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《生物產(chǎn)品的分析與檢驗(yàn)》維生素的分析與檢驗(yàn)-----維生素C含量的測(cè)定生物技術(shù)及應(yīng)用專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)目錄1.維生素C對(duì)人體的意義2.維生素C的性質(zhì)及結(jié)構(gòu)3.維生素C測(cè)定方法一、維生素C對(duì)人體的意義
維生素C廣泛存在于水果和蔬菜中.新鮮的水果、蔬菜,特別是棗、辣椒、櫻桃、石榴、草莓、苦瓜、柿子、獼猴桃、柑橘中含量尤為豐富.在體內(nèi)氧化還原代謝反應(yīng)中起調(diào)節(jié)作用,缺乏它可引起壞血病。維生素C缺乏癥:全身乏力、精神抑郁、厭食、貧血、牙齦腫脹、出血,骨關(guān)節(jié)肌肉疼痛,皮膚瘀點(diǎn)、瘀斑等。二、維生素C的化學(xué)結(jié)構(gòu)
維生素C是一種己糖內(nèi)酯,化學(xué)名稱為L(zhǎng)-2,3,5,6-四羥基-2-己烯酸-γ-內(nèi)酯,是一種分子結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的維生素,分子式為C6H8O6,結(jié)構(gòu)式如下:三、維生素C的性質(zhì)
維生素C(VitaminC),又叫L-抗壞血酸(AscorbicAcid),是一種白色或微黃色的粉狀結(jié)晶,易溶于水,是一種水溶性維生素。維生素C的水溶液具有顯著的酸性;維生素C是一種強(qiáng)還原劑。結(jié)晶抗壞血酸在空氣中穩(wěn)定,其水溶液極不穩(wěn)定,易被空氣或其他氧化劑氧化,其水溶液加熱或在堿性條件下更易被氧化,是一種強(qiáng)還原劑。四、維生素C含量測(cè)定方法維生素C的測(cè)定方法主要有熒光法、碘量法、2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法、紫外分光光度法、電位法及高效液相色譜法等,各種方法對(duì)實(shí)際樣品的測(cè)定均有滿意的效果。本節(jié)主要介紹碘量法(反滴定法)測(cè)定維生素C的含量。測(cè)定方法一、碘量法測(cè)定維生素C含量(一)測(cè)定原理
維生素C分子中的烯二醇基具有還原性,能被I2定量地氧化成二酮基,因此可以用碘量法測(cè)定。先用銅鹽與過(guò)量的KI進(jìn)行反應(yīng)生成游離的碘單質(zhì),加淀粉溶液作指示劑,此時(shí)溶液變?yōu)樗{(lán)色,用待測(cè)維生素C溶液滴定生成的碘,直到藍(lán)色剛褪去為終點(diǎn)。(二)儀器設(shè)備與試劑
主要儀器設(shè)備
酸式滴定管
碘量瓶250ml移液管20ml
試劑碘化鉀溶液淀粉指示劑乙酸溶液硫酸銅溶液(三)試劑溶液的配制操作步驟碘化鉀溶液,200g/L淀粉指示劑,5g/L,稱取5g可濕性干淀粉,加少量水調(diào)成糊狀,倒入微沸的100mL水中,攪勻,冷卻即可。乙酸溶液,2moL/L,稱取12g冰乙酸,加100mL水溶解。硫酸銅溶液,0.01moL/L,稱取0.25g硫酸銅(CuSO45H2O),加100mL水溶解。(四)樣品測(cè)定操作步驟1.樣品溶液的制備精確稱取0.15~0.25g研細(xì)的待測(cè)維生素C片樣品,加入10mL2moL/L的醋酸溶液,用新煮沸過(guò)的冷蒸餾水準(zhǔn)確稀釋至100mL,搖勻。(四)樣品測(cè)定操作步驟2.滴定取20%的KI溶液5mL于錐形瓶中,精確量取0.01mol/L硫酸銅溶液1mL加入錐形瓶,使其充分反應(yīng)后,再加10滴淀粉指示劑溶液,用樣品溶液滴定,至恰使藍(lán)色消失為止,記下所用樣品溶液的體積(V1)。(四)樣品測(cè)定操作步驟3.空白試驗(yàn)取20%的KI溶液5mL,加蒸餾水1mL,再加10滴淀粉指示劑溶液,然后用樣品溶液進(jìn)行滴定,邊搖邊滴定,直至與測(cè)定顏色一致為止,記下所用樣品溶液的體積(V0)。(五)結(jié)果記錄與計(jì)算1.數(shù)據(jù)記錄將所測(cè)數(shù)據(jù)填入下表式中:
項(xiàng)目
重復(fù)123待測(cè)樣品質(zhì)量(m),g滴定時(shí)所用樣品溶液的體積(V1),mL空白試驗(yàn)時(shí)所用樣品溶液的體積(V0),mL樣品溶液體積,mL樣品中維生素C含量(Wc),mg/100g樣品中維生素C的平均含量(Wc),mg/100g(四)結(jié)果記錄與計(jì)算式中:Wc--樣品中維生素C含量(mg/100g);c—硫酸銅標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,mol/L;m—待測(cè)樣品質(zhì)量,g;M—維生素C的摩爾質(zhì)量,為176.12g/moL;VCu—硫酸銅溶液的體積,mL;計(jì)算公式:Vc樣品溶液體積,mL;V1滴定時(shí)所用樣品溶液的體積,mL;V0—空白試驗(yàn)時(shí)所用樣品溶液的體積,mL;1/2—維生素C與硫酸銅的化學(xué)計(jì)量關(guān)系
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