大規(guī)模核酸檢測經(jīng)驗分享(郝崇華)

大規(guī)模核酸檢測經(jīng)驗分享郝崇華目錄?

1.檢測前?

2.檢測中?

3.檢測后?

4.意外事件/事故處理流程?

5.持續(xù)改進?質(zhì)量保證及其關(guān)鍵環(huán)節(jié):?

檢測前：標(biāo)本的采集、運送和保存，試劑和耗材的準(zhǔn)備、防護用品的準(zhǔn)備、大規(guī)模核酸檢測方案?

檢測中：試劑的配置、核酸提取、擴增檢測?

檢測后：結(jié)果分析與報告、醫(yī)療廢物的處理1.檢測前大規(guī)模核酸檢測方案的編制?

1.科室管理和流程協(xié)調(diào)組:

負責(zé)人員的安排調(diào)動，協(xié)調(diào)各組聯(lián)動，解決過程出現(xiàn)的問題并記錄。?

2.技術(shù)組：負責(zé)樣本接收、樣本檢測、結(jié)果報告過程的質(zhì)量監(jiān)督和質(zhì)量控制，隨時向管理組報告過程發(fā)現(xiàn)的問題，并記錄過程。?

3.樣本接收組：負責(zé)樣本接收工作場所的安排、原始樣本接收流程安排、樣本移交流程安排、記錄安排、場地消殺安排。1.檢測前大規(guī)模核酸檢測方案的編制?

4.檢測組：按照要求完成核酸檢測和結(jié)果報告，依照醫(yī)療廢物管理條例負責(zé)臨床樣本的儲存、保留和處置。?

5.保障組：負責(zé)現(xiàn)場設(shè)備、試劑、耗材、防護用品、支持文件的配給、維持秩序、生活安排、信息系統(tǒng)協(xié)調(diào)等。?

6.感控組：監(jiān)督跟蹤生物安全防護、設(shè)施和環(huán)境安全控制、職業(yè)暴露應(yīng)急處置等。標(biāo)本的接收：?

1.標(biāo)本送到檢驗科，與送檢人員核對標(biāo)本數(shù)量及信息，并簽字確認。?

2.標(biāo)本的編號：穿隔離衣，戴防護鏡、戴N95口罩在生物安全柜內(nèi)編號，編號規(guī)則：按每批90個標(biāo)本編號，1-1-90，2-1-90，3-1-90（1-90，101-190，201-290）等。同時每排8個放置在專用試管架上。?

3.標(biāo)本的交接：編號完成后與檢測人員交接并做好記錄。?

4.標(biāo)本的保存：核酸檢測的標(biāo)本應(yīng)盡快進行檢測，能在

24

小時內(nèi)檢測的標(biāo)本可置于

4℃保存；24

小時內(nèi)無法檢測的標(biāo)本則應(yīng)置于?

-70℃或以下保存（如無-70℃保存條件，則于-20℃冰箱暫存）。?由于大規(guī)模篩查標(biāo)本并且量非常大，并且一旦發(fā)現(xiàn)異常標(biāo)本，需要迅速準(zhǔn)確無誤地在幾千標(biāo)本中找出該樣本，進入復(fù)檢和上報程序，這就需要標(biāo)本的唯一編號清晰且適合抓取，同時也方便檢測人員流程記錄表的書寫。檢測前的準(zhǔn)備?

1.大批量核酸檢測需要大量試劑和加樣槍吸頭，可以在PCR外圍把試劑和加樣槍吸頭包裝盒拆除；?

2.2名工作人員穿戴好二級防護后，進入I區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)配置試劑；?

3.2--8名工作人員穿戴好三級防護后，進入II區(qū)樣本制備區(qū)進行核酸的提??；?

4.I區(qū)工作人員完成試劑配置后，進入III區(qū)進行核酸擴增。?

5.人員安排考慮不同實驗室人員儲備、提取儀和擴增儀的數(shù)量等。試劑的配置可以提前(當(dāng)日)2.檢測中?

標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)：?

在提取核酸時，標(biāo)本號與提取板的編號要一一對應(yīng)，同時填寫對應(yīng)的流程表。提取板、標(biāo)本按順序整齊擺放，以便異常結(jié)果標(biāo)本第一時間復(fù)查。結(jié)果出來后才能處理標(biāo)本和提取板。同時與下一班做好交接記錄。每次提取結(jié)束后，用75%酒精擦拭提取儀內(nèi)部，并至少10分的紫外燈照射。工作結(jié)束后用75%酒精擦拭生物安全柜、臺面。用0.2%有效氯溶液擦拭地面。開紫外燈照射120分鐘，打包帶走所有的醫(yī)療廢物。2.檢測中?

擴增檢測區(qū)：按標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)傳送過來的流程圖布板擴增，同時記錄結(jié)果及陰性、陽性、質(zhì)控記錄。用自封袋裝擴增產(chǎn)物，工作結(jié)束后用75%酒精擦拭擴增儀、臺面。用0.2%有效氯溶液擦拭地面。開紫外燈照射60分鐘，打包帶走所有的醫(yī)療廢物。3.檢測后?

每組的實驗結(jié)果由組長檢查原始擴增結(jié)果，組員負責(zé)提交檢驗結(jié)果，組長審核報告。3.檢測后?

結(jié)果上報及復(fù)檢原則

每板結(jié)果出來后，首先參考擴增試劑說明書判斷陰性對照、環(huán)境評價和陽性對照是否在控，若失控需立即查找原因，并整改。

在陰性對照、環(huán)境評價和陽性對照均在控的情況下進行結(jié)果分析，若有內(nèi)參未檢出的標(biāo)本，立即原管復(fù)檢；若出現(xiàn)

ＯＲＦ１ａｂ

或

Ｎ

基因單靶位點陽性則不上報，立即使用雙試劑復(fù)檢；若

ＯＲＦ１ａｂ

及

Ｎ基因雙靶位點陽性第一時間上報，同時立即雙試劑復(fù)檢。

在記錄流程表時，填寫復(fù)檢標(biāo)本的孔位，初始

Ｃｔ

值及復(fù)檢

Ｃｔ值，并做好交接班記錄。3.檢測后醫(yī)療廢物的處理：1.試劑準(zhǔn)備區(qū)和核酸擴增區(qū)的醫(yī)療廢物，樣本制備區(qū)的核酸提取板，雙層扎袋，鵝口扎好，外面用75%酒精或0.2%有效氯溶液噴拭后運輸至醫(yī)療廢物存放點。2.標(biāo)本制備區(qū)的醫(yī)用防護服、標(biāo)本放入雙層醫(yī)療廢物袋中，外面用75%酒精或0.2%有效氯溶液噴拭后運轉(zhuǎn)到高壓滅菌間，高壓滅菌后雙層扎袋，鵝口扎好，運輸至醫(yī)療廢物存放點。利器盒直接封口后外面用75%酒精或0.2%有效氯溶液噴拭后運輸至醫(yī)療廢物存放點。4.意外事件/事故處理流程?

標(biāo)本溢灑的處理流程?

當(dāng)出現(xiàn)標(biāo)本溢灑時，首先在溢灑區(qū)域鋪上紗布（完全覆蓋），而后用0.5%的含氯消毒液噴灑在紗布上，作用

３０

ｍｉｎ

以上，再將紗布小心移除。清理過程中避免接觸污染物，清理的污染物按感染性廢物處置。

清除污染物后，用