第二節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)演示文稿

第二節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)演示文稿目前一頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)優(yōu)選第二節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)目前二頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞工程主要技術(shù)其它動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)單克隆抗體技術(shù)核移植目前三頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)一：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

目前四頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念和原理：1、概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖.2、原理：細(xì)胞增殖目前五頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:1）營(yíng)養(yǎng)：

4）氣體環(huán)境：2）無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境：3）溫度和pH：目前六頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)條件:1）營(yíng)養(yǎng)：

對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具無(wú)菌處理；培養(yǎng)液中添加抗生素防止培養(yǎng)過(guò)程中污染；定期更換培養(yǎng)液以清除代謝產(chǎn)物，防止對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞造成危害。2）無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境：

液體合成培養(yǎng)基：（糖、氨基酸）、促生長(zhǎng)因子、（水、無(wú)機(jī)鹽、微量元素）等；通常還需加入血漿、血清等天然成分。目前七頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)條件:

適宜的溫度：人和哺乳動(dòng)物細(xì)胞最適溫度為36.5±0.5℃。適宜的酸堿度：4）氣體環(huán)境：3）溫度和pH：

“95％空氣+5％CO2”的混合氣體培養(yǎng)箱。氧氣是細(xì)胞代謝必須的；CO2維持培養(yǎng)液的PH。目前八頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)問(wèn)題1、動(dòng)物血清的作用是什么？

以提供一個(gè)類似生物體的內(nèi)環(huán)境；此外動(dòng)物血清中也包含了一些動(dòng)物的激素和酶，可以促進(jìn)細(xì)胞的發(fā)育。目前九頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)胰蛋白酶處理取出組織胚胎或幼齡動(dòng)物器官組織剪碎單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)①原代培養(yǎng)4：過(guò)程：圖示原代培養(yǎng)目前十頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)定義：人們通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。①原代培養(yǎng)4：過(guò)程：目前十一頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)問(wèn)題2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？問(wèn)題3、為什么在用酶處理前要先剪碎？因?yàn)槠浼?xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)，分化程度低。增大與酶的接觸面積。問(wèn)題3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？擴(kuò)大細(xì)胞與培養(yǎng)液的接觸面積，利與細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng)。目前十二頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)問(wèn)題5：為什么用胰蛋白酶處理？

（動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，）

胰蛋白酶處理動(dòng)物組織，可以使動(dòng)物組織細(xì)胞間的蛋白質(zhì)和細(xì)胞外的其他成分酶解，獲得單個(gè)細(xì)胞。

問(wèn)題6：為什么用胰蛋白酶處理而不用胃蛋白酶？

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的最適PH值為7.2-7.4，胰蛋白酶作用的適宜PH為7.2-8.4，胃蛋白酶適宜PH為2.胃蛋白酶在PH為7.2-7.4的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中無(wú)活性。目前十三頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)問(wèn)題7：用胰蛋白酶處理不會(huì)把所培養(yǎng)的細(xì)胞消化掉嗎？問(wèn)題8、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？控制好時(shí)間！長(zhǎng)時(shí)間處理當(dāng)然會(huì)損傷細(xì)胞。不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體目前十四頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)問(wèn)題8、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液有哪兩大特點(diǎn)？問(wèn)題9、為什么會(huì)出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)

1、貼壁生長(zhǎng)2、接觸抑制大多數(shù)組織細(xì)胞不適應(yīng)懸浮生長(zhǎng)，必須在固定的表面上生長(zhǎng)和分裂。問(wèn)題10、如何解除接觸抑制：傳代培養(yǎng)目前十五頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)強(qiáng)調(diào)一：細(xì)胞貼壁過(guò)程■細(xì)胞貼壁：在培養(yǎng)瓶懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁?！雠囵B(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿壁要求：表面光滑、無(wú)毒、易于帖附。目前十六頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)■當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。強(qiáng)調(diào)二：接觸抑制目前十七頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)

