Ⅰ型糖尿病自身抗體檢測(cè)

Ⅰ型糖尿病自身抗體檢測(cè)

糖尿病的分型診斷的進(jìn)展1979年WHO提出了原發(fā)性臨床糖尿病分為胰島素依賴型和非胰島素依賴型，依賴型與非依賴型的區(qū)別主要依據(jù)胰島素β細(xì)胞功能受損的程度，臨床上是否依賴胰島素而言，并不反映其發(fā)病本質(zhì)1997年WHO建議取消依賴型與非依賴型，改為1、2型。1、2型的區(qū)別要看病因是否由胰島β細(xì)胞自身免疫破壞造成，1型與2型是完全不同的兩類疾病，但2型非依賴型可發(fā)展成1型胰島素依賴型，成人緩慢進(jìn)展型就經(jīng)歷了這個(gè)過(guò)程。WHO（1997年）建議的糖尿病

分型方案

1型糖尿?。═1DM）胰島β細(xì)胞破壞導(dǎo)致胰島素絕對(duì)缺乏：A.免疫型；B.特發(fā)型2型糖尿?。═2DM）胰島素抵抗為主體的胰島素相對(duì)缺乏，或胰島素分泌受損為主體的胰島素抵抗其他特殊類型糖尿病妊娠期糖尿病

1型糖尿病的流行病學(xué)主要見(jiàn)于15歲以前的兒童和未成年人；亞洲及我國(guó)發(fā)病率相對(duì)較低（我國(guó)兒童中的發(fā)病率為0.59/10萬(wàn)每年，全國(guó)T1DM的總數(shù)至少200-400萬(wàn)）各國(guó)的1型糖尿病較以前有逐年增加趨勢(shì)；不少地區(qū)的1型糖尿病的發(fā)病率與季節(jié)有關(guān)1型糖尿病的發(fā)病機(jī)制

遺傳易感性環(huán)境因素感染、飲食、地理、氣候

β細(xì)胞自身免疫損傷

β細(xì)胞破壞、功能損害胰島素分泌缺乏

1型糖尿病的病程β細(xì)胞量1型糖尿病的病程遺傳易感性環(huán)境因素胰島素正常自身抗體陽(yáng)性血糖正常胰島素↓血糖正常應(yīng)激血糖↑胰島素↓↓血糖↑80%β細(xì)胞破壞胰島素缺乏臨床糖尿病1型糖尿病和2型糖尿病的比較

T1DMT2DM

起病急進(jìn)行性內(nèi)源性Ins低或缺乏正常，升高或降低酮癥常見(jiàn)少見(jiàn)發(fā)病年齡各年齡段絕大多數(shù)為成人體重通常非肥胖肥胖或非肥胖治療Ins飲食，口服降糖藥，Ins

家族史10-15%30%

孿生子發(fā)病一致率30-50%70-90%HLA相關(guān)HLA-DR,HLA-DQ無(wú)關(guān)自身抗體多見(jiàn)（>85%)少見(jiàn)1型糖尿病和2型糖尿病的區(qū)分一般<30歲，起病急，中到重度癥狀明顯體重下降，消瘦，尿酮或DKA空腹或餐后C肽低下免疫標(biāo)記物(GADA,ICA,IA-2)

是否

T1DM

T2DM免疫介導(dǎo)型1型糖尿病亞型的特征急性發(fā)病型緩慢發(fā)病型（LADA)患病率（%）約80%約20%性別男女相近男略多于女起病年齡多為兒童青少年多為成年人，一般>30歲起病方式急，有者以酮癥酸中毒（DKA）發(fā)病酷似非肥胖T2DM，多在病后3年內(nèi)發(fā)生DKA糖耐量減低發(fā)病時(shí)嚴(yán)重?cái)?shù)年后顯著或嚴(yán)重伴其他自身免疫病常無(wú)可有（Addison，惡性貧血，重癥肌無(wú)力等）依賴Ins治療發(fā)病后即依賴初期對(duì)飲食和/或口服降糖藥有效隨后依賴胰島β細(xì)胞功能發(fā)病后即嚴(yán)重受損，血中C肽水平低或側(cè)不出發(fā)病時(shí)尚有殘存功能，數(shù)年后同急性型β細(xì)胞自身抗體起病時(shí)急劇升高，發(fā)病后下降，數(shù)年后可陰轉(zhuǎn)低水平持續(xù)陽(yáng)性，有人超越10年抗胰島細(xì)胞抗體(ICA)

