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2009.利用微生物分解玉米淀粉生產(chǎn)糖漿,具有廣闊的應(yīng)用前景。但現(xiàn)在野生菌株對(duì)淀粉的轉(zhuǎn)化效率低,某同學(xué)嘗試對(duì)其進(jìn)行改造,以獲得高效菌株。(1)實(shí)驗(yàn)步驟:①配置(固體、半固體、液體)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基的碳源應(yīng)為

。②將

接入已滅菌的培養(yǎng)基平板上。③立即用適當(dāng)劑量的紫外線照射,其目的是

。④菌落形成后,加入碘液,觀察菌落周圍培養(yǎng)基的顏色變化和變化范圍的大小。周圍出現(xiàn)

現(xiàn)象的菌落即為初選菌落。經(jīng)分離、純化后即可達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。若已得到二株變異菌株Ⅰ和Ⅱ,其淀粉轉(zhuǎn)化率較高。經(jīng)測(cè)定菌株Ⅰ淀粉酶基因的編碼區(qū)或非編碼區(qū),可推測(cè)出菌株Ⅰ的突變發(fā)生在

區(qū),菌株Ⅱ的突變發(fā)生在

區(qū)。2010.(12分)某種細(xì)菌體內(nèi)某氨基酸(x)的生物合成途徑如圖:

這種細(xì)菌的野生型能在基本培養(yǎng)基(滿足野生型細(xì)菌生長的簡(jiǎn)單培養(yǎng)基)上生長,而由該種細(xì)菌野生型得到的兩種突變型(甲、乙)都不能在基本培養(yǎng)基上生長;在基本培養(yǎng)基上若添加中間產(chǎn)物2,則甲、乙都能生長;若添加中間產(chǎn)物l,則乙能生長而甲不能生長。在基本培養(yǎng)基上添加少量X,甲能積累中間產(chǎn)物l,而乙不能積累。請(qǐng)回答:(1)根據(jù)上述資料可推論:甲中酶____的功能喪失;乙中酶______的功能都正常。由野生型產(chǎn)生甲、乙這兩種突變型的原因是野生型的_____(同一、不同)菌體中的不同______發(fā)生了突變,從而導(dǎo)致不同酶的功能喪失,如果想在基本培養(yǎng)基上添加少量的X來生產(chǎn)中間產(chǎn)物l,則應(yīng)選用_____(野生型、甲、乙)。(2)將甲、乙混合接種于基上能長出少量菌落,再將這些菌落單個(gè)挑出分別接種在基本培養(yǎng)基上都不能生長。上述混合培養(yǎng)時(shí)乙首先行成菌落,其原因是_____.(3)在發(fā)酵過程中,菌體中X含量過高時(shí),其后成速率下降。若要保持其合成速率,可采取的措施是改變菌體細(xì)胞膜的_______.使X排出菌體外。2011.(10分)同學(xué)從溫度為55~65度的泉水中篩選出能合成脂肪酶的細(xì)菌,并從該細(xì)菌中提取了脂肪酶。回答問題:(1)測(cè)定脂肪酶活性時(shí),應(yīng)選擇________________作為該酶作用的物質(zhì),反應(yīng)液中應(yīng)加入____________溶液以維持其酸堿度穩(wěn)定。(2)要鑒定該酶的化學(xué)本質(zhì),可將該酶液與雙縮脲試劑混合,若反應(yīng)液呈紫色,則該酶的化學(xué)本質(zhì)為________________。(3)根據(jù)該細(xì)菌的生活環(huán)境,簡(jiǎn)要寫出測(cè)定該酶催化作用最適溫度的實(shí)驗(yàn)思路。2013.[生物——選修1](15分)臨床試用抗生素前,有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí),首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作,以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。回答下列問題:(1)為了從樣本中獲取致病菌菌落,可用_____法或_____法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋,用______法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,使其均勻生長,布滿平板。(3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性,將分別含有A,B,C,D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時(shí)間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素A_______;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素B_____;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明___;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的________。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為達(dá)到抗菌目的,最好應(yīng)選用抗生素_______。2014.[生物——選修1:生物技術(shù)實(shí)踐](15分)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作?;卮鹣铝袉栴}:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是

