課題1DNA的粗提取與鑒定“十校聯(lián)賽”一等獎(jiǎng)

《DNA的粗提取與鑒定》學(xué)案一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康某醪秸莆誅NA的粗提取和鑒定的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理1．DNA的溶解性：思考題1：DNA在氯化鈉溶液中的溶解度有什么特點(diǎn)？對(duì)此有什么應(yīng)用？思考題2：利用什么原理來將DNA與蛋白質(zhì)分離開？2．DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解，但對(duì)沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受℃的高溫，而DNA在℃以上才會(huì)變性。能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒有影響。3．細(xì)胞在中易吸水而導(dǎo)致細(xì)胞膜和細(xì)胞核膜的破裂，據(jù)此可得到含有核DNA的溶液。4．DNA的鑒定：思考題3：依據(jù)什么原理來鑒定DNA？三、實(shí)驗(yàn)材料雞血細(xì)胞液思考題4：生活在牧區(qū)的人們，采集牛、羊和馬血比較方便，他們能否選用牛、羊、馬血做實(shí)驗(yàn)材料？為什么？四、實(shí)驗(yàn)步驟1．制備雞血細(xì)胞液：在雞血中加入質(zhì)量濃度為mL的溶液，離心處理；2．提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)：向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水，攪拌、過濾；思考題5：加入蒸餾水的目的是什么？為什么能達(dá)到此目的？3．溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA：加入2mol/L的氯化鈉溶液，攪拌，使DNA呈溶解狀態(tài)；4．析出含DNA的黏稠物：加入蒸餾水，用玻璃棒攪拌；思考題6：此時(shí)加入蒸餾水的目的是什么？5．濾取含DNA的黏稠物：過濾；思考題7：這次過濾與上次過濾的目的一樣嗎？為什么？6．將DNA的黏稠物再溶解：加入2mol/L的氯化鈉溶液，攪拌，使DNA呈溶解狀態(tài)；7．過濾含有DNA的氯化鈉溶液：過濾；思考題8：這一步驟的目的是什么？思考題9：為什么反復(fù)地溶解與析出DNA，能夠去除雜質(zhì)？8．提取含雜質(zhì)較少的DNA：加入冷卻的95%的酒精，攪拌；思考題10：這一步驟的目的是什么？思考題11：為什么加入的酒精需要冷卻的？9．DNA的鑒定：取兩支試管，各加入0．015mol/L的氯化鈉溶液5mL，一支加入提取的DNA，兩支各加入4mL的二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝笾糜诜兴屑訜帷Ｋ伎碱}12：為什么要設(shè)置對(duì)照組？實(shí)驗(yàn)中能觀察到什么現(xiàn)象？

參考答案思考題：思考題1．DNA在氯化鈉溶液中的溶解度，隨著氯化鈉的濃度的變化而改變的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為L(zhǎng)時(shí)，DNA的溶解度最低。利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出；思考題2．DNA不溶于酒精，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步地分離。思考題3．DNA遇二苯胺（沸水浴）被染成藍(lán)色，所以可用二苯胺作鑒定。思考題4．不能。因?yàn)椴溉閯?dòng)物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核，僅靠白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞中的少數(shù)DNA，在實(shí)驗(yàn)中很難提取到。思考題5．加速了雞血細(xì)胞的破裂（細(xì)胞膜和核膜的破裂），從而釋放出DNA；蒸餾水對(duì)于雞血細(xì)胞來說是一種低滲液體，水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi)，使血細(xì)胞脹裂。思考題6．使氯化鈉溶液濃度接近L，使DNA最大限度地析出。思考題7．不一樣；這次過濾是為了去除不溶于氯化鈉溶液的雜質(zhì)，而上次過濾是為了去除破裂的細(xì)胞膜等物質(zhì)。思考題8．除去含有DNA濾液中的雜質(zhì)；思考題9．用高鹽濃度的溶液溶解DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽濃度使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此，通過反復(fù)溶解與析出DNA，就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。思考題10