1974年Bottazzo采用間接免疫熒光法在胰島素依賴性糖尿病患者血清中首次檢測(cè)到抗胰島細(xì)胞抗體（isletcellautoantibodies,ICA）。ICA是針對(duì)胰島細(xì)胞內(nèi)多種抗原的一組抗體,其靶抗原至今尚未完全闡明。與糖尿病相關(guān)的自身抗原不僅在β細(xì)胞表達(dá)，這些抗原的組織分布可分為：

(1)β細(xì)胞特異的，如胰島素；

(2)胰島細(xì)胞特異的；

(3)神經(jīng)內(nèi)分泌特異的，如分子量為65kD的谷氨酸脫羧酶（GAD65kD）、ICA512、神經(jīng)節(jié)苷脂（ganglioside）、腦硫脂（sulfatides）等；

(4)較廣泛的分布，如HSP62等。目前所知的ICA主要抗原的是谷氨酸脫羧酶（GAD）和酪氨酸磷酸酶（IA2）檢測(cè)方法：間接免疫熒光法組織化學(xué)染色法免疫沉淀化學(xué)法

ELISA法

目前ICA的檢測(cè)方法主要是以猴胰腺為基質(zhì)的間接免疫熒光法，但易受組織的固定方法的影響?？挂葝u細(xì)胞抗體與胰腺的內(nèi)分泌部位反應(yīng)，可見(jiàn)所有胰島細(xì)胞胞漿呈現(xiàn)均質(zhì)到顆粒型熒光。檢測(cè)方法的標(biāo)化：

1983年瑞典的Ludvigsson為一名1型糖尿病新發(fā)病者做了血漿置換,這份血漿在青少年糖尿病基金會(huì)(FDA)組織的ICAs定標(biāo)實(shí)驗(yàn)中,在參加這項(xiàng)工作的所有實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)時(shí)均為ICAs陽(yáng)性,于是用這份血樣定出了ICAs的JDF單位,并逐漸成為國(guó)際上較為通用的單位。敏感度81%(44%～100%)，特異度96%(64%～100%)特異度較GADA和IA2A差I(lǐng)CA可作為早期預(yù)測(cè)指標(biāo)能早于T1DM發(fā)病8年前被檢測(cè)出高滴度的ICA（大于20-40JDF單位）預(yù)示疾病進(jìn)展的高危險(xiǎn)性。大部分T1DM病人的ICAs在發(fā)病2年后消失，ICA持續(xù)陽(yáng)性超過(guò)2~3年者，僅占T1DM的10%。ICA滴度的持續(xù)高水平通常與β細(xì)胞的損傷有關(guān)，ICA的水平與C肽水平呈負(fù)相關(guān)。ICA和其他胰島自身抗體（如GAD或IAA）同時(shí)陽(yáng)性對(duì)疾病更有診斷價(jià)值，這類病人發(fā)生T1DM的危險(xiǎn)性是僅ICA陽(yáng)性的病人的3-5倍。IC存A在不郊同人養(yǎng)群中老的陽(yáng)阻性率IC榮A的檢教測(cè)對(duì)1型糖智尿病嫌有很烘好的海預(yù)測(cè)慎價(jià)值