定義：當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞處于接觸抑制后,用胰蛋白酶處理,使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái),然后加入新的培養(yǎng)液,將細(xì)胞分離稀釋,并從原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),這個(gè)過(guò)程稱傳代培養(yǎng).（分瓶培養(yǎng)的過(guò)程）細(xì)胞：分為細(xì)胞株和細(xì)胞系②傳代培養(yǎng)目前十八頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)問(wèn)題11、如何界定原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)？細(xì)胞株、細(xì)胞系？原代培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)；將原代培養(yǎng)的培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進(jìn)行培養(yǎng)，這個(gè)過(guò)程就稱為傳代培養(yǎng)。

細(xì)胞分裂10－50代為細(xì)胞株；分裂50代以上極為細(xì)胞系。

目前十九頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)▲細(xì)胞株：傳代細(xì)胞一般能傳到40-50代，遺傳物質(zhì)一般不會(huì)發(fā)生改變，叫細(xì)胞株。強(qiáng)調(diào)：細(xì)胞系、細(xì)胞株▲細(xì)胞系：傳代50代以后不能再傳下去，部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，能連續(xù)傳代，獲得不死性，叫細(xì)胞系。目前二十頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)5、總結(jié)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官配置細(xì)胞懸液剪碎用胰蛋白酶處理10代細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶40-50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無(wú)限傳代單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液稀釋傳代10代以內(nèi)，遺傳物質(zhì)不改變，保持正常二倍體核型。傳代10-50代左右，增長(zhǎng)緩慢以至于完全停止，部分細(xì)胞核型可能發(fā)生變化（遺傳物質(zhì)可能改變）為什么用胰蛋白酶處理？分瓶傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)特點(diǎn)：細(xì)胞貼壁、接觸抑制繼續(xù)傳代培養(yǎng)少部分細(xì)胞獲得不死性，細(xì)胞突變，遺傳物質(zhì)已經(jīng)改變，等同于癌細(xì)胞。細(xì)胞株：一般說(shuō)遺傳物質(zhì)未改變細(xì)胞系：遺傳物質(zhì)已改變?cè)囵B(yǎng)目前二十一頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)6.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:1.蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體2.應(yīng)用于基因工程主要用于作為受體細(xì)胞3.檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性

4.細(xì)胞的生理、藥理、病理研究

如用于篩選抗癌藥物目前二十二頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較：比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖促--動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無(wú)病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白取材植物幼嫩部分或花藥胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織其他條件無(wú)菌無(wú)毒，適宜條件無(wú)菌無(wú)毒，適宜條件目前二十三頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體目前二十四頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)人—鼠細(xì)胞融合過(guò)程目前二十五頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)1、定義：指用自然或人工方法使兩個(gè)或多個(gè)不同的細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。一）、動(dòng)物細(xì)胞融合◆細(xì)胞雜交：不同基因型的細(xì)胞之間的融合就是細(xì)胞雜交?！綦s交細(xì)胞：融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞成為雜交細(xì)胞。目前二十六頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)

細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合

受精作用目前二十七頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞融合目前二十八頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)2、誘導(dǎo)融合的方法物理法：電激融合

化學(xué)法：聚乙二醇PEG誘導(dǎo)融合.生物法：滅活的病毒誘導(dǎo)融合.(動(dòng)物細(xì)胞融合所特有的。

這是由于病毒的外殼——磷脂與動(dòng)物細(xì)胞的膜十分相似的緣故。病毒外殼上的某些糖蛋白可能還有促進(jìn)細(xì)胞融合的功能。)病毒顆粒黏附細(xì)胞表面細(xì)胞膜連接細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞融合、形成雜種細(xì)胞目前二十九頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)問(wèn)題：

為什么細(xì)胞融合過(guò)程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎？

因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。若不滅活則會(huì)感染細(xì)胞，且不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。目前三十頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)3、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用

意義：細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。主要用途：利用雜交瘤技術(shù)，制備單克隆抗體。目前三十一頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)二）：動(dòng)物細(xì)胞融合的成功應(yīng)用

