農(nóng)產(chǎn)品有害成分分析第三章

第六節(jié)水產(chǎn)食品中的有毒成分

目前，世界上每年因食用有毒的魚(yú)、貝類(lèi)而引起的食物中毒事件超過(guò)兩萬(wàn)件，死亡率為1%。在海洋生物毒素上，目前報(bào)道較多的河豚毒素、貝類(lèi)毒素（包括麻痹性貝類(lèi)毒素、腹瀉性貝類(lèi)毒素、神經(jīng)性貝類(lèi)毒素、記憶缺失性貝類(lèi)毒素）、西加毒素、芋螺毒素及?？舅氐?。1當(dāng)前第1頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)一、河豚毒素河豚別名鲀，是無(wú)鱗魚(yú)的一種。世界上有200多種河豚魚(yú)，我國(guó)有70多種，其中東方豚分布最為廣泛。河豚魚(yú)肉味鮮，世界各國(guó)都有食用河豚魚(yú)的習(xí)慣，但因河豚魚(yú)含有毒素，世界各國(guó)都有因食用河豚魚(yú)中毒甚至死亡的事件。2當(dāng)前第2頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)（一）河豚毒素的性質(zhì)

河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)

是豚毒魚(yú)類(lèi)中的一種神經(jīng)毒素，為氨基全氫喹唑啉型化合物，分子式：C11H17O8N3，相對(duì)分子質(zhì)量為319.27。1950年得到河豚魚(yú)毒素晶體，1964年分子結(jié)構(gòu)被闡明，1972年被人工合成。河豚魚(yú)毒素是無(wú)色、無(wú)味、無(wú)臭的針狀結(jié)晶。不溶于水和有機(jī)溶劑，可溶于弱酸性水溶液中。把河豚的卵巢浸泡于水、醋酸和氫氧化鋇溶液中，經(jīng)過(guò)24h后，可浸出30%的TTX，用0.5%乙酸可浸出73%的TTX，用1%乙酸可浸出100%的TTX，用1%氫氧化鋇可浸出50%的TTX。3當(dāng)前第3頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)河豚魚(yú)毒素是一種生物堿，在弱酸中相對(duì)穩(wěn)定，在強(qiáng)酸性溶液中則易分解，在堿性溶液中全部被分解。例如用0.2mol/L的氨水和0.2mol/L的重碳酸鎂溶解河豚毒素可使其毒性減弱，若用1mol/L的氫氧化鈉，20min內(nèi)可使TTX分解成喹唑啉型化合物。4當(dāng)前第4頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)河豚魚(yú)毒素對(duì)紫外線(xiàn)和陽(yáng)光有強(qiáng)的抵抗能力，經(jīng)紫外線(xiàn)照射48h后，毒性無(wú)變化。在胰蛋白酶、胃蛋白酶和淀粉酶作用下不被分解。在100℃加熱4h，115℃加熱3h，120℃加熱30min，200℃以上加熱10min，可使毒性消失；一般家庭烹調(diào)加熱河豚毒素幾乎無(wú)變化。5當(dāng)前第5頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)?河豚毒素比較穩(wěn)定，不易被一般物理方法所破壞。鹽腌、日曬、加熱燒煮等方法都不能解毒。潛伏期10min~3h。?中毒的原因主要是未能識(shí)別出為河豚而誤食，也有少數(shù)是因喜食河豚魚(yú)的鮮美，但未將毒素除干凈。6當(dāng)前第6頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)（二）河豚毒素的毒性、分布

TTX

是一種毒性極強(qiáng)的天然毒素，經(jīng)腹腔注射對(duì)小鼠的LD50為8.7μg/kg

，毒性是氰化鈉的1000多倍。TTX

除在豚類(lèi)中廣泛存在外，在兩棲動(dòng)物、軟體動(dòng)物、棘皮動(dòng)物及甲殼動(dòng)物中的近百種動(dòng)物中也廣泛存在。TTX，主要分布于肝臟、卵巢、血液和皮膚中。肌肉一般視為無(wú)毒，但如果魚(yú)體死亡時(shí)間較長(zhǎng)，內(nèi)臟和血液中的毒素會(huì)慢慢滲入到肌肉中。7當(dāng)前第7頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

我國(guó)的河豚中毒多由:弓斑東方豚（Fuguocellatus）鉛點(diǎn)東方豚(Fugualboplumbeus）條紋東方豚(Fuguxanthopterus)和豹紋東方豚等引起。雄魚(yú)組織毒素的含量低于雌魚(yú)。8當(dāng)前第8頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

TTX

毒力單位一般用鼠單位（MU）表示，即在30min內(nèi)殺死一只20g左右的雄性小鼠毒素量，根據(jù)每克河豚組織中所含毒素的多少，可將河豚組織的毒力分成四個(gè)等級(jí)：20000MU以上為“猛毒”或“劇毒”；2000-20000MU之間為“強(qiáng)毒”；200-2000MU之間為“弱毒”；100MU以下為“無(wú)毒”。據(jù)測(cè)定，在產(chǎn)卵期間，紅鰭圓豚肝臟的毒力為24×106MU