人群陽(yáng)性率（%）健康對(duì)照組0.1-0.2T1DM患者直系親屬2-5新近診斷的T1DM患者60-80T2DM患者5-7谷氨枯酸脫淺羧酶均抗體(G轟AD丟-Ab)谷氨尋酸脫聽(tīng)羧酶γ氨基顯丁酸（GA語(yǔ)BA）的祥合成攀酶表達(dá)班于人趨腦及揀胰島補(bǔ)中均拐有，懶主要廢位于拘細(xì)胞阻漿中具有某抑制徹生長(zhǎng)害抑素嫂和胰蓬高糖袋素分枕泌的尋作用斯，并戀可調(diào)屬節(jié)胰勉島素翁的分鵲泌和現(xiàn)胰島凱素原脹的合壁成19猴90年，Be獻(xiàn)ak頌ke形sk崖ov首次償證明GA耳D是1型糖勇尿病矩的自章身抗耐原GA裙D分子鍛存在65熄kD和67呢kD兩種倘形式圍，兩鴉者在慈氨基慕酸水在平上該有65籃%的同橫源性唱和80蜻%的相膛似性海，免娃疫源鈴性也猛基本刪相同替，目喜前認(rèn)員為T1傳DM中抗GA陪D6券5抗體宋更常稻見(jiàn)檢測(cè)凈方法任：免疫遼沉淀瓜酶活滅性法放射物免疫座法EL揀IS斑A法間接稍免疫崇熒光樹(shù)法化學(xué)蘆發(fā)光歐法最常旦用的GA樂(lè)D-Ab的檢狹測(cè)方覆法是EL酷IS滴A法和雙放免倍法。放免到法由束于存梨在放稻射性攪污染青目前行已逐遙漸被EL司IS熟A法替越代EL哨IS廁A法采次用親他和素放和生情物素傅擴(kuò)大連級(jí)聯(lián)含反應(yīng)應(yīng)增強(qiáng)拾了檢物測(cè)的昨敏感衫性GA域D檢測(cè)震方法鐘的評(píng)楊價(jià)GA謀D自身?？贵w:4轉(zhuǎn)1個(gè)實(shí)許驗(yàn)室寶測(cè)定途了血部清GA絮Da漸b,其中威多數(shù)筒運(yùn)用歌重組禽人GA黑D的RI突A法,其調(diào)克整敏境感性街是0～91貴%垃(平均81病%蓄)。EL濤IS家A法與RI帝As法比費(fèi)較,有較掏好效煌果,其調(diào)稀整敏阿感性77旬%河,雙管賞測(cè)定憑的陽(yáng)針性或憂陰性野一致樓性為10尊0淺%。在12洗5例血祥清RI饒A法的困陽(yáng)性鬧率為22恐.4財(cái)%，EL經(jīng)IS可A的陽(yáng)炊性率億為26淋.4顫%，季兩者冰的顯濁著相移關(guān)（P=損0.跪02桂5)。均司與IC還A顯著塞相關(guān)P值分溪?jiǎng)e為0和0.哭01。服說(shuō)案明EL由IS奏A法可號(hào)以替罷代RI矩A法做飼為1型糖猛尿病愈自身餅抗體紹篩選苗的有保效手末段。（RI弓A試劑——?dú)W蒙陵公司繁；EL除IS乒A試劑——美國(guó)BL穿OM蛙ER枝IC油A公司釘）GA蝦D在T1陷DM發(fā)病洋機(jī)理繁中的失作用分子幸模擬(m士ol隱ec罩ul齒ar孟m淚im舞ic覺(jué)ry費(fèi))機(jī)制兼致病憐學(xué)說(shuō)兇：病毒棄蛋白舉如柯宮薩奇B病毒p2往C蛋白脫肽段,胰島β細(xì)胞育抗原路分子愁谷氨過(guò)酸脫吸羧酶(G象AD戀)的部耳分肽稈段序售列相填似,前者(外源鴉性蛋廣白多片肽)在誘岸導(dǎo)機(jī)灶體產(chǎn)及生免驢疫的弓同時(shí),亦可昆能誘輕發(fā)針精對(duì)自熱身胰擔(dān)島β細(xì)胞紋的攻徹?fù)?，粘?dǎo)致β細(xì)胞轉(zhuǎn)的損貫傷。GA劉D-Ab具有椅與β細(xì)胞嗚緩慢考損傷閥相關(guān)懇性好魯、出營(yíng)現(xiàn)早旨、持糟續(xù)時(shí)擋間長(zhǎng)門、年屢齡跨狀度大爺、陽(yáng)別性率著高、燭檢測(cè)珍易標(biāo)倍準(zhǔn)化夏等特愿點(diǎn)，鍵是目述前公籮認(rèn)的解診斷LA版DA及預(yù)精測(cè)胰惱島功避能的死免疫薪學(xué)指撇標(biāo)GA忌D-Ab可于電發(fā)病謙前10年測(cè)褲出，茂且在市此期腫間呈水高低拼度持汁續(xù)存主在，漿約80埋%新發(fā)并患者芹血清唇中GA糖D陽(yáng)性眉且水煤平較恥穩(wěn)定綁，病礦程10年以諷上仍靠存在姐高滴蠟度GA攻D抗體岸。GA若D的臨拍床應(yīng)標(biāo)用GA昌D抗體靜在大姿多數(shù)T1緊DM患者逐中陽(yáng)韻性，艱且陽(yáng)物性率爽不隨拋病程冤延長(zhǎng)慌而下備降。實(shí)驗(yàn)著顯示鳳新診旱斷的碗患兒括中GA戚D抗體須陽(yáng)性莊率為74杠%，長(zhǎng)吩病程死者為67廟%，而絡(luò)他們學(xué)的IC冤A陽(yáng)性這率分議別為64煉%和14昌%。如在橡初發(fā)T1昂DM患者骨中查角到GA朗D抗體婆有助豪于排撿除T2匯DM，以為助于DM診斷呀分型懷并指忘導(dǎo)治枝療。在T1瘦DM一級(jí)攻親屬愧（高規(guī)危人點(diǎn)群）修，33瘦.3民%的GA負(fù)DA陽(yáng)性渣者可滅能患TI肚DM。TI從DM一級(jí)設(shè)親屬扭中GA絨D抗體橋陽(yáng)性依率為15寶%左右暴，其之中1/雁3在6~誦18個(gè)月寨后發(fā)母展為T1劫DM。GA朱DA在僵樣人綜農(nóng)合征租（SM檢S）中柳的陽(yáng)目性率撫為10督0%費(fèi),此外野還見(jiàn)賞于與T1稻DM相關(guān)踢的多某腺體遺自身況免疫川綜合機(jī)征。GA劑D在不廁同人嚼群中池的陽(yáng)悅性率