——單克隆抗體的制備目前三十二頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是什么?將抗原注入動(dòng)物體,然后從動(dòng)物血清中提取抗體這種方法的缺點(diǎn)是什么?效率低，產(chǎn)量有限，純度低，動(dòng)物抗體注入人體可能產(chǎn)生嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)。運(yùn)用已學(xué)知識(shí)，設(shè)想怎樣獲得單一類型的抗體？能否用單個(gè)B淋巴細(xì)胞通過(guò)克隆形成的細(xì)胞群來(lái)產(chǎn)生單一類型的抗體呢？-B淋巴細(xì)胞在體外不能無(wú)限增殖。思考目前三十三頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)單克隆抗體的制備—極富創(chuàng)造性的方案將能夠產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞和具有無(wú)限增殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合在一起，形成雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞既能在體外快速生長(zhǎng)，又能持續(xù)分泌成分單一的特異性抗體。這種單一類型的只針對(duì)某一特定抗原決定簇的抗體分子，就是單克隆抗體。米爾斯坦(阿根廷)和科勒(德國(guó))因此在1984年獲諾貝爾獎(jiǎng)。目前三十四頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)雜交細(xì)胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細(xì)胞第一次篩選用特定的選擇性培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體目前三十五頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)問(wèn)題：1）、本過(guò)程利用了哪些原理？

①免疫原理；

②細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理2）、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？

同種生物的細(xì)胞沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)；

融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)。（不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體）目前三十六頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)3）、為何要進(jìn)行兩次篩選？4）、如何進(jìn)行第2次篩選？培養(yǎng)在多孔培養(yǎng)板上，每孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。第1次篩選得到雜交瘤細(xì)胞（多種）。第2次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞群。問(wèn)題：目前三十七頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)

動(dòng)物特異性免疫

分離B淋巴細(xì)胞（B）；找到骨髓瘤細(xì)胞（G）。注意B淋巴細(xì)胞是一個(gè)系列。（B1,B2,B3,---Bn）

細(xì)胞融合——三種融合方式:（BB;BG;GG）

第一次篩選：在“選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)”上培養(yǎng)篩選雜交瘤細(xì)胞（只有BG雜交瘤細(xì)胞存活。但BG雜交瘤細(xì)胞也是一個(gè)系列：如B1G,B2G---BnG。而BB,GG在此培養(yǎng)基上不能存活。）第二次篩選：在“多孔培養(yǎng)板上”培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞系列

，每孔只放一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。“克隆化培養(yǎng)”每個(gè)雜交瘤細(xì)胞，并進(jìn)行“單一抗體檢測(cè)”，“檢測(cè)陽(yáng)性”的孔內(nèi)即是所需要的雜交瘤細(xì)胞。

選擇所需要的雜交瘤克隆細(xì)胞群，體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。

提取單克隆抗體。1、單抗的制備過(guò)程要點(diǎn)：目前三十八頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)1、作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定位等,與常規(guī)抗體相比,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速特點(diǎn).2、用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于癌癥治療。生物導(dǎo)彈：抗癌細(xì)胞的單克隆抗體+放射性同位素+化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素。（單克隆抗體：導(dǎo)向—準(zhǔn)確找到癌細(xì)胞位置；藥物—原位殺死癌細(xì)胞。）2、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。3、單克隆抗體的應(yīng)用目前三十九頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)三）、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1、定義：

動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中.使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體.3、分類：

胚胎核移植、體細(xì)胞核移植。胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易。動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難2、原理：

動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性目前四十頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)體細(xì)胞核移植過(guò)程---示動(dòng)物克隆---無(wú)性繁殖克隆羊多利培育過(guò)程：黑面綿羊去核卵母細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核細(xì)胞核移植重組細(xì)胞電脈沖刺激早期重組胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利供體受體代孕受體目前四十一頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)核移植流程:1、供體（體）、受體（卵母）細(xì)胞的采集與培養(yǎng)4、電刺激促融使供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎。3、將供體細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞緊密接觸2、顯微操作去除卵母細(xì)胞中的核5、胚胎移植入代孕母牛體內(nèi)6、妊娠分娩與供體遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)相同的犢牛。目前四十二頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)1）、克隆動(dòng)物性狀與供體動(dòng)物完全一樣嗎？2）、供體和受體動(dòng)物可為同一個(gè)體嗎？可以。不完全！因?yàn)椋阂弧⒐w動(dòng)物只提供細(xì)胞核，而細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)（如線粒體DNA）來(lái)自于受體卵母細(xì)胞.二、生物的性狀不僅與遺傳物質(zhì)有關(guān)，還受環(huán)境的影響。問(wèn)題：目前四十三頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)3）、為什么要對(duì)乳腺細(xì)胞進(jìn)行饑餓處理？4）、除電刺激促融外，還有其他方法嗎？也可用顯微注射法。

