甲型流感病毒抗原檢測方法

關于甲型流感病毒抗原檢測方法第1頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月預期用途流感是由流感病毒引起的急性呼吸道傳染病，潛伏期為1-3天，患者發(fā)病突然，主要癥狀有畏寒、頭痛、渾身肌肉疼痛、無力、干咳等。第2頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月萬泰生物甲流感病毒抗原診斷試劑盒采用免疫滲濾技術，定性檢測人鼻咽拭子或咽拭子樣本中的甲流感病毒抗原。原理：采用雙抗體夾心法原理檢測甲流感病毒核蛋白抗原。硝酸纖維膜上預包被抗-FluANP的單克隆抗體，若待測樣品中存在FluANP抗原，經(jīng)裂解液處理后，抗原可與包被抗體結合，形成抗原-抗體復合物（Ag-Ab），隨后加入抗-FluANP酶標試劑（Ab-HRP）,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物（Ab-Ag-Ab-HRP),最后通過酶催化底物顯色，生成藍色產(chǎn)物，若樣品中無FluANP抗原，不顯色。第3頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月注意事項樣本采集不當、樣本儲存不當、標本不新鮮或樣本反復凍融均會影響檢測結果。采集的樣本若存在個別高濃度藥物（如鼻腔噴霧藥劑）會影響檢測結果。檢測試劑僅對樣本中的A型流感病毒抗原提供定性檢測。陽性結果僅表示樣本中A型流感病毒抗原的存在，而不等作為機體感染A型流感病毒的唯一標準。陰性結果并不能完全排除感染A型流感病毒的可能性。結果陰性但有臨床癥狀存在，建議使用其他臨床方法進行測試。第4頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗室生物安全

根據(jù)國家衛(wèi)生和計劃生育委員會印發(fā)的《人感染H7N9禽流感醫(yī)院感染預防與控制技術指南》的要求：醫(yī)務人員接觸患者的血液、體液、分泌物、排泄物、嘔吐物及污染物品時應戴清潔手套，脫手套后洗手。第5頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月甲型流感病毒抗原檢測盒第6頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月甲型流感病毒抗原檢測第7頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第8頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月樣本采集及送檢注意事項采集拭子應使用檢驗科提供的專用微生物拭子（切勿使用普通棉簽）。標本采集及檢測應嚴格按照相關防護要求進行防護，避免感染。本試驗使用鼻咽拭子標本進行檢測。采集樣本用品共兩種，分別是：鼻咽拭子和樣品保存液，臨床需要時到檢驗科領取。第9頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月鼻咽拭子樣本檢測結果與核酸檢測結果比較，靈敏度達到91.3%，特異性達到99.65%。咽拭子樣本檢測結果與核酸檢測結果比較，靈敏度達到71.13%，特異性達到100%。樣本采集不當可能導致陰性結果。對于進行了抗病毒藥物治療的患者，其體內(nèi)病毒含量大為下降，會造成陰性結果。建議在使用抗病毒藥物前檢測。第10頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月甲型流感病毒抗原檢測鼻腔分泌物采集：收集鼻腔分泌物時，將拭子插入鼻腔中分泌物最多處，輕輕轉動并向鼻腔內(nèi)部推動拭子，直至鼻甲（離鼻孔2.0cm-2.5cm）受阻處，貼鼻腔壁轉動拭子三次，取出拭子。第11頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月甲型流感病毒抗原檢測咽喉分泌物采集：將拭子從口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上顎扁桃的發(fā)紅部位為中心，適度用力擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，應避免觸及舌部，取出拭子。第12頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月樣品處理采集完畢的微生物拭子插入檢驗科提供的專用樣品保存液中，緊靠管子內(nèi)壁旋轉多次使樣品盡可能溶解在溶液中，最后把拭子頭留于瓶中，旋緊蓋子（避免液體漏出）后送檢。見下圖：第13頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第14頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月處理后的樣品應及時送檢，也可暫存與2-8℃（不超過12小時），中午、夜間采集的標本送到急診化驗室2-8℃密封保存，正常上班后檢測。檢測方法如下圖：第15頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月1.將樣品充分混勻后，取樣200ul，加入樣品處理瓶中第16頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第17頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第18頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月滴加14滴裂解液（約400ul）到樣品處理瓶中。充分混勻。第19頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第20頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第21頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第22頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第23頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第24頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月滴加5滴（約200ul）酶標試劑到反應膜上第25頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月等待酶標試劑完全滲入后，再等待2-3分鐘，讓其完全反應第26頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月每次滴加12滴洗滌液洗滌2次第27頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月加2滴顯色液顯色，待顯色液完全滲入，再等待2-3分鐘第28頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月加1滴終止液，3分鐘內(nèi)判斷結果。終止5分鐘后的結果無臨床意義第29頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第30頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第31頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月第32頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月由于陽性樣品的強度不同，檢測點的顯色可能出現(xiàn)顏色深淺的現(xiàn)象。在規(guī)定的觀察時間內(nèi)，不論顏色深淺，即使非常弱的顯色也應判定為陽性結果。第33頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月滲濾裝置從包裝中取出后請在20分鐘內(nèi)使用。樣品處理瓶蓋必須擰緊防止樣品漏出，滴加時應使瓶中液體全部滴到加樣孔中。滴加試劑時瓶口應垂直對準加樣孔，保證液滴體積的準確性。第34頁，課件共36頁，創(chuàng)作于2023年2月

標本的保存用于病毒分離和核酸檢測的標本應盡快進行檢測。24小時內(nèi)能檢測的標本，置于4℃保存；不能于24小時內(nèi)檢測的標本，置于-70℃或以下保存。（如無－70℃保存條件，則于－