，紫圓豚肝臟的毒力為65×106MU

，毒性劇烈。每年春季2-5月為河豚產(chǎn)卵期，此時(shí)含毒量最多。9當(dāng)前第9頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)（三）河豚中毒的癥狀及處理?yè)?jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年因食用河豚魚(yú)中毒而死亡的人數(shù)都在100人以上。河豚魚(yú)中毒的特點(diǎn)是發(fā)病迅速且癥狀劇烈，通常在食用10-45min內(nèi)即發(fā)生不適，在4-8h內(nèi)死亡。日本的福田博士將河豚中毒的癥狀分為四個(gè)階段：第一階段：中毒的初期癥狀食用河豚魚(yú)后首先感到發(fā)熱，接著便是嘴唇和舌尖產(chǎn)生發(fā)麻的感覺(jué)，進(jìn)食后20min-5h內(nèi)，頭部感到不適，運(yùn)動(dòng)知覺(jué)麻痹，腹痛，走起路來(lái)象喝醉酒一樣，同時(shí)出現(xiàn)嘔吐現(xiàn)象。10當(dāng)前第10頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)第二階段：運(yùn)動(dòng)不靈敏運(yùn)動(dòng)受阻是食用河豚魚(yú)中毒的一個(gè)重要特征，嘔吐后很快不能運(yùn)動(dòng)，只能坐著或躺著。

第三階段：完全運(yùn)動(dòng)麻痹

在這一時(shí)期，運(yùn)動(dòng)完全麻痹，肌肉完全松弛，指頭不能動(dòng)，但仍有反射功能。因舌頭發(fā)麻，言語(yǔ)不清，不能將自己的意志轉(zhuǎn)達(dá)給別人。隨著癥狀的發(fā)展，血壓下降很快，并出現(xiàn)呼吸困難。

第四階：意識(shí)消失

河豚中毒的患者意識(shí)一直很清醒，但在臨終前意識(shí)忽然嚴(yán)重不清，隨即呼吸停止，心臟也停止跳動(dòng)。11當(dāng)前第11頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)目前，還沒(méi)有針對(duì)河豚魚(yú)中毒的特效藥物。在中毒的初期，主要通過(guò)催吐、洗胃和下泄處理，及時(shí)把毒素排出體外。

首先應(yīng)立即洗胃，并口服牛乳、蛋清以保護(hù)胃粘膜，或以10%氫氧化鈷凝膠5-10mL口服，30min服一次，或者服活性炭、鹽類(lèi)瀉劑。血液中毒素，需利用利尿劑和注射生理鹽水，使毒素從尿中排出；

神經(jīng)系統(tǒng)損害時(shí)可給予B族維生素，并適當(dāng)給予輔酶A、ATP、肌苷、加藍(lán)他敏等，病情穩(wěn)定后可配合針灸及理療。12當(dāng)前第12頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)13當(dāng)前第13頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)14當(dāng)前第14頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)白點(diǎn)河豚

15當(dāng)前第15頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)16當(dāng)前第16頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)17當(dāng)前第17頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

（四）河豚魚(yú)毒素的提取分離與測(cè)定分析

利用河豚魚(yú)毒素的弱堿性質(zhì)，從河豚干燥內(nèi)臟用稀酸提取，并加熱除蛋白質(zhì)后得到河豚毒素粗品，在進(jìn)一步純化制備細(xì)品。純化的方法主要有活性炭柱色譜法、離子交換樹(shù)脂-活性炭色譜法、苦味酸鹽精制法和高壓液相色譜法等，通過(guò)液相色譜法可得到純度99.5%的TTX。18當(dāng)前第18頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)測(cè)定TTX的方法有生物測(cè)定法、薄層色譜法、紫外分光光度法、熒光光度法、免疫抗體法和毛細(xì)管等速電泳法等。根據(jù)TTX的性質(zhì)，首先以定性檢測(cè)的方法來(lái)判定TTX存在。

定性測(cè)定：將含有河豚毒素的殘?jiān)蛩芤喝苡诹蛩嶂?，加少量的重鉻酸鉀，如果呈現(xiàn)綠色表明有河豚毒素。19當(dāng)前第19頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

含量測(cè)定：用薄層層析法鑒定，展開(kāi)體系為叔丁醇/冰乙酸/水（2︰2︰1），顯色劑為Weber試劑。

常用的定量方法有小鼠單位法、熒光分光光度法、高壓液相色譜法（HPLC）、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）和毛細(xì)管電泳法（CE）等20當(dāng)前第20頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)熒光分光光度法的檢出限0.34~10.0mg/L。除N,N-二甲酰胺可輕度增強(qiáng)熒光外，其它多種試劑對(duì)反應(yīng)均無(wú)影響。

HPLC測(cè)定，大多采用反相色譜，用硅膠柱作固定相。首先用反相色譜柱將毒素提取液中的TTX進(jìn)行分離，然后用熒光檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器或電離噴霧質(zhì)譜檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定。

ELISA法檢出限低，可達(dá)到0.01mg/L，但需要制備抗TTX的特異性單克隆抗體（McAb）。21當(dāng)前第21頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)（五）河豚毒素的微生物起源

