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第6章黃酮類化合物----黃酮類的鑒定鑒定一、薄層色譜法（TLC）二、

紙色譜法（PC)一、

薄層色譜法

一般采用吸附薄層，吸附劑大多用硅膠和聚酰胺。（1）硅膠薄層色譜:用于分離與鑒定弱極性黃酮類化合物分離苷元常用展開劑：甲苯-甲酸甲酯-甲酸；氯仿-甲醇等。（2）聚酰胺薄層色譜：分離含游離酚羥基的黃酮苷與苷元。展開劑：具有較強的極性，大多含有醇、酸或水如：乙醇－水（3：2），水－乙醇－甲酸－乙酰丙酮(5:1.5:1:0.5)聚酰胺薄層(乙醇／水）二、紙色譜法（PC)

PC適于分離各種天然黃酮類化合物及其苷類的混合物。黃酮苷：一般采用雙向展開

7黃酮類化合物的檢識和結構鑒定第一相展開采用醇性展開劑如:BAWn-BuOH:HOAc:H2O=4:1:5上層

TBAt-BuOH:HOAc:H2O=3:1:1

水飽和n-BuOH層析行為:Rf值:苷元>單糖苷>雙糖苷一般:苷元在0.70以上，而苷則小于0.7。第二相展開采用水性展開劑如：2~6%HOAc水溶液

3%NaCl水溶液

HOAc:濃HCl:H2O=30:3:10層析行為:連接糖鏈越長,Rf

越大(>0.5);

苷元Rf較小，有的留在原點。ABCDABCD苷元苷元紙色譜

第I向醇性展開劑第II向水性展開劑（BAW、TBA、水飽和正丁醇）

（2~8%HAc、3%NaCl、1%HCl）

正相色譜

反相色譜固定相（水）極性>流動相

（有認為是吸附原理）Rf規(guī)律：極性小的化合物Rf大

極性大的化合物Rf大苷元>單糖苷>雙糖苷Rf規(guī)律與左邊相反母核相同，二-OH>三-OH>四-OH>五-OH黃酮主要應用：苷元的分離鑒別

黃酮苷及花色素類的分離鑒別雙相色譜9紙層析（PC）：采用雙向紙層析。

苷元:

平面型分子:黃酮(醇)、查耳酮的Rf小,幾乎留在

原點不動(Rf<0.02);

非平面型分子:二氫黃酮(醇)、二氫查耳酮的Rf大,

因親水性較強(Rf0.10-0.30)。

層析檢查方法：

①觀察熒光,用紫外光燈照射看到有色斑點，NH3處理

產生明顯的色變。

②用2%AlCl3甲醇液噴霧,UV燈下呈亮黃色熒光斑點。習題有下列四種黃酮類化合物A、R1＝R2＝HB、R1＝H,R2＝RhaC、R1＝Glc,R2＝HD、R1＝Glc,R2＝Rha比較其酸性及極性的大小:

酸性()＞()＞()＞()極性()＞()＞()＞()比較這四種化合物在如下三種色譜中Rf值大小順序:(1)硅膠TLC(條件CHCl3—MeOH4:1展開),Rf值()＞()＞()＞()(2)聚酰胺TLC(條件60%甲醇—水展開),Rf值

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