熒光定量PCR儀標準操作規(guī)程

熒光定量PCR儀標準操作指導書1、適用范圍：AGS AGS4800PCRAGS4800戶選擇界面。選擇用戶后，進入軟件操作界面。2、建一個檢測程序文件單擊建按鈕，建一個檢測程序文件。設置熱蓋溫度調整熱蓋溫度(30-105105℃。設置試管加液量依據實際試管加液量調整加液量參數(shù)〔5-100μl25μl。設置擴增程序單擊“添加”創(chuàng)立一個程序段添加程序名稱，設置各程序段循環(huán)數(shù)。溫度設置功能按鈕添加 在當前溫度節(jié)結尾，建一個溫度節(jié)插入 在當前溫度節(jié)前添加一個溫度節(jié)刪除 將當前溫度節(jié)刪除樣本信息錄入翻開樣本參數(shù)設置界面2.6.３樣本信息設置選擇擴增的染料，選中要設置孔位ID本類型，假設為標準品可以輸入樣本濃度信息。息。最大樣本濃度輸入值1.00e+10?？孜贿x擇單孔選擇 通過鼠標單擊選中單個孔位。相鄰孔位選擇 通過單擊鼠標并拖動選擇矩形框內相鄰孔位或者先選中一個孔位，按住“Shift”功能鍵單擊另一孔位進展選擇。不連續(xù)孔位選擇 通過按“Ctrl功能鍵進展依次追加選擇孔位?？孜?。孔位全選 在圖示位置單擊鼠標左鍵則全選全部孔位。選擇孔位增減 的孔位。樣本類型設置置，也可以選擇樣本參數(shù)工程中的樣本類型設置下拉選擇框進展選擇設置。樣本類型假設選擇標準品，需輸入樣本濃度。程序運行參數(shù)保存進展保存操作。文件進展首次保存。、程序運行參數(shù)的導入/本參數(shù)。2、文件運行0.2ml5-100μl離心操作 配置完成試劑樣本的試管在放入儀器之前要用離心機進行離心操作，確保試劑液體處于試管底部，且液體內部不含有氣泡。放置試管 假設樣本數(shù)量少于模塊的孔位數(shù)，那么在放置試管時應盡的頂部。樣本參數(shù)錄入及分組設置ID、樣本類型信息。程序運行否設置正確。退出程序運行。3、檢測結果的保存及分析5次，將自動跳轉到結果分析界面，并彈出保存熒光數(shù)據對話框。假設擴增程序沒有保存，則程序運行完畢后，軟件默認按當前時間對程序、檢測結果的分析動分析”復選框取消選擇，然后調整“基線設置”和“閾值”設置。標準濃度設置〔HEX〕樣本類型同時被設置為“標準一個通道的樣本濃度，另外一個通道樣本濃度不進展設置，則進算。同一分組可以分別設置FAM和HEX兩組標準濃度樣本。首先設置待分析分組的至少2個同一通道的標準樣本濃度值。自動分析進“定量分析界面”------選擇待分析熒光通道 進展分析計算當前通道各樣本濃度值。求，請確認標準樣本濃度設置是否正確。選擇自動計算，則自動計算各孔位的樣本濃度值與Ct值。通常標準品的標準曲線相關系數(shù)確定值應到達0.98-1之間，此試驗結果才能認為試驗結果有效。實際應用，請依據試劑操作說明書規(guī)定條件進展試劑狀態(tài)的判定。手動分析當前通道手動分析,使“自動分析”復選框處于未選中狀態(tài)。校準或取消線性校準?；€設置完成后，勾選“閾值設置”復選框，調整閾值數(shù)值或拖動閾值調整Ct分析數(shù)據的保存據及原始數(shù)據導出到“Excel”進展處理。4、分析曲線的保存存抓屏文件。5、析結果的打印、輸出樣本類型修改“樣本類型”修改按鈕。樣本資料修改選擇“報告→檢驗報告→樣本資料”對樣本資料信息進展添加修改。對需要打印的樣本，打印復選框進展勾選。設置打印模板選擇“報告→檢驗報告→報告模板”進展模板設置。假設不使用電腦缺省打印機設置，請指定打印輸出的打印機。打印擴增曲線時，包含分析選中的標準品擴增曲線。選擇待打印樣本資料的樣本進展勾選設置，完成后選擇確定按鈕進展設置信息保存。打印報表選擇打印預覽，確認打印選擇是否正確。默認選中打印擴增曲線時的預覽效果圖。打印方法一 覽界面選擇打印按鈕。打印方法二 選擇“報告 打印”按鈕。4、儀器維護保養(yǎng)每星期維護任務歸檔或備份反響板文件使用不脫毛的布塊擦拭儀器外表每月維護任務：執(zhí)行計算機硬盤碎片整理程序其它維護任務：需要時執(zhí)行以下維護任務，以解決遇到的問題：5、常見的故障與處理沒有擴增曲線：PCR硬盤休眠，沒有收集循