葡萄糖氧化酶法的實驗報告

精選公文范文 葡萄糖氧化酶法的實驗報告篇一：葡萄糖測定-葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法測定血清（漿）葡萄糖原理葡萄糖氧化酶利用氧和水將葡萄糖氧化為葡萄糖酸，并釋放過氧化氫。過氧化物酶在色原性氧受體存在時將過氧化氫分解為水和氧，并使色原性氧受體4-氨基安替比林和酚去氫縮合為紅色醍類化合物，即Trinder反應。紅色醌類化合物的生成量與葡萄糖含量成正比。試劑./L磷酸鹽緩沖液稱取無水磷酸氫二鈉及無水磷酸二氫鉀溶于蒸餾水800ml中，用1mol/L氫氧化鈉調(diào)pH至，用蒸餾水定容至1L。.酶試劑稱取過氧化物酶1200U，葡萄糖氧化酶1200U,4-氨基安替比林10mg，疊氮鈉100mg，溶于磷酸鹽緩沖液80ml中，用1mol/LNaOH調(diào)pH至，用磷酸鹽緩沖液定容至100ml，置4°C保存，可穩(wěn)定3個月。3.酚溶液稱取重蒸餾酚100mg溶于蒸餾水100ml中，用棕色瓶貯存。4.酶酚混合試劑酶試劑及酚溶液等量混合，4C可以存放1個月。.12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸于蒸餾水約800ml中，加溫助溶，冷卻后加蒸餾水定容至lL。.100mmol/L葡萄糖標準貯存液稱取已干燥恒重的無水葡萄糖，溶于12mmol/L苯甲酸溶液約70ml中，以12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。2h以后方可使用。.5mmol/L葡萄糖標準應用液吸取葡萄糖標準貯存液放于100ml容量瓶中，用12mmol/L苯甲酸溶液稀釋至刻度，混勻。操作步驟.自動分析法按儀器說明書的要求進行測定。.手工操作法取試管3支，按下表操作。讀取標準管及測定管吸光度。計算參考范圍空腹血清葡萄糖為?/L。臨床意義1.生理性高血糖可見攝入高糖食物后，或情緒緊張腎上腺分泌增加時。2.病理性高血糖糖尿?。翰±硇愿哐浅Ｒ娪谝葝u素絕對或相對不足的糖尿病患者。內(nèi)分泌腺功能障礙：甲狀腺功能亢進，腎上腺皮質(zhì)功能及髓質(zhì)功能亢進。引起的各種對抗胰島素的激素分泌過多也會出現(xiàn)高血糖。注意升高血糖的激素增多引起的高血糖，現(xiàn)已歸入特異性糖尿病中。顱內(nèi)壓增高：顱內(nèi)壓增高刺激血糖中樞，如顱外傷、顱內(nèi)出血、腦膜炎等。 精選公文范文 3 精選公文范文 脫水引起的高血糖：如嘔吐、腹瀉和高熱等也可使血糖輕度增高。3.生理性低血糖見于饑餓和劇烈運動。4.病理性低血糖胰島p細胞增生或胰島P細胞瘤等，使胰島素分泌過多。對抗胰島素的激素分泌不足，如垂體前葉功能減退、腎上腺皮質(zhì)功能減退和甲狀腺功能減退而使生長素、腎上腺皮質(zhì)激素分泌減少。嚴重肝病患者，由于肝臟儲存糖原及糖異生等功能低下，肝臟不能有效地調(diào)節(jié)血糖。注意事項1.葡萄糖氧化酶對P-D葡萄糖高度特異，溶液中的葡萄糖約36%為a型，64%為p型。葡萄糖的完全氧化需要a型到p型的變旋反應。國外某些商品葡萄糖氧化酶試劑盒含有葡萄糖變旋酶，可加速這一反應，但在終點法中，延長孵育時間可達到完成自發(fā)變旋過程。