人群陽(yáng)性率（%）

健康對(duì)照組0.3-0.6T1DM患者直系親屬3-4

其他的自身免疫性內(nèi)分泌疾病患者1-2

新近診斷的T1DM患者55-85T2DM患者10-15

妊娠糖尿病10抗酪紡氨酸役磷酸驕酶抗竟體(I公CA雅5球12煤/I輩A門2a陸b)IC肚A競(jìng)51斃2/勸IA糖2是利能用1型糖矮尿病鋒患者莫或其鞋前期杯病人擾的血眾清免泳疫篩私選胰陣島細(xì)櫻胞的cD中NA文庫(kù)箏得到械的一鑼個(gè)新佳的β細(xì)胞貨自身汪抗原琴。其氨染基酸理序列思與T淋巴稻細(xì)胞成蛋白仇酪氨沾酸磷孕酸酶(P詞TP役)C脂D4哥5相似微，而桌堿基嚴(yán)序列主與人肺胰島亭素瘤澡克隆椒的cD刷NA(I繡A2見(jiàn))相近肥。No御rt產(chǎn)he沒(méi)rn印跡皆示IC寫(xiě)A討51襪2/蓄I(lǐng)A晃2在胰川島、奪腦和懷垂體蛾中均成有表預(yù)達(dá)。Ra濕bi稻n等發(fā)既現(xiàn)IC臥A5票12實(shí)際省上是IC妹A的一冒個(gè)片衡段。IA往2A存在照于大仍約65謹(jǐn)%（55察%-怕75鄙%）的唯新發(fā)T1鉆DM病人適中，四而正怪常對(duì)弟照人腐群中麥陽(yáng)性足率小釘于1%。IA擱-2爆Ab特異喂性強(qiáng),在不用伴1型DM的自獵身免椒疫病率患者旗中較招少發(fā)攝現(xiàn)。T1渠DM患者竭中IA鞏2A陽(yáng)性模率可早能受深多種輝因素爸影響跨，15歲以呈上T1馬DM者IA澡2A陽(yáng)性斥率最掉高，表隨增形齡陽(yáng)晨性率墾逐漸直下降叫，但滾其發(fā)擺生率都與DG先A抗體個(gè)無(wú)關(guān)主。攜帶IA特-2抗體濾的個(gè)喘體在5歲時(shí)穗患Ⅰ型糖嬌尿病戚的風(fēng)年險(xiǎn)是34歲時(shí)嬌的11倍。檢測(cè)取方法酶聯(lián)朋免疫群吸附換分析這法(澆EL輔IS仇A)放射摟配體熄分析車法(R腫LA有)35S標(biāo)記疏的放河射免備疫沉傳淀法抗胰謝島素貸自身誼抗體(I館AA動(dòng))IA方A的識(shí)腦別的是抗原植表位才是胰縫島素A鏈的A8塘-A謠13殘基守和B鏈的B1把-B筑3殘基IA深A(yù)與逆斧轉(zhuǎn)錄壯病毒垂的p7局3蛋白蒙間存毒在交墊叉反境應(yīng)，跡提示儀內(nèi)源蓬性的工逆轉(zhuǎn)創(chuàng)錄病詞毒感水染與T1猜DM的發(fā)致生有飼關(guān)IA宮A與胰財(cái)島素算治療評(píng)誘導(dǎo)拖的抗百胰島傷素抗迷體相壓似IA瓜A在新績(jī)?cè)\斷厭的T1啦DM患者朝中的沉陽(yáng)性圾率為40什%，多恒見(jiàn)于忘兒童承（≤4歲）吳，在奇成人血中的急陽(yáng)性馬率僅丈為4%，在5歲以塊前發(fā)際生的IA純A陽(yáng)性稼率達(dá)50院%，IA搏A滴度船隨增欠齡而侵降IA躍A與IC如A相關(guān)鳥(niǎo)，在逢高危鳳人群秤中約40展%I求CA陽(yáng)性扇者IA且A陽(yáng)性燙。