紫外可見分光光度法的應(yīng)用

藥品分析技術(shù)課程第4課時(shí)-第7章節(jié)紫外-可見分光光度法的應(yīng)用

一.定性分析

二.定量分析第4課時(shí)-第7章節(jié)（一）定性鑒別：一、定性分析對比法：比較樣品化合物的吸收光譜特征與標(biāo)準(zhǔn)化合物的吸收光譜特征；或與文獻(xiàn)所載的化合物的標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行核對。同一物質(zhì)有相同吸收光譜圖，反之不一定是同一物質(zhì)。紫外-可見分光光度法主要用于有機(jī)物分析。定性分析：比較吸收光譜特征可以對純物質(zhì)進(jìn)行鑒定及雜質(zhì)檢查；定量分析：利用光吸收定律進(jìn)行分析第4課時(shí)-第7章節(jié)2、對比吸光度（或吸光系數(shù)）（二）純度檢查1、雜質(zhì)檢查：有雜質(zhì)時(shí)，吸收光譜變形。2、雜質(zhì)限量檢查：①以某一波長吸光度值表示；②以峰谷吸光度比值表示。3、對比吸收光譜的一致性將試樣與已知標(biāo)準(zhǔn)樣品用同一溶劑配制成相同濃度的溶液，在同一條件下分別掃描吸收光譜，核對其一致性。1、對比吸收光譜特征數(shù)據(jù)：λmax、λmin、λsh①不同基團(tuán)化合物可能有相同的λmax值，但εmax有明顯差別；②有相同吸光基團(tuán)同系物，其λmax、εmax值接近，但分子量不同，E1%1cm差別大。A1/A2=E1/E2相同條件下，同一物質(zhì)吸光度比值是吸光系數(shù)的比值。第4課時(shí)-第7章節(jié)二、定量分析分光光度法被廣泛的應(yīng)用在各個(gè)領(lǐng)域，環(huán)境、醫(yī)藥、石油等測定無機(jī)、有機(jī)微量成份。由于操作簡單，儀器廉價(jià)，一般說是常用的首選方法。（一）單組分的定量分析1、標(biāo)準(zhǔn)曲線（工作曲線）法：配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在同一條件下分別測定吸光度，然后以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度C為橫坐標(biāo)繪制A-C關(guān)系曲線。●符合朗-伯定律，則得到一條通過原點(diǎn)的直線?！窀鶕?jù)測得樣品吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中求得樣品溶液濃度，最后計(jì)算含量。原理:根據(jù)朗伯-比爾定律，選擇合適λ測A，求出濃度。第4課時(shí)-第7章節(jié)2、標(biāo)準(zhǔn)對照法以該物質(zhì)吸收光譜圖中max為入射光，配制一個(gè)與被測溶液濃度相近的標(biāo)準(zhǔn)溶液cS，測其AS，再將樣品溶液推入光路，測其AX，則試樣溶液的濃度cX為：3、吸光系數(shù)法：根據(jù)朗-比定律，從已知的吸光系數(shù)K和液層厚度L，根據(jù)測得的吸光度值，求出溶液濃度和含量。此法適于非經(jīng)常性的分析工作，準(zhǔn)確度不如標(biāo)準(zhǔn)曲線法。第4課時(shí)-第7章節(jié)（二）多組分的定量分析法在含有多種組分的溶液中，如果要測定多個(gè)組分，可以根據(jù)情況的不同，采用不同的方法來進(jìn)行測定。測量依據(jù)——吸光度的加和性：(1)(2)(3)第4課時(shí)-第7章節(jié)(1)圖計(jì)算法----兩組分吸收光譜不重疊（互不干擾）(2)圖計(jì)算法---兩組分吸收光譜部分重疊①a、b兩組分的吸收光譜部分重疊，此時(shí)λ1處按單組分測定a組分濃度，b組分此處無干擾。②在λ2處測得混合溶液的總吸光度A2a+b,根據(jù)加和性計(jì)算cb，假設(shè)液層厚度為1cm,則：A2a+b=A2a+A2b=E2a·ca+E2b·cb

a圖中，a,b組份最大吸收波長λmax不重迭，相互不干擾，可以按兩個(gè)單一組份處理。第4課時(shí)-第7章節(jié)(3)圖計(jì)算法----兩組分吸收光譜完全重疊--混合樣品測定1.解線性方程組法過程：

(3)圖中，a,b吸收光譜雙向重迭，互相干擾，在最大波長處互相吸收。處理方法如下：第4課時(shí)-第7章節(jié)2.等吸收雙波長法注：須滿足兩個(gè)基本條件選定的兩個(gè)波長下干擾組分具有等吸收點(diǎn)選定的兩個(gè)波長下待測物的吸光度差值應(yīng)足夠大第4課時(shí)-第7章節(jié)（三）示差分光光度法（示差法）普通分光光度法一般只適于測定微量組分，當(dāng)待測組分含量較高時(shí)，將產(chǎn)生較大的誤差。需采用示差法。即提高入射光強(qiáng)度，并采用濃度稍低于待測溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液。設(shè)：待測溶液濃度為cx，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為cs(cs<cx)。則：

Ax=E·L·cxAs=E·L·csΔＡ＝Ａx－Ａs=E·b(cx－cs）=E·L·Δc測得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度差ΔＡ。