口狹縫寬度最佳寬度的選擇方法：在A不減小時的最大狹縫寬度。（因為，在一定寬度范圍內(nèi)，A不變；過大時，由于干擾譜帶或非吸收光出現(xiàn)在光譜通帶內(nèi)，A減小。）本文檔共91頁；當前第49頁；編輯于星期日\21點48分三、合適的吸收度范圍根據(jù)吸收定律，A=0.4343時，吸收度測試量誤差最小。實際工作中，將試樣吸收度控制在0.2～0.8之間?？刂品椒ǎ哼x擇合適的比色皿寬度，稀釋待測樣等。本文檔共91頁；當前第50頁；編輯于星期日\21點48分第五節(jié)試樣體系條件的選擇本文檔共91頁；當前第51頁；編輯于星期日\21點48分顯色反應(yīng)在分光光度分析中，利用顯色反應(yīng)把待測組分X轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩衔铮缓笤龠M行測定。使試樣中的被測組分與化學(xué)試劑作用生成有色化合物的反應(yīng)叫顯色反應(yīng)。

mX（待測物）＋nR（顯色劑）＝XmRn（有色化合物）顯色反應(yīng)主要有配位反應(yīng)和氧化還原反應(yīng)，其中絕大多數(shù)是配位反應(yīng)。本文檔共91頁；當前第52頁；編輯于星期日\21點48分選擇顯色反應(yīng)的一般標準1、靈敏度高選擇較大(104～105)的顯色反應(yīng)。2、選擇性好顯色劑僅與被測組分顯色而與其它共存組分不顯色。避免共存組分干擾。3、有色物組成固定如：

Fe3++磺基水楊酸→三磺基水楊酸鐵(黃色)

（組成固定）

Fe3++SCN-→FeSCN2+、Fe(SCN)2+……

（組成不固定）本文檔共91頁；當前第53頁；編輯于星期日\21點48分

4、有色物穩(wěn)定性高其它離子干擾才小。如三磺基水楊酸鐵的Kf=1042,F-

、H3PO4

對它無干擾。

5、顯色過程易于控制而且有色化合物與顯色劑之間的顏色差別應(yīng)盡可能大。本文檔共91頁；當前第54頁；編輯于星期日\21點48分一、酸堿度①影響顯色劑的平衡濃度和顏色

HR?H++R-nR-+Mn+?MRn②影響被測物質(zhì)的存在狀態(tài)

pH升高，M→M(OH)……M(OH)n甚至↓③影響絡(luò)合物的組成及顏色在pH＝2～3Fe(ssal)+

紫紅色在pH＝4～7Fe(ssal)22-

棕橙色

在pH＝8～10Fe(ssal)3

黃色在pH>12Fe(OH)3

沉淀本文檔共91頁；當前第55頁；編輯于星期日\21點48分一、酸堿度pH會影響顯色劑的解離，被測離子的水解等，所以，要選擇最佳酸度，并用緩沖液來控制。ApH選擇最佳pH值方法：固定試液濃度，改變pH值測A，做A-pH圖，找出對A影響最小的pH值范圍。本文檔共91頁；當前第56頁；編輯于星期日\21點48分二、顯色劑濃度1、顯色劑的用量顯色反應(yīng)一般可表示為M+R?MR顯色劑用量，適當過量。Aab(1)CRa(2)CR(3)CR本文檔共91頁；當前第57頁；編輯于星期日\21點48分二、顯色劑濃度2、最佳濃度選擇作A-C顯色劑圖，找出對A影響最小的濃度范圍。AC顯色劑本文檔共91頁；當前第58頁；編輯于星期日\21點48分三、顯色時間顯色反應(yīng)有快慢，有的有色配合物容易褪色，因此不同的顯色反應(yīng)需放置不同的時間，并在一定的時間范圍內(nèi)進行比色測定。試液自加入顯色劑等且定容后開始計時，測A，制作A－t曲線，(2)、(3)用秒表控時t-minab(1)(3)t-mint-mina(2)本文檔共91頁；當前第59頁；編輯于星期日\21點48分三、顯色時間試液顏色常隨時間而變化。