IA半A水平類與T1寸DM發(fā)生委的速足度呈候相關(guān)籌性，寶高滴筋度IA畢A者發(fā)殘病較法快檢測(cè)岸方法放免敬法；EL浙IS劫A法不同齡實(shí)驗(yàn)煌室及榜不同亮方法晴測(cè)定IA程As,結(jié)果震的一控致性宴顯著言低于IA案2A和GA勸DA潔s。自身蹄抗體趟對(duì)T1萄DM的診敗斷伙敏感廁性和該特異起性自身抗體敏感度（%）特異度(%)IAA40~7099GADA70~8099IA-2A50~7099ICA8495T1答DM患者顫中胰樓島自配身抗約體的字陽(yáng)性澆率?；家蚍N鉤族、慮發(fā)病動(dòng)年齡年、病捕程和妨臨床紅亞型委不同鞭而不痰同。房誠(chéng)單一恨的自銹身抗桃體的別檢測(cè)野缺乏致最佳殃的敏歲感性館和特只異性抽，目謙前常纏采用寶多項(xiàng)告自身擦抗體欺的聯(lián)圈合檢咬測(cè)，指對(duì)T1墊DM的診繳斷準(zhǔn)瓦確性姨更高IA廚2－Ab聯(lián)合GA洲D(zhuǎn)－Ab及IA附A兩種呼以上厘抗體配陽(yáng)性伐具有68箏%的陽(yáng)洞性預(yù)畜測(cè)價(jià)常值,怎80俱%敏感確性和10敢0椒%特異隆性。預(yù)測(cè)則率最忘高的叼組合注是IC補(bǔ)A加IA筆-2候A和（貢或）IA姿-2致β抗體井。另蜻一項(xiàng)途研究腫發(fā)現(xiàn)擁采用礎(chǔ)兩步厘篩查油法，前即先阿篩查IA叉-2僵A和（宜或）GA良D抗體隔，然南后篩亞查IA陸A和（服或）IC柄A，對(duì)趴糖尿董病的客預(yù)測(cè)昨敏感垃度最飼高枝。另有風(fēng)人認(rèn)吼為IC璃A的檢掉測(cè)缺所乏穩(wěn)鄰定性朗，通肥常所描用的奏間接裝免疫張熒光要法僅灑能做銳到半武定量霸，而材推薦愿使用IA韻22蛛Ab聯(lián)合GA何D2少Ab及IA糾A的篩雁選組芒合。近來(lái),國(guó)外步還建茂立了匯一種GA點(diǎn)D-Ab和IA緩2-意Ab一步繳性聯(lián)膊合檢牢測(cè)法斬。其錄結(jié)果映與GA蕩D-Ab、IA忙2-背Ab分別怖檢測(cè)有結(jié)果朋高度弓一致游。此坡法簡(jiǎn)斷單高憂效、創(chuàng)成本袋低、狹重復(fù)持性好,并可狠用毛傲細(xì)血避管血恩作為爭(zhēng)標(biāo)本,適于兩在一龍般人恨群特滑別是資少兒艘中進(jìn)櫻行普架查。胰島虎細(xì)胞自身況抗體吸的組箱合預(yù)測(cè)Ⅰ型糖長(zhǎng)尿病跟蹤否的年葉數(shù)糖尿吼病的惱發(fā)病慌率Pr饑og奮re脈ss縫io智n滲to騎D組ia健be層te扒svsNu仆mb錦er登o議fAu肅to因an貪ti渴bo田di晴es(G寒AD盟,