新配制的葡萄糖標準液主要是 精選公文范文 4 精選公文范文 a型，故須放置2h以上，待變旋平衡后方可應用。.葡萄糖氧化酶法可直接測定腦脊液葡萄糖含量，但不能直接測定尿液葡萄糖含量。因為尿液中尿酸等干擾物質(zhì)濃度過高，可干擾過氧化物酶反應，造成結(jié)果假性偏低。.測定標本以草酸鉀一氟化鈉為抗凝劑的血漿較好。取草酸鉀6g，氟化鈉4g。加水溶解至100ml。吸取到試管內(nèi)，在80°。以下烤干使用，可使2?3ml血液在3?4天內(nèi)不凝固并抑制糖分解。.本法用血量甚微，操作中應直接加標本至試劑中，再吸試劑反復沖洗吸管，以保證結(jié)果可靠。.嚴重黃疸、溶血及乳糜樣血清應先制備無蛋白血濾液，然后再進行測定。評價線性范圍至少可達/L，回收率94%? 105%，批內(nèi)CV為%?%。批間CV為2%左右，日間CV為2%?3%。葡萄糖氧化酶法與己糖激酶法比較，73份標本葡萄糖氧化酶法均值為/L，已糖激酶法均值/L，相關(guān)系數(shù)為，回歸方程y=-。本法測定葡萄糖非常特異，從原理反應式中可知第一步是特異反應，第二步特異性較差。誤差往往發(fā)生在反應的第二步。一些還原性物質(zhì)如尿酸、維生素C、膽紅素和谷胱甘肽等，可與色原性物質(zhì)競爭過氧化氫，從而消耗反應過程中所產(chǎn)生的過氧化氫，產(chǎn)生競爭性抑制，使測定結(jié)果偏低。然而，在本法的測定條件下，溶血標本血紅蛋白的濃度達10g/L，黃疸標本膽紅素濃度達342^mol/L，維生素C小于30mg/L，均不影響測定結(jié)果。氟化鈉濃度達2g/L不干擾測定結(jié)果。標本中含尿素濃度達/L，尿酸濃度達/L，肌酐濃度達/L。半胱氨酸濃度達/L，甘油三酯濃度達/L，膽固醇mmol/L，對測定結(jié)果均無顯著影響。左旋多巴100mg/L，維生素C 精選公文范文 5mg/L以上，谷胱甘肽100mg/L時，可引起負誤差；半胱氨酸達10mmol/L時，產(chǎn)生相當/L葡萄糖的正誤差。篇二：葡萄糖氧化酶法測定血清葡萄糖實驗名稱：葡萄糖氧化酶法測定血清（漿）葡萄糖實驗原理葡萄糖可由葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸并產(chǎn)生過氧化氫，后者在過氧化物酶的作用下，能與苯酚及4-氨基安替比林作用產(chǎn)生紅色醌化合物。醌的產(chǎn)量與葡萄糖量成正比。醌化合物呈紅色，其顏色深淺與葡萄糖含量成正比，在500nm出測定其吸光度，對照標準科計算出葡萄糖的含量。實驗準備一、材料（1）血清（2）血漿：以草酸鉀-氟化鈉為抗凝劑的血漿二、試劑（1）試劑R1:磷酸鹽緩沖液100mmol，，苯酚10mmol/L。（2）試劑R2：磷酸鹽緩沖液100mmol，，葡萄 精選公文范文 7 精選公文范文 糖氧化酶16000U/L，過氧化物酶1000U/L,4-氨基安替比林/L。（3）葡萄糖校準液：/L（1mg/ml）（4）生理鹽水。（5）工作試劑（酶酚混合液）：取R1試劑與R2試劑混合在10ml試管中。三、器材（1）試管和試管架（2）移液槍（3）722型分光光度計（4）酶標儀（5）恒溫水浴箱（6）酶標板（7）板條（8）生化培養(yǎng)箱實驗步驟（1）取酶標板一塊，板條一條，設定空白孔A1，標準孔A2、A3，測定孔A4、A5，按實驗結(jié)果葡萄糖（GLU）濃度（mmol/L）=（A測定孔平均值/A校準孔平均值）x參考值：?