梗阻性黃疸的微觀機制

梗阻性黃疸的微觀機制第一頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日肝臟切面鏡下視圖第二頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日肝細胞電鏡下視圖第三頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日相鄰肝細胞示意圖第四頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日肝細胞的緊密連接第五頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日肝內(nèi)解剖學關系第六頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日膽樹內(nèi)膽管細胞的不均一性第七頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日毛細膽管膽汁分泌的轉(zhuǎn)運系統(tǒng)第八頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日獨特的作用機制改善患者的情緒大作用大機制安全性好保護肝細胞膜保護細胞骨架抗氧化，減少肝細胞損傷解毒，抵抗有害物質(zhì)對肝細胞的損害修復肝細胞，改善膜流動性，提高Na+－K+-ATP酶活性，修復細胞骨架等，改善肝細胞功能促進肝細胞再生抗肝纖維化，延緩肝病進程增加胰島素敏感性，改善脂質(zhì)代謝CFDA批準用于妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積轉(zhuǎn)甲基轉(zhuǎn)硫基轉(zhuǎn)丙氨基TeodoroBottiglieri.S-Adenosyl-L-methionine(SAMe):fromthebenchtothebedside—molecularbasisofapleiotrophicmolecule.AmJClinNutr,2002;76(suppl):1151s-7s腺苷蛋氨酸——獨特360多重作用第九頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日內(nèi)容綱要3：三大作用機制6：六重臨床獲益作用0：良好的臨床安全性第十頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日SAMe是存在于人體組織的一種生理活性分子SAMe是存在于人體組織的一種生理活性分子，是由SAMe合成酶催化蛋氨酸和ATP而合成的。S-腺苷甲硫胺酸的結(jié)構(gòu)思美泰說明書甲基供體硫基供體丙氨基供體第十一頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸的代謝途徑12ATP腺苷蛋氨酸蛋氨酸PPi去羧基腺苷蛋氨酸腐胺亞精胺精胺亞精胺轉(zhuǎn)丙氨基5’甲硫腺苷CH3磷脂、神經(jīng)遞質(zhì)DNA、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)甲基VB12四氫葉酸甲基四氫葉酸S腺苷同型半胱氨酸半胱氨酸轉(zhuǎn)硫基胱硫醚半胱氨酸谷胱甘肽硫酸根TeodoroBottiglieri.AmJClinNutr,2002;76(suppl):1151s-7s.解毒，抗氧化促進正常肝細胞再生合成磷脂酰膽堿維持Na+-K+-ATP酶活性調(diào)節(jié)細胞膜流動性第十二頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸的三大機制腺苷蛋氨酸甲基化合物調(diào)節(jié)細胞膜流動性聚胺合成(如亞精胺+精胺)促進肝細胞再生轉(zhuǎn)硫基還原型谷胱甘肽解毒，抗氧化轉(zhuǎn)甲基轉(zhuǎn)丙氨基3大機制機制終產(chǎn)物作用1.AnsteeQM,DayCP.S-adenosylmethionine(SAMe)therapyinliverdisease:Areviewofcurrentevidenceandclinicalutility.JHepatol.2012;57:1097-11092.LuSC,MatoJM.S-adenosylmethionineinliverhealth,injury,andcancer.PhysiolRev.2012;92:1515–1542