1.找到對顏色變化影響最小的時間段。2.每個試液都要有相同的顯色時間。A

t本文檔共91頁；當前第60頁；編輯于星期日\21點48分四、溫度有些反應(yīng)需要加熱。有些顯色劑或有色配合物在較高溫度下易分解褪色。此外溫度對光的吸收及顏色深淺也有影響，要求標準溶液和被測溶液在測定過程中溫度一致。固定其它條件，改變T，作A~T曲線，尋找適宜反應(yīng)溫度。TATATATATA本文檔共91頁；當前第61頁；編輯于星期日\21點48分四、溫度溫度能影響顯色反應(yīng)的速度，影響顏色的穩(wěn)定性。據(jù)此可以找到最佳的溫度。有些顯色反應(yīng)受溫度影響較大，這時候，要控制恒定的溫度。本文檔共91頁；當前第62頁；編輯于星期日\21點48分

5、溶劑：有機溶劑可降低有色化合物的離解度。合適的表面活性劑可增溶、增敏、增穩(wěn)。6、共存干擾離子的影響及消除：包括：正干擾（共存離子本身有色or與顯色劑反應(yīng)，在測量條件下有吸收）和負干擾（共存離子引起顯色反應(yīng)不完全）消除干擾的方法(a)控制酸度； (b)加入掩蔽劑；(c)改變干擾離子價態(tài)； (d)分離干擾離子。本文檔共91頁；當前第63頁；編輯于星期日\21點48分實驗：鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵

鐵鹽標準溶液0.0100mg/mL0.1%鄰二氮菲（又稱鄰菲咯琳）水溶液1%鹽酸羥胺水溶液HAc-NaAc緩沖溶液（pH=4.6）稱取136g優(yōu)級純醋酸鈉，加120mL冰醋酸，加水溶解后，稀釋至500mL本文檔共91頁；當前第64頁；編輯于星期日\21點48分實驗：鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵

橙紅色配合物的最大吸收波長在508nm處，摩爾吸光系數(shù)ε508=1.1×104，反應(yīng)的靈敏度、穩(wěn)定性、選擇性均較好。此反應(yīng)可用于微量Fe2+的測定，如果鐵以Fe3+的形式存在，則應(yīng)預(yù)先加入還原劑鹽酸羥胺或?qū)Ρ蕉訉e3+還原成Fe2+。4Fe3++2NH2OH—→4Fe2++N2O+4H++H2O

羥胺本文檔共91頁；當前第65頁；編輯于星期日\21點48分實驗：鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵

Bi3+、Cd2+、Hg+、Zn2+、Ag+等離子與鄰二氮菲生成沉淀；Cu2+、Co2+、Ni2+等離子則形成有色配合物，因此，當這些離子共存時，應(yīng)注意它們的干擾。鋁和磷酸鹽含量大時，使反應(yīng)速度慢，CN－存在將與Fe2+生成配合物，嚴重干擾測定，需預(yù)先除去。酸度高時，反應(yīng)進行慢；酸度太低，則Fe2+水解，影響顯色，測定時的酸度是控制在pH=4-6。本文檔共91頁；當前第66頁；編輯于星期日\21點48分第六節(jié)定量分析法本文檔共91頁；當前第67頁；編輯于星期日\21點48分定量分析方法：標準曲線法BlankStandardSampleSample本文檔共91頁；當前第68頁；編輯于星期日\21點48分一、單組分的定量分析

