提取蘆丁實(shí)驗(yàn)方案

超聲波提取法對(duì)苦養(yǎng)茶中蘆丁提取量的實(shí)驗(yàn)研究一、 實(shí)驗(yàn)儀器和材料超聲波發(fā)生器（型號(hào)： 生產(chǎn)廠家： ）減壓蒸餾裝置（型號(hào)：生產(chǎn)廠家：）紫外分光光度計(jì)（型號(hào)： 生產(chǎn)廠家：）恒溫干燥器100ml燒杯5個(gè)50ml燒杯5個(gè)100ml容量瓶6個(gè)25ml容量瓶6個(gè)電子天平蘆丁標(biāo)準(zhǔn)樣苦養(yǎng)樣品500g（生產(chǎn)商：甘洛縣彝家山寨農(nóng)牧科技有限公司蘆丁含量1.32%）無(wú)水乙醇2000ml亞硝酸鈉100ml硝酸鋁100ml氫氧化鈉200ml（均為分析純）蒸餾水二、 待測(cè)樣品的制備將苦養(yǎng)在40?45°C恒溫干燥箱中干燥4?5h,粉碎，過250um篩。稱取1.000g苦養(yǎng)，用一定濃度乙醇浸泡3h,超聲波提取一定的時(shí)間，減壓過濾，收集濾液至100mL容量瓶并定容至100mL，作供試液。三、 對(duì)照品溶液的制備精密稱取105C干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品10mg，置100ml容量瓶中，用60%乙醇溶解定容至刻度，搖勻，即得。四、 線性關(guān)系的考察精密量取對(duì)照品溶液0,1.0，2.0,3.0,4.0，5.0，6.0ml，S25ml容量瓶中，加蒸餾水至6ml，口5%亞硝酸鈉1ml，搖勻，靜置6分鐘，加10%硝酸鋁1ml，搖勻，靜置6分鐘，^口4%氫氧化鈉10ml，加蒸餾水至刻度，靜置15分鐘，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定吸收度，檢測(cè)波長(zhǎng)510nm。以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，求回歸方程、相關(guān)系數(shù)r。五、 樣品含量測(cè)定準(zhǔn)確吸取供試品液10.0mL于50mL容量瓶中，按照蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的蘆丁含量。具體計(jì)算方式如下：1.000g苦養(yǎng)中蘆丁質(zhì)量（mg）：M=C（mg/mL）25mLO.5lO0mL1.000g苦養(yǎng)中蘆丁提取率（%）:W（%）=六、單因素和正交試驗(yàn)利用蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線方程進(jìn)行定量評(píng)價(jià)，以原料的蘆丁提取率作指標(biāo)，分別考察乙醇濃度、超聲時(shí)間、料液比對(duì)提取率的影響，并在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上采用正交試驗(yàn)法確定苦養(yǎng)茶中蘆丁的最佳提取工藝。正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)選擇三因素三水平。根據(jù)正交設(shè)計(jì)方法按L9(3)進(jìn)行試驗(yàn)，因素水平見表1。表1正交試驗(yàn)的因素水平水平A乙醇濃度/%B超聲時(shí)間/minC料液比(g/ml)150101/30260201/40370301/50正交試驗(yàn)A乙醇濃度％B超聲時(shí)間/minC料液比(g/ml)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)提取率（%）150101/301.681250201/401.873350301/501.843460101/501.616560201/301.760660301/401.918770101/401.387870201/501.647970301/301.669T15.3974.6845.11T25.2945.285.178T34.7035.435.106k11.7991.5611.703k21.7651.7601.726k31.5681.8101.702R0.2310.2490.024優(yōu)化條件A1B3C2B>A>C最佳條件為50%乙醇、超聲時(shí)間30分、料液比1/40提取率為2.041%回收率實(shí)驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)加入法測(cè)定紫外線檢測(cè)的回收率，精確吸取樣品溶液2ml。分別加入2,3,4,m1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液后測(cè)定吸光度，由蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定值得所需的回收率。所得的平均回收率為樣品溶液/m1+蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品/ml樣品溶液中蘆丁量/mg加入標(biāo)準(zhǔn)液中蘆丁量/mg測(cè)定值回收率/%平均回收率/%RSD%2+271.70440103.2292.42+371.70460128.1597.394.32.832+471.70480141.3493.2精密度檢測(cè)對(duì)苦養(yǎng)茶提取液平行測(cè)定6次，得6個(gè)吸光度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上對(duì)應(yīng)6個(gè)濃度值，

結(jié)果見表2.其SD值為0.002%，RSD值為0.188%，偏差值較小。表2蘆丁測(cè)定的精密度結(jié)果編號(hào)123456吸光度1.2281.2281.2251.2311.2261.228穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取樣品測(cè)定液，，每隔0.5h測(cè)定一次吸收度，測(cè)定結(jié)果見表3,結(jié)果表明從測(cè)

定開始，2.5h內(nèi)其吸收度基本穩(wěn)定，平均值為1.222，RSD值為0.132%。表3蘆丁測(cè)定的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)時(shí)間/h 0 0.5 1 1.5 2.0 2.5