TTX廣泛存在于無(wú)脊椎動(dòng)物、藻食性魚(yú)類(lèi)以及許多海洋生物如細(xì)菌和放線(xiàn)菌中，TTX不大可能是河豚魚(yú)自身產(chǎn)生的。從多種河豚、毒蟹和毛顎動(dòng)物體內(nèi)或體表分離可得到產(chǎn)生TTX的細(xì)菌，進(jìn)一步說(shuō)明相當(dāng)多種類(lèi)的細(xì)菌、放線(xiàn)菌可產(chǎn)生TTX，海底沉積物中的TTX也由其中的細(xì)菌和放線(xiàn)菌等產(chǎn)生。22當(dāng)前第22頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)雖然不能斷言河豚和其他動(dòng)物體內(nèi)的全部毒素都來(lái)源于共生細(xì)菌，可以推測(cè)河豚毒素的最初起源是微生物從TTX的產(chǎn)生菌的多樣性，含TTX的生物多樣性可以看出海洋生態(tài)環(huán)境中TTX的產(chǎn)生、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)移及其積累是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程。海洋微生物是TTX的惟一生產(chǎn)者，而海洋動(dòng)、植物所含的是由體外或體內(nèi)共生菌生物合成或轉(zhuǎn)化而來(lái)，或者由環(huán)境微生物產(chǎn)生少量經(jīng)多級(jí)食物鏈逐漸濃縮、累積得來(lái)。23當(dāng)前第23頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)二、魚(yú)類(lèi)食物中的毒物（一）組胺?海產(chǎn)魚(yú)中的青皮紅肉魚(yú)類(lèi)，如鮐魚(yú)、金槍魚(yú)、刺巴魚(yú)、沙丁魚(yú)中組胺酸含量較高，經(jīng)脫羧酶的細(xì)菌作用后，產(chǎn)生組胺，當(dāng)組胺積蓄一定量時(shí)，食后便有中毒危險(xiǎn)。一般引起人體中毒的組胺攝入量為1.5mg/kg.但與個(gè)體對(duì)組胺的過(guò)敏生關(guān)系很大。?此種中毒發(fā)病快，潛伏期一般為0.5~1h，長(zhǎng)者可至4h，主要表現(xiàn)為臉紅、頭暈、頭疼、心跳、脈塊、胸悶、和呼吸促迫等。死亡者較小。24當(dāng)前第24頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)預(yù)防：①在捕到青皮紅肉的魚(yú)應(yīng)及時(shí)冷藏或加工。②向市場(chǎng)供應(yīng)的鮮魚(yú)就加冰保質(zhì)，消費(fèi)者應(yīng)購(gòu)買(mǎi)新鮮的魚(yú)，因?yàn)轷r度高的魚(yú)體內(nèi)細(xì)菌繁殖尚少，產(chǎn)生組胺的可能性也較小。③在烹調(diào)方法上，以加醋、雪里蕻、山楂燒煮等法比較有效可靠。④過(guò)敏體質(zhì)者，以不吃青皮紅肉魚(yú)為宜。25當(dāng)前第25頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)（二）膽毒魚(yú)類(lèi)青魚(yú)、草魚(yú)、鰱魚(yú)、鯉魚(yú)和鳙魚(yú)是我國(guó)主要淡水經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)。因?yàn)樗鼈兊哪懹卸荆詫儆谀懚爵~(yú)類(lèi)。由于民間流傳魚(yú)膽可清熱、明目、止咳、平喘等、所以因食用魚(yú)膽發(fā)生中毒事件屢見(jiàn)不鮮，嚴(yán)重者引起死亡。膽毒毒性極大，無(wú)論用什么方法（蒸、煮、沖酒等），都不能去毒，只有將膽去掉才是有效的預(yù)防措施。26當(dāng)前第26頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)（三）肝毒魚(yú)類(lèi)我國(guó)常見(jiàn)的扁頭哈拉鯊、灰星鯊、以及鱈魚(yú)、七鰓鰻魚(yú)等魚(yú)的肝中有毒。魚(yú)類(lèi)的肝臟含有多不飽和脂肪酸，與外界的異物結(jié)合而形成魚(yú)油毒素，攝食含有魚(yú)油毒素的魚(yú)肝就會(huì)中毒。（四）魚(yú)血毒素此外鱔魚(yú)血中含有一種叫魚(yú)血毒素的物質(zhì)，在一般烹調(diào)溫度下可將其破壞，所以食用烹調(diào)熟透的鱔魚(yú)不會(huì)中毒。27當(dāng)前第27頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)（五）黑膜還值得注意的是魚(yú)類(lèi)的腹腔內(nèi)壁上都有一層薄薄的“黑膜”，它既可保護(hù)魚(yú)體內(nèi)臟器官，又可阻止內(nèi)臟器官分泌的有害物質(zhì)滲透到肌肉中去。而膜本身則由于長(zhǎng)期被各種有害物質(zhì)的污染而增色，因此人們不應(yīng)食用這種黑膜，否則，等于吃進(jìn)魚(yú)體富集的有害物質(zhì)。28當(dāng)前第28頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

三、麻痹性貝毒(paralyticshellfishpoison,PSP)

麻痹性貝類(lèi)毒素廣泛分布于全球各大海域，是一類(lèi)對(duì)人類(lèi)生命健康危害最大的海洋生物毒素。PSP毒素存在于世界范圍之內(nèi)，包括美國(guó)東西兩岸。特別是在阿拉斯加有著攜帶大量PSP毒素的動(dòng)物。