3.WilliamsAL,

GirardC,

JuiD,

etal.S-adenosylmethionine(SAMe)asTreatmentforDepression:ASystematicReview.ClinInvestMed.2005;28(3):132–139.4.思美泰產(chǎn)品說明書，H20140261第十三頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸的轉(zhuǎn)甲基作用腺苷蛋氨酸CH3激素神經(jīng)遞質(zhì)細胞膜磷脂核酸蛋白磷脂酰膽堿的合成膜磷脂的甲基化維持Na+－K+ATP酶活性改善細胞膜的流動性，促進膽汁分泌第十四頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸的轉(zhuǎn)硫基作用腺苷蛋氨酸腺苷同型半胱氨酸谷胱甘肽硫酸鹽同型半胱氨酸?；撬岚腚装彼酑H3抗氧化膽汁酸的攝取膽汁分泌第十五頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸的轉(zhuǎn)丙氨基作用鳥氨酸腐胺亞精胺精胺腺苷蛋氨酸腺苷蛋胺MTA腺苷蛋氨酸腺苷蛋胺MTAMTA：5-脫氧5-甲基硫代腺苷促進正常肝細胞再生第十六頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸的六大作用抗氧化，減少肝細胞損傷解毒，抵抗有害物質(zhì)對肝細胞的損害修復肝細胞，改善膜流動性，提高Na+－K+-ATP酶活性，修復細胞骨架，改善肝細胞功能促進肝細胞再生抗肝纖維化，延緩肝病進程增加胰島素敏感性，改善脂質(zhì)代謝第十七頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日*P<0.05

vs單用乙醇組Cabrales-RomeroMdelP,Márquez-RosadoL,Fattel-FazendaS,etal.S-adenosyl-methioninedecreasesethanol-inducedapoptosisinprimaryhepatocyteculturesbyac-JunN-terminalkinaseactivity-independentmechanism.WorldJGastroenterol.2006March28;12(12):1895-1904腺苷蛋氨酸顯著降低經(jīng)乙醇處理肝細胞的ROS水平******腺苷蛋氨酸的六大作用-抗氧化，減少肝細胞損傷活性氧物質(zhì)（ROS）ROS水平變化百分比（%）第十八頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸的六大作用—解毒，提高內(nèi)源性血清谷胱甘肽水平，抵抗氧化應激TeodoroBottiglieri.S-Adenosyl-L-methionine(SAMe):fromthebenchtothebedside--molecularbasisofapleiotrophicmolecule.AmJClinNutr,2002;76(suppl):1151s-7s.解毒，抗氧化腺苷蛋氨酸腺苷同型半胱氨酸同型半胱氨酸CH3谷胱甘肽DNA甲基化與自由基和重金屬結(jié)合半胱氨酸轉(zhuǎn)化為無毒物質(zhì)，排出體外轉(zhuǎn)硫基作用腺苷蛋氨酸，修復肝細胞，促進內(nèi)源性谷胱甘肽的生成，持續(xù)解毒抗氧化。第十九頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日王雪明,魏榮,李楠等.腺苷蛋氨酸治療藥物性肝損害療效與血液中GSH變化關系.中國基層醫(yī)藥.2002；9(6):497-498用腺苷蛋氨酸對14例因各種藥物引起的肝損害患者給予治療，連續(xù)靜脈給藥800mg/d，3周。觀察谷胱甘肽水平變化情況6.217.40123456789治療前治療4周后GSH(mmol/L)腺苷蛋氨酸的六大作用—解毒，提高內(nèi)源性血清谷胱甘肽水平，抵抗氧化應激第二十頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸的六大作用—改善膜流動性，

提高Na+－K+-ATP酶活性三組大鼠對照組n=6結(jié)晶氨基酸組n=6結(jié)晶氨基酸+思美泰組n=6結(jié)果：結(jié)晶氨基酸組膽汁流動及Na+-K+-ATP酶活性較對照組均顯著降低（P均<0.05），而加入思美泰后可恢復其膽汁流速及Na+-K+-ATP酶活性，提示思美泰通過保護細胞膜脂質(zhì)環(huán)境維持正常肝臟細胞膜Na+-K+-ATP酶活性而改善膽汁形成和/或分泌。BelliDC,FournierLA

,LepageG,etal.S-adenosylmethioninepreventstotalparenteralnutrition-inducedcholestasisintherat.journalofHepatology1994;21:18-23**P＜0.025，VS

control及Travasol+SAMe***P＜0.005，VS

control及Travasol+SAMeTravasol:結(jié)晶氨基酸溶液第二十一頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日沒有腺苷蛋氨酸