（測定樣品中某一種成分的含量）1.工作曲線法（適用組成較簡單的、批量的樣品）依據(jù)：A-C呈線性關(guān)系，作A-C曲線。⑴配制一系列待測成分的標準溶液C1C2C3C4C5⑵測出相應(yīng)的吸光度A1A2A3A4A5BlankStandardSampleSample本文檔共91頁；當前第69頁；編輯于星期日\21點48分⑶建立工作直線（A→C）①作圖法②回歸法本文檔共91頁；當前第70頁；編輯于星期日\21點48分⑷測量待測樣品，得A樣①從工作直線上找到待測成分的濃度C樣②由回歸方程計算出C樣本文檔共91頁；當前第71頁；編輯于星期日\21點48分2.增量法（適用于組成較復(fù)雜的樣品）

①

取若干份等體積待測液。②

加入與待測液等體積的一系列標準溶液。③

作A-C標曲線，此線與C標軸交點即為C樣。C0=0（試劑空白）等體積標液等體積待測液C0C3C2C1C4本文檔共91頁；當前第72頁；編輯于星期日\21點48分理論依據(jù)：A=εbc=εb(C樣+C標)當A=0時，C樣=-C標方法特點：適用于組成較復(fù)雜的樣品，對于批量樣品較麻煩。AC標0（C0）-C樣本文檔共91頁；當前第73頁；編輯于星期日\21點48分二、多組分同時測定

（同時測定一個樣品中的幾個組分）溶液的總吸光度等于各組分的吸光度之和：

A=A1+A2+A3+……+An吸收峰互不重疊

A、B兩組分的吸收峰相互不重疊，則可分別在A、B處用單組分含量測定法測定組分A和B。本文檔共91頁；當前第74頁；編輯于星期日\21點48分二、多組分同時測定

（同時測定一個樣品中的幾個組分）

（1）n個波長處分別測定樣品的吸光度。

（假設(shè)測定n個組分，一般選擇各個組分的λmax）（2）根據(jù)吸光度的加和性建立n個方程，解聯(lián)立方程，可得n個組分的濃度。原理：吸光度加和性本文檔共91頁；當前第75頁；編輯于星期日\21點48分例：同時測某樣品中二個組分

分別在λ1、λ2處測樣品的吸光度A1、A2。

（設(shè)定光程b=1cm）

λ1:A1=ε11C1+ε12C2λ2:A2=ε21C1+ε22C2

εij：波長i處，j組分的摩爾吸光系數(shù)。

文獻，也可通過純組分的工作直線的斜率求得。本文檔共91頁；當前第76頁；編輯于星期日\21點48分例：同時測某樣品中三個組分

分別在λ1、λ2、λ3處測樣品的吸光度A1、A2、A3。

（設(shè)定光程b=1cm）

λ1:A1=ε11C1+ε12C2+ε13C3λ2:A2=ε21C1+ε22C2+ε23C3λ3:A3=ε31C1+ε32C2+ε33C3本文檔共91頁；當前第77頁；編輯于星期日\21點48分分光光度計的類型按光束分單光束分光光度計722、721、723、752雙光束分光光度計Jasco-UV/VISUV-2450/2550760CRT單波長單光束分光光度計0.575光源單色器吸收池檢測器顯示本文檔共91頁；當前第78頁；編輯于星期日\21點48分第七節(jié)雙光束分光光度計的應(yīng)用

應(yīng)用：能克服光源不穩(wěn)定造成的誤差

一、光路圖

I0I0I0I1I2樣品參比切光器本文檔共91頁；當前第79頁；編輯于星期日\21點48分單波長雙光束分光光度計比值光源單色器吸收池檢測器顯示光束分裂器本文檔共91頁；當前第80頁；編輯于星期日\21點48分二、工作原理

參比：樣品：則：

作ΔA-C工作直線，定量。由于ΔA與I0無關(guān)，所以，能夠克服I0不穩(wěn)定所造成的誤差。

本文檔共91頁；當前第81頁；編輯于星期日\21點48分第八節(jié)雙波長分光光度計的應(yīng)用

特點：能消除共存干擾組分的影響；能消除渾濁試樣的干擾；能用于高濃度試樣的測量。屬于背景吸收一、光路圖