29當(dāng)前第29頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)1962年Schuef等從阿拉斯加的大石房蛤(Saxiclomus

gigantetus)中分離出石房蛤毒素（saxifoxin），該毒素對(duì)人引起的中毒癥狀與從紫貽貝和加州貝中提取的貽貝毒素（mgfilofoxin）引起的中毒癥狀相同，即對(duì)神經(jīng)肌肉產(chǎn)生麻痹作用，故稱(chēng)之為麻痹性貝類(lèi)中毒，其中引起貝類(lèi)中毒的毒素稱(chēng)之為麻痹性貝類(lèi)毒素。30當(dāng)前第30頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

PSP是一類(lèi)烷基氫化嘌呤化合物(Carbamy1-N-sulfocompouds,)，是四氫嘌呤的衍生物，其母體結(jié)構(gòu)為四氫嘌呤。這類(lèi)毒素通常是非結(jié)晶、高極性、不揮發(fā)的化合物，到目前為止，已經(jīng)證實(shí)結(jié)構(gòu)的PSP有20多種。（一）麻痹性毒素的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)31當(dāng)前第31頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)PSP的毒性因組分不同差異較大，毒性較高的為氨甲?；?lèi)，而氨甲?；?N-磺基類(lèi)毒素較低。PSP易溶于水且對(duì)酸、熱穩(wěn)定，在堿性條件下易分解失活。PSP呈堿性，有較大的水溶性，可溶于甲醇、乙醇。N-磺酰氨甲?；?lèi)毒素在加熱、酸性條件下會(huì)脫掉磺?；上鄳?yīng)的氨甲酰類(lèi)毒素，而在穩(wěn)定的條件下則生成相應(yīng)的脫氨甲胺酰類(lèi)毒素。（一）麻痹性毒素的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)32當(dāng)前第32頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

PSP是一類(lèi)神經(jīng)和肌肉麻痹劑，其毒理主要是通過(guò)對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈉離子通道的阻斷，造成神經(jīng)系統(tǒng)傳輸障礙而產(chǎn)生麻痹作用。。中毒的臨床癥狀首先是外周麻痹，從嘴唇與四肢的輕微麻刺感和麻木直到肌肉完全喪失力量，呼吸衰竭而死。癥狀通常在5~30min出現(xiàn)，12h內(nèi)死亡。（二）PSP的毒性與分布33當(dāng)前第33頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)輕度中毒者唇周?chē)写掏锤泻吐槟靖?，逐漸擴(kuò)散到口舌部和頸部，手指和腳趾有刺痛感，伴有頭痛，眩暈、惡心；重度中毒者語(yǔ)言不清，刺痛感擴(kuò)散到雙臂和雙腳，手足僵硬，不協(xié)調(diào)，全身虛弱，乏力，呼吸稍微困難，心跳加快。病危者肌肉麻痹，明顯出現(xiàn)呼吸困難，感覺(jué)窒息，在缺氧條件下死亡率極高。典型癥狀為：34當(dāng)前第34頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)PSP在水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)并不是均勻分布的，而是因種類(lèi)不同、器官不同而有所差異，并沒(méi)有明顯的季節(jié)變化.對(duì)大西洋沿岸的調(diào)查表明，軟體動(dòng)物大多數(shù)種類(lèi)的消化系統(tǒng)夏季含毒量最高，鰓和卵巢次之，肌肉含量較低，秋季毒含量下降。35當(dāng)前第35頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

不同結(jié)構(gòu)的的毒性差別很大：neoSTX和STX的毒性最強(qiáng)。國(guó)際許可的安全劑量為100g貝肉中含有相當(dāng)于80μg以下的STX的毒量。36當(dāng)前第36頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)（三）麻痹類(lèi)貝毒的起源與轉(zhuǎn)移

麻痹類(lèi)貝毒是由海洋藻類(lèi)形成，主要存在于軟體貝類(lèi)中。麻痹性貝類(lèi)毒素可以大致分為三類(lèi)：氨基甲酸酯類(lèi)毒素（Carbamatetoxins），包括石房蛤毒素（STX），新石房蛤毒素（neoSTX），膝溝藻毒素1-4（GTX1-4）；N-磺酰氨甲?；?lèi)毒素（N-sulfocarbamoyltoxins），包括GTX5（B1），GTX6（B2），C1-4；脫氨甲?；?lèi)毒素（decarbamoyltoxins），包括dcSTX,dcneoSTX,dcGTX1-4。37當(dāng)前第37頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

青海湖有毒甲藻含有麻痹性貝類(lèi)毒素，這些甲藻大多屬于膝溝藻屬和雙甲藻屬。這些甲藻大多在北類(lèi)動(dòng)物濾食過(guò)程中，從海水中轉(zhuǎn)移到食管和胃中，并在胃和腸道內(nèi)消化、吸收，在其組織內(nèi)即類(lèi)毒素。經(jīng)常報(bào)道及類(lèi)毒素的貝類(lèi)主要是日月貝、巨蠣、文蛤、貽貝、扇貝等，并且毒素在這些貝類(lèi)消化器官中含量最高。38當(dāng)前第38頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

產(chǎn)生貝類(lèi)PSP的有關(guān)甲藻大量增殖不僅毒化雙殼類(lèi)軟體動(dòng)物，而且毒化浮游動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物、軟體動(dòng)物，并進(jìn)一步轉(zhuǎn)移到魚(yú)體中，引起魚(yú)類(lèi)、鳥(niǎo)類(lèi)的大量死亡。人類(lèi)使用毒化的貝類(lèi)會(huì)引起中毒，嚴(yán)重者會(huì)發(fā)生死亡。在巨型藻-叉珊藻中也檢出了膝溝藻毒素GTX1-3。39當(dāng)前第39頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