預處理的細胞圖片可觀察到：隨著環(huán)孢霉素A濃度的增高，細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)遭受嚴重破壞（細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)不透明，呈現(xiàn)白色模糊狀）；肌動蛋白含量較正常對照組顯著下降，表明細胞骨架也遭受破壞。次毒覃環(huán)肽熒光素標記的F-肌動蛋白微絲，共聚焦顯微鏡圖片IreneD.Roma′N,GeraldD.Johnson,RogerColeman.S-Adenosyl-L-MethioninePreventsDisruptionofCanalicularFunctionandPericanalicularCytoskeletonIntegrityCausedbyCyclosporinAinIsolatedRatHepatocyteCouplets.Hepatology.1996;24(1):134-140無SAMe預處理腺苷蛋氨酸的六大作用—有效保護細胞骨架——微絲CyA組(100nmol/L）CyA組500nmol/LCyA組500nmol/LCyA組(100nmol/L）對照組經(jīng)過腺苷蛋氨酸

預處理的細胞圖片可觀察到：細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)顯影透明，說明胞膜完整，胞內(nèi)結(jié)構(gòu)沒有受到破壞。還有，肌動蛋白含量和正常對照組類似。說明腺苷蛋氨酸

有效保護細胞骨架功能。1mmol/LSAMe

預處理15分鐘后微絲是細胞骨架組成部分。此研究中F-肌動蛋白微絲含量由雙細胞連接處熒光量/總熒光量算得。第二十二頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸的六大作用

保護細胞骨架——微管2h亞砷酸鈉10μMSAMe17nM對照SAMe亞砷酸鈉亞砷酸鈉+SAMe亞砷酸鈉處理的細胞微管形態(tài)紊亂；同時用腺苷蛋氨酸處理的細胞則保留有正常的微管形態(tài)，同正常對照組。成纖維細胞熒光顯微鏡人體細胞實驗中腺苷蛋氨酸逆轉(zhuǎn)亞砷酸鈉和其他細胞骨架損傷物質(zhì)引起的微核形成。RamírezT,

García-MontalvoV,

WiseC,etal.S-Adenosyl-L-Methionineisabletoreversemicronucleus

formation

induced

by

sodium

arsenite

and

other

cytoskleton

disrupting

agents

in

cultured

human

cells.J

MutatRes.2003Jul25;528(1-2):61-74第二十三頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日MilanHolecˇeka,FrantisˇekSkopeca,LudeˇkSˇpronglb.InfluenceofButhionineSulfoximine,S-AdenosylmethionineandGlutathioneonLiverRegenerationFollowingPartialHepatectomy.Arzneim.-Forsch./DrugRes.2000;50(II):1093-1098腺苷蛋氨酸的六大作用——促進肝細胞再生***Δ*ΔΔ***Δ#ΔΔΔSAMe在早期即顯著增加肝細胞有絲分裂活性，

而外源性GSH反而抑制肝細胞再生PH：部分肝切；B：緩沖液;SAM：腺苷蛋氨酸;GSH,：谷胱甘肽;BSO：丁硫氨酸亞砜胺*P<0.05，

vs.剖腹手術(shù)ΔP<0.05，vsPH+B#P<0.05，PH+BSO+GSH或PH+BSO+SAMevsPH+BSO*第二十四頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日25腺苷蛋氨酸對初代培養(yǎng)的肝星狀細胞形態(tài)學的影響未處理對照培養(yǎng)液培養(yǎng)4d添加5mM腺苷蛋氨酸培養(yǎng)4d肝星狀細胞活化增殖肝星狀細胞趨于靜止MatsuiH,KawadaN.EffectofS-adenosyl-l-methionineontheactivation,proliferationandcontractionofhepaticstellatecells.EuropeanJournalofPharmacology.2005;509:31–36從完整鼠肝中分離的新鮮肝星狀細胞用加入10%胎牛血清/DMED(二甲基甲酰胺)培養(yǎng)24小時后，分為對照組和處理組繼續(xù)培養(yǎng)。a圖：未處理對照培養(yǎng)液培養(yǎng)4d；b圖：添加5mM腺苷蛋氨酸培養(yǎng)4d腺苷蛋氨酸的六大作用—延緩纖維化進程