;然后,將1mL水樣稀釋100倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為

。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí),接種環(huán)通過

滅菌,在第二次及以后劃線時(shí),總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是

。(3)示意圖A和B中,

表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

(2)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的____的含量,同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高

的利用率。2015.【生物—選修1】回答與胡蘿卜有關(guān)的問題:(1)胡羅卜含有的胡羅卜素中,最主要的是____(填“α—胡羅卜素”或“β—胡羅卜素”或“γ—胡羅卜素”),該胡羅卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成兩分子

,后者缺乏會(huì)引起人在弱光下視物不清的病癥,該疾病稱為

,胡羅卜素是

(填“揮發(fā)性”或“非揮發(fā)性”)物質(zhì)。(2)工業(yè)生產(chǎn)上,用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡羅卜素時(shí),

(填“需要”或“不需要”)將新鮮的巖藻干燥。(3)現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑,應(yīng)選用其中的

作為胡羅卜素的萃取劑,不選用另外一種的理由是

。2016.[生物—選修1]蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的,回答下列為題:

(1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段,在酵母菌細(xì)胞的______中進(jìn)行,其產(chǎn)物乙醇與______試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色,這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn);過程③在酵母菌細(xì)胞的____中進(jìn)行,與無氧條件相比,在有氧條件下,酵母菌的增值速度_____。(2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程,根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型,該過程需要在____________條件下才能完成。(3)在生產(chǎn)過程中,第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同,第一階段的溫度______(填“低于”或“高于”)第二階段。(4)醋酸桿菌屬于_______核生物,其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中________(填“含有”或“不含有”)線粒體。2017.[生物——選修1]豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素,某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻,再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵,并在32h內(nèi)定期取樣觀測(cè)發(fā)酵效果?;卮鹣铝袉栴}:(1)該實(shí)驗(yàn)的自變量是_______、_________。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌是___________。(3)如果在實(shí)驗(yàn)后,發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好,且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系,則無法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間;若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間,還需要做的事情是_____________________。(4)從大豆到豆豉,大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化,其中,蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開_______,脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開________。難度逐年提升,泡菜的亞硝酸鹽的檢測(cè)與鑒定沒有考察過,有可能出現(xiàn)在今年的高考中!!微生物的培養(yǎng)分離鑒定選擇果酒果醋泡菜豆腐乳的制作植物有效成分的提取專題1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1果酒和果醋的制作課題2腐乳的制作課題3泡菜的制作和亞硝酸鹽含量的測(cè)定11一、果酒和果醋的制作1.基礎(chǔ)知識(shí)制作果酒:①原理:

進(jìn)行

發(fā)酵產(chǎn)生酒精。反應(yīng)式為:

________________________________________。②條件:

、pH為

、溫度為

℃。制作果醋:①原理:醋酸桿菌進(jìn)行有氧發(fā)酵產(chǎn)生醋酸。反應(yīng)式為:

__________________________________________。②條件:

、pH為

、溫度為

℃。酵母菌無氧C6H12O6酶2C2H5OH+2CO2+能量無氧酸性18~25酶CH3COOH+H2O+能量C2H5OH+O2有氧酸性30~35

12一、果酒和果醋的制作2.制作方法選材沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒果醋①原料糖化處理:酒曲?②酒精發(fā)酵的接種?③酒精發(fā)酵:先通氣,后密封?④酒精發(fā)酵液的檢測(cè)?13二、腐乳的制作1.基礎(chǔ)知識(shí)毛霉分泌

將蛋白質(zhì)水解為多肽和氨基酸,

將脂肪水解為甘油和脂肪酸,并在多種微生物的協(xié)同作用下形成獨(dú)特風(fēng)味。脂肪酶

豆腐生長毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制蛋白酶

2.制作方法:14三、泡菜的制作和亞硝酸鹽含量的檢測(cè)1.基礎(chǔ)知識(shí)