我國(guó)自20世紀(jì)80年代開(kāi)始于赤潮有關(guān)的貝類(lèi)中毒事件報(bào)道，林燕堂等對(duì)廣東沿海采集的4種貝類(lèi)，用小白鼠生物測(cè)定法對(duì)所采樣品中含有的麻痹性貝類(lèi)毒素進(jìn)行分析研究。結(jié)果表明，所監(jiān)測(cè)的大部分生物體均有不同程度積累了麻痹性毒素，貝類(lèi)中麻痹性毒素存在著一定的季節(jié)差異。以高壓液相色譜檢測(cè)發(fā)現(xiàn)大亞灣和大灣的兩種貝體中存在12~13種PSP組分，測(cè)貝類(lèi)樣品結(jié)果顯示部分樣品肉中PSP含量在2~20MU/g。40當(dāng)前第40頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

四、西加魚(yú)毒(ciguaterfishpoisoning,CFP)2006年夏天，菲律賓港口城市伊洛伊洛的羅亞一家聚在一起共進(jìn)禮拜天晚餐—滾燙的梭魚(yú)湯。數(shù)小時(shí)后，喝過(guò)湯的６人全身麻木腿部無(wú)力，還有人說(shuō)不出話(huà)，有的甚至根本張不開(kāi)嘴。起初，醫(yī)生以為這些人是重金屬中毒，但聽(tīng)說(shuō)他們食用了梭魚(yú)晚餐后，他把魚(yú)肉取樣并送到首都馬尼拉化驗(yàn)，結(jié)果表明這些人中了西加魚(yú)毒。這是一種罕見(jiàn)卻極為致命的赤潮藻毒素，人們食用體內(nèi)有西加魚(yú)毒的魚(yú)類(lèi)后極易中毒。41當(dāng)前第41頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)42當(dāng)前第42頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)西加魚(yú)毒中毒，最初是指食用古巴一帶名為西加（cigua）的一種海生軟體動(dòng)物而引起的中毒?，F(xiàn)在泛指食用生活在熱帶、亞熱帶海域、珊瑚礁周?chē)徒兜囊栽孱?lèi)和珊瑚礁碎渣為食物的有毒魚(yú)類(lèi)（河豚魚(yú)除外）而引起的中毒。43當(dāng)前第43頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)西加魚(yú)毒由生活在珊瑚礁附近的藻類(lèi)分泌產(chǎn)生，在經(jīng)由“藻類(lèi)－草食性魚(yú)－肉食性魚(yú)”的食物鏈傳遞中，毒性逐漸加強(qiáng)。西加魚(yú)毒在南太平洋、加勒比海以及印度洋的溫暖水域早被熟知。南太平洋的許多島民在食用魚(yú)肉之前，會(huì)先讓狗嘗魚(yú)“試毒”。44當(dāng)前第44頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)我國(guó)近海及領(lǐng)海中有雪卡毒素魚(yú)類(lèi)30多種，其中就包括主要海產(chǎn)食用魚(yú)類(lèi)石斑魚(yú)和鱸魚(yú)。毒素主要存在于有毒魚(yú)類(lèi)的魚(yú)肉、內(nèi)臟及生殖腺中。由于毒素是通過(guò)食物鏈傳遞積聚，因此，魚(yú)體含毒無(wú)規(guī)律，同一種魚(yú)，因棲息環(huán)境不同，有的有毒，有的無(wú)毒，有些魚(yú)種中，小魚(yú)無(wú)毒，而大魚(yú)有毒。45當(dāng)前第45頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)西加魚(yú)毒引起人體中毒癥狀有消化系統(tǒng)癥狀、心血管系統(tǒng)癥狀和神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀。消化系統(tǒng)癥狀包括惡心、嘔吐、腹部痙攣、腹瀉等，部分病人口中有金屬味；心血管系統(tǒng)癥狀包括心律較低（40~50次/min）或心律過(guò)快（100~200次/min），血壓降低；46當(dāng)前第46頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀包括口、唇、舌、咽喉發(fā)麻或針扎感、瘙癢、溫度感覺(jué)倒錯(cuò)的特征可與急性胃腸炎、細(xì)菌性食物中毒作鑒別。一般在食用有毒魚(yú)類(lèi)出現(xiàn)上述某些中毒癥狀，特殊情況下在食用有毒魚(yú)類(lèi)30min

或48h后也可以出現(xiàn)某些中毒癥狀。西加魚(yú)類(lèi)中毒偶爾可能是致命的，急性死亡病例發(fā)生于血液循環(huán)破壞或呼吸衰竭。47當(dāng)前第47頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

西加魚(yú)毒素是目前赤潮生物產(chǎn)生的主要毒素之一,從有毒魚(yú)類(lèi)和赤潮生物中分離出三種西加魚(yú)毒毒素:

西加毒素(ciguatoxins,CTXs)

刺尾魚(yú)毒素(maitotxin,MTX)

鸚嘴魚(yú)毒素(scaritoxin,STX)