——抑制肝星狀細胞的活化第二十五頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日1.ZhenyuanSong,ShirishBarve,TheresaChen.S-adenosylmethionine(SAMe)modulatesendotoxinstimulatedinterleukin-10productioninmonocytes.AmJPhysiolGastrointestLiverPhysiol.2003;284:G949–G9552.李丹,張麗娟,陳治新.實驗性大鼠肝纖維化進程中TNF一01、IL．6與IL一10的作用.世界華人消化雜志.2001;(9):1242-1245*P<0.05腺苷蛋氨酸組IL-10濃度明顯增高*腺苷蛋氨酸的六大作用—抗纖維化——提高IL-10濃度在RAW264.7的胞株中，使用脂多糖刺激后，觀察加入/不加入腺苷蛋氨酸后IL-10水平。注：IL-10主要由TH2細胞，巨噬細胞，星狀細胞，肝細胞等產(chǎn)生，有證據(jù)表明IL-10通過多種途徑阻止纖維化進程，予以外源性IL-10對CCL4誘導的肝纖維化有明顯的拮抗作用。IL-10：白介素-10*第二十六頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日1.HenarHevia,1MartaVarela-Rey,1FernandoJ,etal.5-MethylthioadenosineModulatestheInflammatoryResponsetoEndotoxininMiceandinRatHepatocytes.HenarHevia,HEPATOLOGY.2004;39(4):1088-10982.李丹,張麗娟,陳治新.實驗性大鼠肝纖維化進程中TNF一01、IL．6與IL一10的作用.世界華人消化雜志.2001;(9):1242-1245TNF-α：腫瘤壞死因子，LPS：脂多糖，MTA：5’-甲硫腺苷*P<0.05**P<0.01vs單用LPS腺苷蛋氨酸的代謝產(chǎn)物MTA可顯著抑制LPS所致TNF-α濃度腺苷蛋氨酸的六大作用—抗纖維化——抑制腫瘤壞死因子-α（TNF-α）注：TNF-α是在肝纖維化研究中最早受到關注的細胞因子之一，通過多種途徑參與肝纖維化的調(diào)控，作為重要的刺激原使肝星狀細胞活化。1500125010007505002500[TNF-α](pg/ml)*******LPS-+++++MTA(μmol/L)00100250300500第二十七頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸增加mtDNA密度，改善胰島素敏感性IncreasesskeletalmusclemitochondrialDNAdensityandwholebodyinsulinsensitivity腺苷蛋氨酸的六大作用——增加胰島素敏感性mtDNA：線粒體DMA第二十八頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日腺苷蛋氨酸改善糖尿病大鼠的胰島素敏感性注：同一時間點字母不同，代表P<0.05葡萄糖輸注率mg/kgminOLETF-SAMChengJiJin,HyeongKyuPark,YoungMinCho,etal.S-adenosyl-L-methionineincreasesskeletalmusclemitochondrialDNAdensityandwholebodyinsulinsensitivityinOLETFrats.JNutr.

2007;137(2):339-44.采用自發(fā)性2型糖尿病伴胰島素抵抗大鼠模型研究思美泰對于mtDNA密度的影響LEFO：非糖尿病大鼠OLETF：2型糖尿病大鼠伴胰島素抵抗模型OLETF-SAM:2型糖尿病大鼠伴胰島素抵抗模型加用思美泰OLETF-SAM葡萄糖輸注率高于OLEFT對照組.第二十九頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日P＜0.05腺苷蛋氨酸改善糖尿病大鼠mtDNA密度OLETF-SAM1.JinCJ,

ParkHK

ChoYM,etal.S-adenosyl-L-methionineincreasesskeletalmusclemitochondrialDNAdensityandwholebodyinsulinsensitivityinOLETFrats.JNutr.