核移植的乳腺細(xì)胞是經(jīng)過(guò)細(xì)胞培育3～6代的細(xì)胞。

在饑餓狀態(tài)下，大部分細(xì)胞死亡，小部分轉(zhuǎn)入靜止期而實(shí)現(xiàn)脫分化。這些脫分化的細(xì)胞即可作核供體問(wèn)題：目前四十四頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)二、動(dòng)物細(xì)胞工程的應(yīng)用快速繁殖優(yōu)良品種克隆轉(zhuǎn)基因動(dòng)物拯救瀕危滅絕的動(dòng)物培育人造器官目前四十五頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)4.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景目前四十六頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)5.體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題目前四十七頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)

◆取供體細(xì)胞傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞.為什么？◆用的是去核的減數(shù)第二次分裂中期細(xì)胞（MⅡ中期）為什么？◆激活方法：◆激活目的：◆促融方法：電刺激◆胚胎移植至代孕受體內(nèi)

妊娠、分娩2.）核移植流程供體：優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)奶牛受體：普通奶牛（卵母細(xì)胞的采集與培養(yǎng)）

1.體積大，易操作。2.含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件。有人說(shuō)它三個(gè)母親，對(duì)嗎？目前四十八頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)例題1：1975年，英國(guó)劍橋大學(xué)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的科勒和米爾斯坦，把小鼠的淋巴細(xì)胞（脾細(xì)胞）和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合起來(lái)，成為雜交瘤細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)在體外大量生產(chǎn)抗體的目的。實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示。(1)淋巴細(xì)胞能與骨髓瘤細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，兩種細(xì)胞膜也能“融合”

在一起，說(shuō)明細(xì)胞膜

。(2)單克隆抗體的準(zhǔn)確定義應(yīng)為()A．一類特殊抗體B．無(wú)性繁殖系

C．單一抗體細(xì)胞的無(wú)性繁殖第產(chǎn)生的抗體

D．單一抗體細(xì)胞的有性繁殖系產(chǎn)生的抗體(3)雜交瘤細(xì)胞繁殖進(jìn)行的是_______分裂，其遺傳性狀__________。(4)單克隆抗體注入體內(nèi)后可以自動(dòng)追蹤抗原(病原體或癌變細(xì)胞等)并與之結(jié)合，而絕不攻擊任何正常細(xì)胞，故稱為“生物導(dǎo)彈”這是利用了

_____________

。具有一定的流動(dòng)性C有絲不變抗體能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特點(diǎn)目前四十九頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒(méi)有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。請(qǐng)回答：（1）試管中除融合的雜種細(xì)胞外，還有

種融合細(xì)胞。（2）設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，并說(shuō)原理。方法：

。原理：培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞加入氨基嘌呤后,使D合成的途徑阻斷,所以僅D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞或彼此融合的細(xì)胞就不能增殖,但雜種細(xì)胞則可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖目前五十頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)

[例題2]（1）在用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)，將抗原注射到小鼠體內(nèi)，可獲得(多選)

（）

A．T淋巴細(xì)胞B．效應(yīng)B淋巴細(xì)胞

C．抗體D．記憶細(xì)胞（2）下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中，正確的是(多選)（）

A．B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合，一般需要滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)

B．融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體

C．體外培養(yǎng)時(shí)，一個(gè)B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生一種抗體，但不能無(wú)限增殖

D．單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性明顯

BCD

ACD目前五十一頁(yè)\總數(shù)五十四頁(yè)\編于八點(diǎn)黑面綿羊去核卵母細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核a重組細(xì)胞電脈沖刺激早期重組胚胎b另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利1、寫出AB所代表細(xì)胞工程名稱：a表示：

b表示:

2、實(shí)施細(xì)胞工程時(shí)，所需受體細(xì)胞大多采用卵母細(xì)胞的原因：體積大，易操作。含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件。3、多利面部毛色是：