其中CTX和MTX為主要組分.（一）西加魚(yú)毒素的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)48當(dāng)前第48頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)CTXs是由13個(gè)連接醚環(huán)組成的聚醚毒素，醚環(huán)的原子個(gè)數(shù)在5-9之間，根據(jù)其結(jié)構(gòu)的不同可分為CTX1-4，CTX1的分子式為C60H88O19，相對(duì)分子質(zhì)量為1112，分子式中有6個(gè)羥基、5個(gè)甲基、4個(gè)雙鍵。CTXs是一種無(wú)色、耐熱、非結(jié)晶體、極易被氧化的物質(zhì)。49當(dāng)前第49頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)CTXs能溶于極性有機(jī)溶劑如甲醇、乙醇、丙酮中，但不溶于苯和水中。

CTXs是一種高毒性的化合物，小鼠腹腔注射實(shí)驗(yàn)表明其LD50為0.45μg/kg小鼠，其毒性強(qiáng)度比河豚毒素大20倍，大大超過(guò)麻痹性貝類(lèi)毒素的石房蛤毒素。50當(dāng)前第50頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

MTX也是聚醚類(lèi)化合物。從岡比亞甲藻(Gambierdiscustoxicus)分離出了三種MTX1-3。MTX整個(gè)分子結(jié)構(gòu)中有大量的羥基和甲基，還含有2個(gè)硫酸基。

MTX是一種高極性化和物，可以溶于水、甲醇、乙醇、二甲基亞砜，但不溶于氯仿、丙酮和乙腈。51當(dāng)前第51頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)MTX為白色固體，極易被氧化，在1mol/L鹽酸溶液或氫氧化銨溶液中加熱，毒性不受影響。由小鼠腹腔注射實(shí)驗(yàn)表明MTX其LD50為0.15μg/kg小鼠，其毒性強(qiáng)度比西加毒素高2倍。52當(dāng)前第52頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

STX是一種脂溶性毒素，其某些化學(xué)性質(zhì)和色譜性質(zhì)與西加毒素相似，但極性有所差異。由于其結(jié)構(gòu)復(fù)雜，至今尚未確定完整結(jié)構(gòu)。53當(dāng)前第53頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)西加魚(yú)毒素最初曾被認(rèn)為是魚(yú)類(lèi)攝食了有毒微生物引起的，后來(lái)通過(guò)有毒魚(yú)類(lèi)樣品內(nèi)臟包容物的分析發(fā)現(xiàn)西加魚(yú)毒毒性是與一種稱(chēng)為劇毒岡比亞甲藻(Gambierdiscustoxicus)的數(shù)量有關(guān)，是西加魚(yú)毒的主要來(lái)源生物。（二）西加魚(yú)毒素的起源與轉(zhuǎn)移54當(dāng)前第54頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)劇毒岡比亞甲藻是一種帶硬殼并有兩根鞭毛的渦鞭藻，生活在珊瑚礁周?chē)饕街诶庖砝仍?、叉?jié)藻、叉珊藻、仙掌菜、畫(huà)筆藻、傘藻和江蘺等巨藻上。劇毒岡比亞甲藻在太平洋分布很廣，在大西洋也有分布。55當(dāng)前第55頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)通常西加魚(yú)毒僅限于熱帶或亞熱帶海域珊瑚礁周?chē)鷶z食劇毒岡比亞甲藻和珊瑚碎屑的魚(yú)類(lèi)，具有代表性的西加毒魚(yú)有櫛齒刺尾魚(yú)、小吻鷹嘴魚(yú)等和攝食這些魚(yú)類(lèi)的肉食性魚(yú)類(lèi)如爪哇裸胸鱔、褐點(diǎn)石斑魚(yú)和巨石斑魚(yú)等。由于上述魚(yú)類(lèi)的組織性以及西加魚(yú)毒在食物鏈中的傳遞,西加魚(yú)毒也可以在其他魚(yú)類(lèi)體中積累,并最終傳遞到人體.56當(dāng)前第56頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)四、腹瀉性貝毒（DSP）

1976年，在日本宮城縣發(fā)生了食用紫貽貝引起的集體食物中毒，從該貝的中腸腺中檢出了能殺死小鼠的脂溶性毒素。因中毒的主要癥狀為腹瀉和嘔吐，所以稱(chēng)之為腹瀉性貝類(lèi)中毒。據(jù)統(tǒng)計(jì)，日本每年因食用魚(yú)貝類(lèi)而引起的中毒事件中約有40%是由DSP引起的。57當(dāng)前第57頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

腹瀉性貝類(lèi)毒素（DSP）是一類(lèi)脂溶性物質(zhì)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為聚醚或大環(huán)內(nèi)酯化合物。

根據(jù)這些毒素的碳骨架機(jī)構(gòu)，可將它們分為三組酸性成分:包括具有細(xì)胞毒性的大田軟海綿酸(okadaicacid,OA)和其天然衍生物輪狀鰭藻毒素（dinophysistoxin,DTX）是從岡田磯海綿（Nenieraokadaikakota）中分離得到的。（一）腹瀉性貝類(lèi)毒素的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)58當(dāng)前第58頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)大田軟海綿酸(OA)

是無(wú)色晶體，熔點(diǎn)是156~158℃，能溶于甲醇、乙醇、氯仿和乙醚等有機(jī)溶劑，不溶于水。輪狀鰭藻毒素DTX1是白色無(wú)定形固體，熔點(diǎn)134℃，其薄層色譜值Rf為0.42。輪狀鰭藻毒素DTX2薄層色譜值Rf為0.57

