動(dòng)物胚胎移植-牛的非手術(shù)法胚胎移植（動(dòng)物繁殖技術(shù)）

牛的非手術(shù)法胚胎移植供體牛的選擇

供體牛：供體牛應(yīng)選擇健康的良種母牛，具有較高的育種價(jià)值、良好的生產(chǎn)性能、穩(wěn)定的遺傳性、旺盛的繁殖機(jī)能，而且超排效果較好，年齡選擇最好在14月齡至10歲之間。受體牛的選擇

受體牛：受體?？蛇x用非良種個(gè)體，要求體型較大、膘情中等，具有正常的發(fā)情周期，繁殖性能良好，無(wú)繁殖機(jī)能和傳染疾病。供體牛的同步發(fā)情同步發(fā)情方法：縮短黃體期的前列腺法（PG法）、延長(zhǎng)黃體期的孕酮法。供體牛的超數(shù)排卵牛有FSH+PG法和CIDA+FSH+PG法兩種；發(fā)情后8－13天開始；常用的激素為FSH；注射方法一般是連續(xù)4d遞減注射,每天2次,間隔12小時(shí)（半衰期短）；發(fā)情后8－12小時(shí)配種，間隔12小時(shí)再配種一次。供體牛的超數(shù)排卵（圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)）

配種操作的要求：選擇系譜清晰，具有優(yōu)良性狀的種公牛，配種時(shí)對(duì)母牛外陰部清洗消毒，保持輸精槍無(wú)菌，選擇合適的輸精槍和輸精部位，輸精次數(shù)不少于2次。

確定發(fā)情時(shí)12h后進(jìn)行第一次人工輸精，間隔12h進(jìn)行第二次人工輸精，每次輸精的有效精子不少于3×107。供體牛的配種胚胎收集（1）動(dòng)物準(zhǔn)備：

牛的胚胎非手術(shù)回收前，需對(duì)動(dòng)物禁食24小時(shí)以上，以減輕腹壓和瘤胃的壓力對(duì)非手術(shù)回收操作的影響。在沖胚前使其鎮(zhèn)靜，作尾椎硬膜外局部麻醉，以松弛子宮頸環(huán)肌。對(duì)外陰進(jìn)行清洗、消毒，并吸除子宮頸粘液。

胚胎收集

（2）操作步驟：

1.插入子宮角胚胎回收管：術(shù)者通過直腸把握，將帶有鋼芯的子宮角胚胎回收管經(jīng)過母牛陰道和子宮頸送入一側(cè)子宮角大彎處。再將鋼芯稍微向后抽出，再將胚胎回收管送到子宮角大彎前至小彎基部。

胚胎收集2.利用氣囊固定子宮角胚胎回收管：利用注射器通過胚胎回收管后端的送氣管向回收管前端的氣囊慢慢送入空氣，一般青年牛充氣8～10毫升，經(jīng)產(chǎn)牛12～15毫升，充氣結(jié)束后，封閉送氣管，抽出鋼芯。

胚胎收集

3.子宮角胚胎沖洗：將胚胎回收管的沖胚液通過進(jìn)液管緩慢向子宮內(nèi)灌注，再回收沖胚液，反復(fù)沖洗，每次沖胚液注入量為30～50毫升，單側(cè)子宮角沖胚液總量為300～500毫升。兩側(cè)沖完，向子宮內(nèi)注入抗菌藥物。

子宮角回收的液體較多，可以通過專用胚胎漏斗除去多余的沖卵液，在實(shí)體顯微鏡下進(jìn)行檢卵；

胚胎的質(zhì)量評(píng)定：主要采用形態(tài)學(xué)方法，優(yōu)質(zhì)胚胎才能用于進(jìn)行胚胎冷凍或移植。胚胎檢查胚胎檢查不同發(fā)育階段的牛正常胚胎（圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)）胚胎檢查（圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)）牛異常胚胎1.卵圓形透明帶2.卵裂球脫離3.卵裂球不規(guī)則4.破碎桑葚胚5.卵裂球分散6.不規(guī)則細(xì)胞團(tuán)7.空泡化8.透明帶破裂

（1）移植前受體牛的準(zhǔn)備：對(duì)受體牛禁食12～24小時(shí)，減輕腹壓和瘤胃的壓力對(duì)胚胎非手術(shù)移植操作的影響。選擇黃體發(fā)育良好的受體牛進(jìn)行保定，用2%普魯卡因2～3毫升作第二尾椎硬膜外腔麻醉；除去直腸內(nèi)宿糞，清洗和消毒外陰部。胚胎移植胚胎移植

（2）胚胎及移植器械準(zhǔn)備：移植前，先將胚胎裝入胚胎細(xì)管內(nèi)，防止胚胎丟失。將含胚胎的細(xì)管裝入胚胎移植槍塑料硬外套，并將胚胎細(xì)管送至塑料外套的前端與金屬頭相貼，金屬內(nèi)芯輕緩插入細(xì)管的棉栓端內(nèi)，最后在移植槍尖涂上消毒潤(rùn)滑劑。非手術(shù)胚胎移植裝置1、1ml注射器

；2、裝管接頭；

3、細(xì)管A.、棉塞；

B、氣泡Ⅰ、Ⅲ、保護(hù)液；Ⅱ、含胚段胚胎移植（圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)）胚胎移植

（3）胚胎非手術(shù)法移植：術(shù)者將胚胎移植裝置裝入專用塑料保護(hù)膜內(nèi)，準(zhǔn)備移植。用手扒開外陰，持移植槍插入陰道，移植槍到達(dá)子宮頸口時(shí)將移植槍塑料軟保護(hù)膜捅破，插入子宮頸口，