/L測得數(shù)據(jù)為A2A3A4A5/2 x=/L（+/2實驗討論 精選公文范文 精選公文范文 ①移液槍操作熟練程度直接影響測定結(jié)果，吸樣前需多練習②測定標本以草酸鉀-氟化鈉為抗凝劑的血漿較好。③由于尿液中尿酸等干擾物質(zhì)濃度過高，會干擾過氧化物酶反應，出現(xiàn)結(jié)果假性偏低，因此葡萄糖氧化酶法不能直接測定尿液葡萄糖含量，但可直接測定腦脊液葡萄糖含量。④本法測定葡萄糖原理中反應式第一步是特異反應，第二步特異性較差，所以第二步易引起誤差。⑤葡萄糖氧化酶法測定血清（漿）葡萄糖的反應15min達不到反應終點，應延長到25min1。⑥新生兒高膽紅素血對葡萄糖氧化酶法測定血糖有負干擾影響，除去膽紅素后可以較準確測定血糖2。參考文獻王彥明，實用醫(yī)技雜志，2008（05）鄒煥榮；何國堅；葉有玩，江西醫(yī)學檢驗，2004（03） 精選公文范文 篇三：葡萄糖氧化酶法測定血清葡萄糖背景知識葡萄糖氧化酶法測定血清（漿）葡萄糖實驗原理葡萄糖氧化酶將葡萄糖氧化為葡萄糖酸，并成成過氧化氫。過氧化物酶在色原性氧受體存在時將過氧化氫分解喂水和氧，并使色原性氧受體4-氨基安替比林（4-AAP）和酚去氫縮合為紅色醌類化合物，即Trinder反應。在500nm處測得的吸光度與葡萄糖含量成正比。臨床意義1.生理性高血糖可見于餐后或高糖飲食.情緒緊張腎上腺分泌增加等。病理性高血糖（1）糖尿病患者。（2）內(nèi)分泌腺功能障礙：甲狀腺功能亢進，腎上腺皮質(zhì)及髓質(zhì)功能亢進等。升高血糖的激素增多引起的高血糖，現(xiàn)已歸入特異性糖尿病中。（3）顱內(nèi)壓增高:顱內(nèi)壓增高刺激血糖中樞，如顱外傷.顱內(nèi)出血.腦膜炎等。（4）脫水引起的高血 精選公文范文 D 精選公文范文 糖：如嘔吐.腹瀉和高熱等也可使血糖輕度增高。生理性低血糖見于長期饑餓和劇烈運動后。病理性低血糖（特發(fā)性功能性低血糖最多見，依次是藥源性.肝源性.胰島素瘤等）。（1）胰島p細胞增生或胰島P細胞瘤等，使胰島素分泌過多。（2）對抗胰島素的激素分泌不足，如垂體前葉功能減退.腎上腺皮質(zhì)功能減退和甲狀腺功能減退而使相應的激素分泌減少。（3）嚴重肝病患者，由于肝臟存儲糖原及糖異生等功能低下，肝臟不能有效地調(diào)節(jié)血糖。注意事項1.葡萄糖氧化酶對P-D葡萄糖高度特異，溶液中的葡萄糖約36%為a型，64%為p型。葡萄糖的完全氧化需要a型到p型的變旋反應。目前某些商品葡萄糖氧化酶試劑盒含有葡萄糖變旋酶，可加速這一反應，但在終點法中，延長孵育時間可達到完全自發(fā)變旋過程。新配制的葡萄糖標準液主要是a 精選公文范文 11 精選公文范文 型，故須放置2h以上（最好過夜），待變旋平衡后方可應用。葡萄糖氧化酶法可直接測定腦脊液葡萄糖含量，但不能直接測定尿液葡萄糖含量，這是因為尿液中尿酸等干擾物質(zhì)濃度過高，可干擾過氧化物酶反應，造成結(jié)果假性偏低。測定標本以草酸鉀-氟化鈉為抗凝劑的血漿較好。取草酸鉀6g，氟化鈉4g，加水溶解至100ml。吸取到試管內(nèi)，在80攝氏度以下烤干使用，可使2~3ml血液在3~4d內(nèi)不凝