，在酸性和堿性溶液中不穩(wěn)定。59當(dāng)前第59頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

中性成分:蛤毒素（pectenotoxin,PTX）包括PTX1-6。其結(jié)構(gòu)都有著相同的大環(huán)內(nèi)酯，差異在C43上已鑒定的PTX有PeTX1-4組分。蛤毒素（PTX1）是白色晶體，熔點(diǎn)為208~209℃，扇貝毒素（PeTX2）是白色固體，薄層色譜值Rf為0.71，PTX1、PTX2、PTX3和PTX4的薄層色譜的Rf值分別為0.43、0.71、0.49和0.53。60當(dāng)前第60頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)其它成分，包括扇貝毒素（yessotoxin）和45-羥基扇貝毒素。它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)與從短裸甲藻毒素結(jié)構(gòu)相似，由彼此相連的醚環(huán)組成。含有硫酸酯基團(tuán)是它的特征。至今已分離到了11種成分，其中八種毒素的結(jié)構(gòu)已經(jīng)確定。61當(dāng)前第61頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)三種毒素的毒理作用各不相同。OA對(duì)小鼠腹腔注射的半致死劑量LD50為160μg/kg，會(huì)使小鼠或其它動(dòng)物發(fā)生腹瀉，并且具有強(qiáng)烈的致癌作用。PTX對(duì)小鼠的半致死劑量LD50為16~17μg/kg，主要作用是肝損傷。扇貝毒素對(duì)小鼠的半致死劑量LD50為100μg/kg，主要破壞動(dòng)物的心肌。62當(dāng)前第62頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)檢測(cè)貝類(lèi)組織中DSP的方法主要是小鼠單位法，即測(cè)定小鼠急性中毒的劑量。該方法是美國(guó)農(nóng)業(yè)化學(xué)家協(xié)會(huì)（AOAC）標(biāo)準(zhǔn)方法，也是我國(guó)出口貝類(lèi)中DSP的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法。（二）腹瀉貝類(lèi)毒素的檢測(cè)63當(dāng)前第63頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)其測(cè)量單位是鼠單位（MU），即腹腔注射0.5~1.0mL毒素溶液，在注射后使16~20g體重小鼠致死的毒素量，定義為一個(gè)鼠單位。1MU相當(dāng)于3.2μgDTX1

。該方法不需要大型儀器，操作簡(jiǎn)單，但測(cè)定的檢出限依賴(lài)于小鼠的品系，使結(jié)果的重現(xiàn)性差。64當(dāng)前第64頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)腹瀉性貝類(lèi)毒素主要來(lái)源于可以形成赤潮的甲藻如：鰭藻屬的漸尖鰭藻、具尾鰭藻、倒卵形鰭藻等以及原甲藻屬的底層原甲藻和小原甲藻。（二）腹瀉性貝類(lèi)毒素的起源與轉(zhuǎn)移65當(dāng)前第65頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)通常產(chǎn)生腹瀉性貝類(lèi)毒素的有毒甲藻，可以作為某些貝類(lèi)的食物，在其攝食或?yàn)V食過(guò)程中將腹瀉性貝類(lèi)毒素轉(zhuǎn)移到體內(nèi)并在體內(nèi)消化、吸收、積累，并通過(guò)食物鏈傳遞到人體內(nèi)引起中毒。（二）腹瀉性貝類(lèi)毒素的起源與轉(zhuǎn)移66當(dāng)前第66頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)能夠引起人體中毒的可食性貝類(lèi)有：日本櫛孔扇貝、凹線(xiàn)蛤蜊、牡蠣、鳳螺、紫貽貝、扇貝、中國(guó)蛤蜊及蛤仔等。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)?shù)孤研析捲逶诤Ｋ械拿芏冗_(dá)到200個(gè)/L時(shí)，貽貝的扇貝中的DSP含量就會(huì)超過(guò)限定值。在日本，貝類(lèi)被DSP毒化的時(shí)間一般在4~8月份，高峰通常在6月份。在我國(guó)，DSP的發(fā)生主要集中在北方的黃海、渤海貝類(lèi)產(chǎn)區(qū)，以夏季最多。67當(dāng)前第67頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)五、其它貝類(lèi)毒素（一）記憶缺失性貝類(lèi)毒素（amnesicshellfishpoisoning,ASP）

記憶缺失性貝類(lèi)毒素(ASP)是一類(lèi)存在于赤潮藻類(lèi)中的硅藻屬如：多列尖刺菱形藻（nitzschpungensf.multiseries）中的毒素。中毒癥狀包括惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉等，同時(shí)有昏眩、昏迷等類(lèi)似神經(jīng)性中毒癥狀。永久性喪失部分記憶力是此類(lèi)中毒后的典型特征，因此它被稱(chēng)之為記憶缺失性貝類(lèi)毒素。

68當(dāng)前第68頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)ASP的主要成分是軟骨藻酸（domoicacid,DA）是一種具有生理活性的氨基酸類(lèi)物質(zhì)。因最早從紅藻屬的樹(shù)枝軟骨藻（Chondriaarmata）中分離出來(lái)而被命名為軟骨藻酸。屬同類(lèi)物質(zhì)還有從海人草中提取海人草酸，中毒者因攝食量過(guò)多而死亡。69當(dāng)前第69頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)

