生化實(shí)驗(yàn)講解

生化實(shí)驗(yàn)講解第一頁，共十一頁，編輯于2023年，星期三第二頁，共十一頁，編輯于2023年，星期三實(shí)驗(yàn)分為兩大塊：第一塊單元操作驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)含實(shí)驗(yàn)1～7獨(dú)立操作。第二塊系列實(shí)驗(yàn)綜合性設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)含實(shí)驗(yàn)8（1～5）要求成立合作小組分工合作實(shí)驗(yàn)方案討論決定。第三頁，共十一頁，編輯于2023年，星期三注意事項(xiàng)1.填寫實(shí)驗(yàn)預(yù)定表，1人1組1個(gè)操作臺(tái)。2.利用實(shí)驗(yàn)教材、實(shí)驗(yàn)軟件（演示、網(wǎng)絡(luò)）認(rèn)真預(yù)習(xí)。3.認(rèn)真撰寫實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)報(bào)告，添上記錄和計(jì)算結(jié)果就是實(shí)驗(yàn)報(bào)告，報(bào)告要圖（表）文并茂。4.攜白大褂、實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)教材、文具（鉛筆、直尺、坐標(biāo)紙等）按時(shí)到實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)。5.當(dāng)場(chǎng)完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告，搞好桌面衛(wèi)生，經(jīng)教師檢查批準(zhǔn)后才能離開實(shí)驗(yàn)室。6.班長安排值日生打掃實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生。第四頁，共十一頁，編輯于2023年，星期三生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)考核1.實(shí)驗(yàn)報(bào)告：50%-60％，含預(yù)習(xí)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)報(bào)告寫作、結(jié)果合理性等方面。2.理論筆試：40%-50％，明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒄莆諏?shí)驗(yàn)原理、熟悉實(shí)驗(yàn)操作。第五頁，共十一頁，編輯于2023年，星期三實(shí)驗(yàn)二.粗脂肪的定量測(cè)定——索氏（SOXhlet）提取法

濾紙斗:不高于虹吸管花生碾碎去皮，電子天平稱重，2g左右。空平底燒瓶潔凈無水，電子天平稱重。抽提結(jié)束（不再有溶劑滴下）后的空瓶在水浴鍋上放3分鐘后，烘箱烘干。手套拿出，立即電子天平稱重。整個(gè)裝置在一條直線上。用后的平底燒瓶用熱水和洗滌劑洗凈。第六頁，共十一頁，編輯于2023年，星期三實(shí)驗(yàn)三.氨基酸的分離鑒定—紙層析法

先平衡，再戴手套取濾紙操作；點(diǎn)樣前鉛筆標(biāo)注點(diǎn)樣順序；點(diǎn)樣斑點(diǎn)直徑不超過0.5cm,少量多次，吹干再點(diǎn)。斑點(diǎn)間距離2cm左右。1.2~1.5cm第七頁，共十一頁，編輯于2023年，星期三四個(gè)同學(xué)一組，微量注射器最好專用；如用同根注射器取不同樣品，蒸餾水清洗5遍以上，以點(diǎn)樣樣品潤洗后，再取樣點(diǎn)樣。層析過程中觀察層析距離和展層時(shí)間間的關(guān)系，繪圖；展層距離為濾紙總長度一半以上時(shí)，即可停止層析。顯色：熱風(fēng)吹干時(shí)在點(diǎn)樣側(cè)吹。鉛筆標(biāo)注溶劑前沿和層析斑點(diǎn)的中心，計(jì)算Rf值。凡跟濾紙接觸的操作皆帶手套。第八頁，共十一頁，編輯于2023年，星期三實(shí)驗(yàn)四.血清蛋白的電泳

將粗面朝上放在緩沖液中浸泡20分鐘。

熟悉點(diǎn)樣器操作：粗細(xì)均一的一條線。電泳前混勻電極液；濾紙橋要平。染、脫色要搖晃培養(yǎng)皿。條帶要分析。第九頁，共十一頁，編輯于2023年，星期三實(shí)驗(yàn)五.微量克氏（Kjeldahl）定氮法消化：濃酸下把蛋白中1摩爾有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為1NH3→1/2(NH4)2SO4

蒸餾：濃堿可使消化液中的1/2硫酸銨分解，游離出1氨，氨使硼酸溶液中1氫離子濃度降低。標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，回復(fù)硼酸原來氫離子濃度為止。即標(biāo)準(zhǔn)酸的摩爾數(shù)＝蛋白中氮的摩爾數(shù)。注意：不要干燒。夾層水保持3/4～滿球水。第十頁，共十一頁，編輯于2023年，星期三實(shí)驗(yàn)六、七.標(biāo)準(zhǔn)曲線法求蛋白和核酸含量

標(biāo)準(zhǔn)曲線法，作圖求。試管要清洗干凈，無