酵母菌的形態(tài)觀察和計數(shù)（微生物學(xué)與操作技術(shù)）

微生物學(xué)及操作技術(shù)酵母菌的形態(tài)觀察和計數(shù)實驗?zāi)康?實驗原理2實驗步驟3目錄頁CONTENTSPAGE注意事項41實驗?zāi)康倪^渡頁TRANSITIONPAGE1、實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康膶嶒災(zāi)康?.觀察酵母菌的形態(tài)特征。2.了解血球計數(shù)板計數(shù)原理，掌握顯微計數(shù)的原理及方法。1.實驗?zāi)康?實驗原理酵母菌酵母死活細(xì)胞鑒別的理論依據(jù)直接計數(shù)法血球計數(shù)板構(gòu)造計數(shù)原則2.實驗原理酵母菌1.酵母菌酵母菌是單細(xì)胞真核生物，菌體比細(xì)菌大。繁殖方式以無性繁殖（芽殖或裂殖）有性生殖產(chǎn)生子囊和子囊孢子。2.酵母死活細(xì)胞鑒別的依據(jù)3.直接計數(shù)法4.血球計數(shù)板構(gòu)造1.酵母菌5.計數(shù)原則1、酵母死活細(xì)胞鑒別依據(jù)：用美藍(lán)對酵母的活細(xì)胞進(jìn)行染色時，由于細(xì)胞的新陳代謝作用，細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力，能使美藍(lán)由藍(lán)色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型。因此具有還原能力的酵母活細(xì)胞是無色的、而死細(xì)胞或代謝作用微弱的衰老細(xì)胞則呈藍(lán)色或淡藍(lán)色，借此即可對酵母菌的死細(xì)胞和活細(xì)胞進(jìn)行鑒別。2.酵母死活細(xì)胞鑒別的依據(jù)3.直接計數(shù)法4.血球計數(shù)板構(gòu)造1.酵母菌5.計數(shù)原則2.實驗原理酵母死活細(xì)胞鑒別的理論依據(jù)1、直接計數(shù)法3.直接計數(shù)法直接計數(shù)法是利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)的一種簡便、快速、直觀的方法。2.酵母死活細(xì)胞鑒別的依據(jù)3.直接計數(shù)法4.血球計數(shù)板構(gòu)造1.酵母菌2.實驗原理1、實驗?zāi)康难蛴嫈?shù)板構(gòu)造2.酵母死活細(xì)胞鑒別的依據(jù)3.直接計數(shù)法4.血球計數(shù)板構(gòu)造1.酵母菌5.計數(shù)原則1、實驗?zāi)康难蛴嫈?shù)板構(gòu)造計數(shù)室通常有兩種規(guī)格。一種是大方格內(nèi)分為16中格，每一中格又分為25小格；另一種是大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。但是無論哪一種規(guī)格的計數(shù)室，它們都有一個共同的特點(diǎn)，即每一大方格都是由16＊25=25

＊16=400個小方格組成。2.酵母死活細(xì)胞鑒別的依據(jù)3.直接計數(shù)法4.血球計數(shù)板構(gòu)造1.酵母菌5.計數(shù)原則1、實驗?zāi)康难蛴嫈?shù)板構(gòu)造2.酵母死活細(xì)胞鑒別的依據(jù)3.直接計數(shù)法4.血球計數(shù)板構(gòu)造1.酵母菌5.計數(shù)原則16個小格1、實驗?zāi)康挠嫈?shù)原則2.酵母死活細(xì)胞鑒別的依據(jù)3.直接計數(shù)法4.血球計數(shù)板構(gòu)造1.酵母菌5.計數(shù)原則1.在計數(shù)前若發(fā)現(xiàn)菌液太濃或太稀，需重新調(diào)節(jié)稀釋度后再計數(shù)。一般樣品稀釋度要求每小格內(nèi)約有5~10個菌體為宜。2.每個計數(shù)室選5個中格（可選4個角和中央的一個中格）中的菌體進(jìn)行計數(shù)。3.位于格線上的菌體一般只數(shù)上方和右邊線上的。4.如遇酵母出芽，芽體大小達(dá)到母細(xì)胞的一半時，即作為兩個菌體計數(shù)。5.計數(shù)一個樣品要從兩個計數(shù)室中計得的平均數(shù)值來計算樣品的含菌量。3實驗步驟血球計數(shù)板使用計數(shù)方法1、實驗步驟1.血球計數(shù)板使用1.血球計數(shù)板使用1.稀釋菌液（以每小方格內(nèi)含有4-5個酵母細(xì)胞為宜，一般稀釋100倍即可）2.準(zhǔn)備計數(shù)板3.加樣，用滴管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣，讓菌懸液緩緩滲入計數(shù)室4.計數(shù)靜置片刻，使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內(nèi)，先在低倍鏡下找到計數(shù)室，再換成高倍鏡觀察并計數(shù)美藍(lán)浸片觀察2.計數(shù)方法1、實驗步驟血球計數(shù)操作1.血球計數(shù)板使用2.計數(shù)方法2.計數(shù)方法血球計數(shù)操作1.血球計數(shù)板使用2.計數(shù)方法計算公式

(1)16格×25格的血球計數(shù)板計算公式:

酵母細(xì)胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)/100×400×104×稀釋倍數(shù)

(2)25格x16格的血球計數(shù)板計算公式:

酵母細(xì)胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)/80×400×104×稀釋倍數(shù)4注意事項1.計數(shù)前需對樣品進(jìn)行稀釋，將經(jīng)過適當(dāng)稀釋的菌懸液2.血球計數(shù)板使用后，取下蓋玻片，用自來水沖洗，切