2007;137(2):339-442.時麗麗，張莉，譚初兵等.線粒體功能損傷與胰島素抵抗[J].中國藥理學通報，2012；28（11）：1481-1486mtDNA密度與胰島素敏感性正相關腺苷蛋氨酸改善糖尿病大鼠的胰島素敏感性線粒體內(nèi)的核蛋白主要由mtDNA控制轉(zhuǎn)錄表達。線粒體主要功能是代謝體內(nèi)糖脂類物質(zhì)，產(chǎn)生ATP和熱量。mtDNA相關的線粒體功能損傷可能會引起胰島素抵抗及相關代謝類疾病。含量注：同一時間點字母不同，代表P＜0.05葡萄糖輸注率mg/kg/min

第三十頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日FXR：一種多功能的核體，醫(yī)學分子生物學雜志，2008，5（6）：529-534肝臟細胞中膽汁酸的解毒(如:SULT2A1、UGT284、BACS、BAT),包括膽汁酸氧化、硫酸鹽化和糖苷化膽汁酸和磷脂從肝細胞向膽小管的分泌(如:BSEP、MRP2、MDR3)膽汁酸在肝腸循環(huán)中的轉(zhuǎn)運（如:ASBT、IB.ABP、OSTα、OSTβ、NTCP)

腺苷蛋氨酸—調(diào)控膽汁酸代謝FXR多種途徑調(diào)節(jié)膽汁酸代謝第三十一頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日在大鼠模型中誘導IHC48h后，分別采用腺苷蛋氨酸及FXR受體激動劑GW4064治療，腺苷蛋氨酸（60mg/kg/d）顯著改善了血清膽紅素，膽汁酸及肝酶，并顯著上調(diào)了FXR表達。同時，腺苷蛋氨酸還上調(diào)了BSEP,MRP2和NTCP的表達腺苷蛋氨酸—調(diào)控膽汁酸代謝實驗設計：采用α-萘基異硫氰酸酯誘導IHC大鼠模型，分別采用腺苷蛋氨酸及FXR受體激動劑GW4064治療，檢測血漿膽紅素、膽汁酸、肝酶,

FXR,膽汁鹽出口蛋白質(zhì)(BSEP)，多重耐藥相關蛋白2

(MRP2)和Na+?；悄懰猁}協(xié)同轉(zhuǎn)運多肽(NTCP)MaoH,etal,APDW2014,Nov.Postpresentation第三十二頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日六大作用抗氧化，減少肝細胞損傷思美泰?顯著降低經(jīng)乙醇處理肝細胞的活性氧物質(zhì)（ROS）水平。促進內(nèi)源性谷胱甘肽的生成，持續(xù)解毒抗氧化。解毒，抵抗有害物質(zhì)對肝細胞的損害。促進內(nèi)源性谷胱甘肽的生成，持續(xù)解毒抗氧化。修復肝細胞，改善膜流動性，提高Na+－K+-ATP酶活性，修復細胞骨架等，改善肝細胞功能保護細胞膜：思美泰通過保護細胞膜脂質(zhì)環(huán)境，維持正常肝臟細胞膜Na+-K+-ATP酶活性而改善膽汁形成和/或分泌。保護細胞骨架：預防環(huán)孢霉素A(CyA)所致膽管功能破壞；減少細胞骨架破壞藥物所致微核細胞形成；保護微管完整。促進肝細胞再生腺苷蛋氨酸在早期即顯著增加肝細胞有絲分裂活性?？垢卫w維化，延緩肝病進程可抑制肝星狀細胞的活化。腺苷蛋氨酸通過抑制TNF表達，促進IL-10表達，從而抑制炎癥，對抗肝纖維化。增加胰島素敏感性，改善脂質(zhì)代謝思美泰?增加mtDNA密度，改善胰島素敏感性第三十三頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期日1.思美泰（腺苷蛋氨酸）說明書，H201402612.G.Manzillo,F,Piccinino,C.Surrenti,etal.MulticentreDouble-BlindPlacebo-controlledStudyofIntravenousandOralS-Adenosyl-L-Methionine(SAMe)inCholestaticPatientswithliverdisease.DrugInvestigation.1992;4(Suppl.4):90-100腺苷蛋氨酸安全性良好SAMe作為存在于人體組織的一種生理活性分子，循內(nèi)源性S-腺苷蛋氨酸的途徑代謝1妊娠期：可用于妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積1與安慰劑比較，不良反應發(fā)生率無