經(jīng)解剖發(fā)現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞破壞主要集中在腦的海馬部位，下丘腦及前腦的部分也被破壞。雙殼貝類(lèi)因?yàn)V食海洋微藻而積累ASP。到目前為止，已從紫貽貝、扇貝、文蛤等貝類(lèi)體內(nèi)以及鳀魚(yú)、鯖魚(yú)和石蟹的內(nèi)臟中檢測(cè)到了軟骨藻酸。70當(dāng)前第70頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)美國(guó)食品藥品管理局（FDA）將它確定為4種主要海洋生物毒素之一，并規(guī)定貝肉中軟骨藻酸的安全劑量為20μg/g

。我國(guó)于2003年8月11日發(fā)布了《貝類(lèi)記憶喪失性貝類(lèi)毒素軟骨藻酸的測(cè)定》的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T5009,198—2003）。71當(dāng)前第71頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)（一）神經(jīng)性貝類(lèi)毒素（neurotoxicshellfishpoisoning,NSP）

神經(jīng)性貝類(lèi)毒素(NSP)是指從一種赤潮生物短裸甲藻（Ptychodiscusbreve）中分離出的一類(lèi)毒素—短裸甲藻毒素（brevetoxins,PbTx）。PbTx的理化特性與西加毒素（CTX）相似。PbTx可引起魚(yú)類(lèi)、軟體動(dòng)物、甲殼動(dòng)物、海綿動(dòng)物、棘皮動(dòng)物及底棲藻類(lèi)的大量死亡。有毒的短裸甲藻被貝類(lèi)攝食后，其毒素在體內(nèi)積累，并通過(guò)食物鏈傳遞給人類(lèi)，引起食物中毒。72當(dāng)前第72頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)中毒的主要癥狀為瞳孔放大，身體冷熱無(wú)常，惡心、嘔吐、腹瀉、運(yùn)動(dòng)失常，但沒(méi)有麻痹感。為了與引起麻痹作用的DSP相區(qū)別，稱(chēng)為神經(jīng)性貝類(lèi)毒素（NSP）。NSP的中毒癥狀持續(xù)時(shí)間較短，一般從10min~20h。73當(dāng)前第73頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)目前，已從短裸甲藻中分離出13種NSP毒素成分，其中11種成分的結(jié)構(gòu)已經(jīng)被確定，從結(jié)構(gòu)上看，PbTx是一類(lèi)不含氮的含有多個(gè)甲基的聚醚類(lèi)毒素。按各成分碳骨架結(jié)構(gòu)的不同可分為：由11個(gè)醚環(huán)組成：

PbTx-2、PbTx-3、PbTx-5、PbTx-8和PbTx-9由10個(gè)醚環(huán)組成：

PbTx-1、PbTx-7和PbTx-1其它成分，包括GB-4和PB-174當(dāng)前第74頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)在穩(wěn)定性方面，含有11個(gè)醚環(huán)結(jié)構(gòu)的PbTx比含10個(gè)醚環(huán)的PbTx具有更高的穩(wěn)定性，而毒性則相反。75當(dāng)前第75頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)六、有毒活性肽海洋生物中存在著種類(lèi)眾多的蛋白質(zhì)、肽類(lèi)毒素，這些毒素性質(zhì)獨(dú)特，在生物醫(yī)藥、分子生物學(xué)的研究和應(yīng)用方面有廣闊的前景。目前研究較多的海洋肽類(lèi)毒素有?？舅?、芋螺毒素、海蛇毒素等。76當(dāng)前第76頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)（一）?？舅睾？且环N腔腸動(dòng)物，屬珊瑚蟲(chóng)綱六珊瑚亞綱，是豐富的近海動(dòng)物之一，在熱帶和溫帶海域中廣泛存在，中國(guó)海域中存在的?？贩N主要有華麗黃?？⑸吆？?、巨突海葵等。?？|手中含有豐富的肽類(lèi)毒素。77當(dāng)前第77頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)從黃海葵中分離出了具有強(qiáng)心作用的強(qiáng)心肽（anthopleurin,AP），主要有AP-A和AP-B兩種。AP-A特異性結(jié)合在心臟Na+通道上，AP-B對(duì)心臟和骨骼肌的Na+通道均能緊密結(jié)合，它們都有顯著的強(qiáng)心作用。78當(dāng)前第78頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)從黃?？羞€分離出了60余種細(xì)胞溶素類(lèi)毒素，是細(xì)菌、真菌、蛇毒、昆蟲(chóng)毒中一種常見(jiàn)的肽類(lèi)化合物，?？南鄬?duì)分子質(zhì)量在15000~20000之間，作用于專(zhuān)一性的受體，而能選擇性地與細(xì)胞膜的脂質(zhì)結(jié)合，引起疼痛、炎癥及肌肉麻痹等。79當(dāng)前第79頁(yè)\共有92頁(yè)\編于星期日\(chéng)19點(diǎn)現(xiàn)在研究最多的?？?xì)胞是分離自刺海葵的刺?？兀鄬?duì)分子質(zhì)量為17000，結(jié)構(gòu)特征N—末端有一個(gè)長(zhǎng)的β—折疊疏水段和5個(gè)短的β-折疊疏水段，其中60%~70%氨基酸間構(gòu)成氫鍵，因此形成特殊的跨膜蛋白結(jié)構(gòu)。C-末端為強(qiáng)極性區(qū)段，位于膜外，在膜