進(jìn)行

呼吸產(chǎn)生

。反應(yīng)式為:

_______________________________。C6H12O6酶2C3H6O3+能量

亞硝胺適宜溫度、pH和一定微生物作用乳酸桿菌無氧乳酸*亞硝酸鹽的產(chǎn)生:

土壤→NO3-→NO2-→NH3→氨基酸→蛋白質(zhì)152.亞硝酸鹽含量的檢測(cè)在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。將顯色后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液進(jìn)行比色,從而估算泡菜中亞硝酸鹽含量。16選擇材料修整加工晾曬成型稱取食鹽配制鹽水煮沸冷卻加入調(diào)味料,裝壇密封發(fā)酵泡菜成品亞硝酸鹽含量的檢測(cè)3.制作方法17一、無菌技術(shù)1.滅菌:培養(yǎng)器皿、接種用具、培養(yǎng)基等。方法:灼燒滅菌法,使用酒精燈;

接種環(huán)、試管口等

干熱滅菌法,使用干熱滅菌箱;

移液管、微量移液器槍頭等

高壓蒸汽滅菌法,使用高壓蒸汽滅菌鍋。

培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、無菌水、無菌紙等

紫外線滅菌法,使用紫外燈。

接種箱等18二、培養(yǎng)基的成分、類型及其配制方法1.培養(yǎng)基的成分

水、無機(jī)鹽、

碳源:CO2、糖類、脂肪酸等含碳有機(jī)物,構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物,并提供能量。

氮源:N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等,主要用來合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝物等。

生長因子:某些微生物正常生長代謝中必須從培養(yǎng)基中吸收的微量有機(jī)小分子,如某些氨基酸、堿基、維生素等。

含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源,又可以作為氮源,如氨基酸等。

19二、培養(yǎng)基的成分、類型及其配制方法3.培養(yǎng)基的配制配制平板培養(yǎng)基計(jì)算稱量溶化調(diào)pH滅菌倒平板配制原則①目的要明確②營養(yǎng)要協(xié)調(diào)③pH要適宜

配制斜面培養(yǎng)基計(jì)算稱量溶化調(diào)pH分裝滅菌擱置斜面

20三、微生物的接種技術(shù)1.平板劃線法:

連續(xù)劃線、平行劃線等2.稀釋涂布平板法:

梯度稀釋法3.稀釋混合平板法:

梯度稀釋→0.1mL與40~50℃培養(yǎng)基混合→擱置平板→培養(yǎng)4.穿刺接種法:5.斜面接種法:21四、微生物的計(jì)數(shù)方法1.顯微鏡計(jì)數(shù)法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(血球計(jì)數(shù)板)顯微鏡相對(duì)計(jì)數(shù)法2.菌落計(jì)數(shù)法/稀釋涂布平板法細(xì)菌30~300個(gè);真菌10~100個(gè)3.重量法

10mL菌液→反復(fù)離心洗滌→鮮重或干重22五、微生物的培養(yǎng)1.純化培養(yǎng)

平板劃線法或稀釋涂布平板法接種

微生物純凈培養(yǎng)物挑取單菌落232.選擇性培養(yǎng)(選擇培養(yǎng)基)

無氮培養(yǎng)基、纖維素培養(yǎng)基、尿素培養(yǎng)基、抗生素培養(yǎng)基、高滲培養(yǎng)基等選擇性培養(yǎng)條件高溫培養(yǎng)等243.鑒別性培養(yǎng)

尹紅美藍(lán)大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)細(xì)菌帶正電被染成紅色,再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落,并帶有綠色金屬光澤酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。剛果紅剛果紅染色法特指纖維素的染色法,剛果紅能把纖維素染成紅色復(fù)合物,對(duì)纖維二糖和葡萄糖無作用,可用此來鑒別纖維素或纖維素分解菌的分解作用25五、從生物材料中提取某些特定成分方法與原理:蒸餾法:

的化合物。如:玫瑰精油(蒸餾裝置)壓榨法:

的化合物。如:橘皮精油、豆油(榨油機(jī))萃取法:易溶于與某種有機(jī)溶劑且沸點(diǎn)與溶劑沸點(diǎn)差別較大的化合物。如:胡蘿卜素(冷凝回流裝置、蒸餾裝置)沸點(diǎn)較低、揮發(fā)性強(qiáng)沸點(diǎn)較高、揮發(fā)性弱26植物芳香油的提取基礎(chǔ)梳理1.植物芳香油的來源天然香料的主要來源是__________和__________。動(dòng)物香料主要來源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等,植物香料的來源更為廣泛。植物芳香油可以從大約50多個(gè)科的植物中提取。例如,工業(yè)生產(chǎn)中,玫瑰花用于提取__________,樟樹樹干用于提取__________。提取出的植物芳香油具有很強(qiáng)的__________,其組成也比較復(fù)雜,主要包括__________及其衍生物。萜類化合物動(dòng)物植物玫瑰油樟油揮發(fā)性2.植物芳香油的提取方法植物芳香油的提取方法有_______、__________和__________等。具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來決定。_______________是植物芳香油提取的常用方法,它的原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來,形成油水混合物,冷卻后,混合物又會(huì)重新分出油層和水層。根據(jù)蒸餾過程中原料放置的位置,可以將水蒸氣蒸餾法劃分為__________、__________和__________。其中,水中蒸餾的方法對(duì)于有些原料不適用,如柑橘和檸檬。這是因?yàn)樗姓麴s會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題。因此,柑橘、檸檬芳香油的制備通常使用壓榨法。蒸餾壓榨萃取水蒸氣蒸餾法水中蒸餾水上蒸餾水氣蒸餾植物芳香油不僅__________強(qiáng),而且易溶于__________,如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸餾的原料,可以考慮使用__________法。萃取法是將粉碎、干燥的植物原料用有機(jī)溶劑浸泡,使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑后,只需蒸發(fā)出有機(jī)溶劑,就可以獲得純凈的植物芳香油了。但是,用于萃取的有機(jī)溶劑必須事先精制,除去雜質(zhì),否則會(huì)影響芳香油的質(zhì)量。萃取揮發(fā)性有機(jī)溶劑3.玫瑰精油的提取玫瑰精油是制作__________的主要成分,能使人產(chǎn)生愉悅感。由于玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)__________,難溶于__________,易溶于__________,能隨__________一同蒸餾,故通常采用__________法中的水中蒸餾法來提取玫瑰精油,其實(shí)驗(yàn)流程為__________、__________、__________、__________、__________、__________。過濾高級(jí)香水穩(wěn)定水有機(jī)溶劑水蒸氣水蒸氣蒸餾鮮玫瑰花與水混合水蒸氣蒸餾加入NaCl分離油層加入無水Na2SO44.橘皮精油的提取從橘皮中提取的__________,其主要成分為__________,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。橘皮精油主要貯藏在__________部分,由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解,使用水中蒸餾法又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊的問題,所以一般采用__________法。具體的操作流程是__________、__________、__________、__________、__________、__________。

再次過濾橘皮油檸檬烯橘皮壓榨法石灰水浸泡漂洗壓榨過濾靜置胡蘿卜素的提取基礎(chǔ)梳理1.胡蘿卜素是__________結(jié)晶,化學(xué)性質(zhì)比較__________,不溶于水,微溶于__________,易溶于__________等有機(jī)溶劑。胡蘿卜素的化學(xué)分子式中包含多個(gè)碳碳雙鍵,根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為α、β、γ三類。__________是其中最主要的組成成分。與β胡蘿卜素化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的胡蘿卜素大約有100多種,它們大多存在于蔬菜中。__________等蔬菜是提取天然β胡蘿卜素的

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