明視野顯微鏡

明視野顯微鏡用于觀察組織片等標(biāo)本的儀器01正確的用法和操作步驟基本概念注意事項(xiàng)目錄030204基本信息明視場(chǎng)顯微鏡，是通過聚焦鏡匯聚到樣品上，因而形成一個(gè)錐形的明亮光束并通過樣品進(jìn)入物鏡的顯微鏡。用于觀察經(jīng)染色或本身具備顏色的細(xì)胞、組織片等標(biāo)本。明視野顯微鏡（brightfieldmicroscope）是最通用的一種光學(xué)顯微鏡。利用光線照明，標(biāo)本中各點(diǎn)依其光吸收的不同在明亮的背景中成像。它由物鏡、目鏡、聚光鏡、光源、載物臺(tái)和支架等部件組成。其中聚光鏡用于調(diào)節(jié)顯微鏡的照明，物鏡和目鏡是放大微小物體成像的主要部件。由同軸的兩個(gè)正透鏡——物鏡和目鏡組成的顯微鏡稱為復(fù)式顯微鏡。其成像原理如圖所示。圖中F1與F1'分別為物鏡的兩個(gè)焦點(diǎn)，F(xiàn)2與F2'分別為目鏡的兩個(gè)焦點(diǎn)。物件AB置于F1的前方，經(jīng)物鏡后，形成一個(gè)倒立的實(shí)像A'B'，A'B'所在面為中間像平面，在F2稍靠后一些。A'B'經(jīng)目鏡后形成放大的虛像A"B"。A"B"對(duì)物件AB是倒立的，對(duì)中間像A'B'是正立的，A"B"再通過眼睛后在視膜上成像。未經(jīng)染色處理的生物標(biāo)本，由于對(duì)光線的吸收很少，造成反差低的影像，不利于明視野顯微鏡觀察。使用染料對(duì)生物標(biāo)本染色后增加了反差，成為明視野顯微鏡的主要觀察對(duì)象?；靖拍罨靖拍钤诿饕曇帮@微鏡中，最有代表性的就是生物顯微鏡，當(dāng)然，除了明視野，生物顯微鏡還有暗視野。暗視野顯微鏡在實(shí)際應(yīng)用中，比明視野顯微鏡要少得多，下面主要說說明視野顯微鏡在平時(shí)的應(yīng)用中要了解的部件名稱：1.目鏡與物鏡區(qū)別。同學(xué)們?cè)诓僮髦幸⒁庥^察,要觀察到目鏡沒有螺紋,物鏡有螺紋。明視野顯微鏡2.目鏡、物鏡的長(zhǎng)短與其放大倍數(shù)的關(guān)系。同學(xué)們?cè)谟^察中要了解到目鏡短,放大倍數(shù)大,目鏡長(zhǎng),放大倍數(shù)小;物鏡短,放大倍數(shù)小,物鏡長(zhǎng),放大倍數(shù)大。3.同學(xué)們?cè)谟^察過程中要感受載玻片移動(dòng)方向與物象移動(dòng)方向之間的關(guān)系。掌握繪細(xì)胞結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖1.用筆的要求:必須用2H、3H鉛筆。2.掌握繪圖的位置、標(biāo)注結(jié)構(gòu)名稱的要求。3.掌握細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)名稱和放大倍數(shù)的書寫規(guī)定等。正確的用法和操作步驟正確的用法和操作步驟1.部分同學(xué)說:明視野顯微鏡的放大倍數(shù)等于目鏡乘以物鏡。正確的說法是:顯微鏡的放大倍數(shù)等于目鏡的放大倍數(shù)乘以物鏡的放大倍數(shù)的積。2.部分同學(xué)常將紙張、頭發(fā)、樹葉,甚至手指直接放于顯微鏡下觀察。更有甚者是將材料放在反光鏡上進(jìn)行觀察。正確的做法是:必須將要觀察的物體制得薄而透明。3.隨意移動(dòng)已經(jīng)對(duì)光后的明視野顯微鏡,以致去看其他同學(xué)的顯微鏡視野中的物象時(shí)什么都看不到。擦拭光學(xué)鏡頭時(shí)習(xí)慣來回反復(fù)擦或用力過大,這樣會(huì)使物鏡、目鏡的光軸受破壞,或物鏡(目鏡)表面的增透膜損傷,影響物象、目鏡的清晰度。正確的操作方法是:用擦鏡紙輕輕向一個(gè)方向擦拭,或由中心向外旋轉(zhuǎn)式輕輕擦拭。如果只是清除鏡片上的灰塵,只需用吹風(fēng)球吹去即可。4.轉(zhuǎn)換不同倍數(shù)的物鏡時(shí)直接用手扳物鏡鏡頭,這樣就容易使物鏡的光軸發(fā)生傾斜。因?yàn)槲镧R轉(zhuǎn)換器是一個(gè)機(jī)械精密度要求高的重要部件,其轉(zhuǎn)動(dòng)板采用銅合金制成,性能穩(wěn)定,但材料質(zhì)地較軟,螺紋受力很易破壞。經(jīng)常用力扳動(dòng)物鏡,會(huì)造成光學(xué)系統(tǒng)的軸線傾斜,致使物鏡參數(shù)的改變,從而,影響顯微鏡的質(zhì)量,影響觀察效果。正確的操作方法是:用手捏著顯微鏡物鏡轉(zhuǎn)換器的轉(zhuǎn)動(dòng)扳旋轉(zhuǎn)。5.觀察臨時(shí)裝片時(shí)將顯微鏡傾斜觀察。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)如果在工作中需要使用明視野顯微鏡進(jìn)行鏡檢時(shí)，首先需要檢查所使用的顯微鏡是否處在明視野狀態(tài)。最簡(jiǎn)單的驗(yàn)證方法就是看看裝在載物臺(tái)下面的是哪種聚光器(相差聚光器、微分干涉/相差聚光器只要放在“0”（空擋）擋處也都可以用明視野觀察。在使用較高級(jí)的顯微鏡時(shí)，就算顯微鏡上安裝的是明視野聚光器，但仍需要根據(jù)所選用物鏡鏡頭的種類核實(shí)一下所用的聚光器是否與之匹配。如所用的是消色差鏡頭，那么使用阿貝聚光器（數(shù)值孔徑大約為1.2）或消色差等光程聚光器（數(shù)值孔徑最大為1.4）均可。但如果需要用復(fù)消色差物鏡進(jìn)行鏡檢時(shí)，就必須考慮選用數(shù)值孔徑大的消色差